3.2-體外受精和早期胚胎發(fā)育

3.2體外受精和早期胚胎培養(yǎng)學(xué)習(xí)目標(biāo)簡述哺乳動物體外受精技術(shù)的主要操作步驟簡述哺乳動物胚胎的早期培養(yǎng)方法認(rèn)同體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義學(xué)習(xí)重點（1）體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義（2）哺乳動物體外受精技術(shù)的主要操作步驟學(xué)習(xí)難點（1）卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)（2）精子的采集和獲能一、試管動物技術(shù)概念通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)過移植產(chǎn)生后代的技術(shù)精子卵子受精卵早期胚胎子宮移植個體過程:人工操作體外受精1982年世界首例試管牛犢問世實現(xiàn)良種?？焖俅罅糠敝呈紫纫龅氖?/p>

和

的培養(yǎng)。體外受精早期胚胎主要包括

、

和

等幾個主要步驟。概念：采取雌性動物的

和雄性動物的

，使其在

受精。二、體外受精卵母細(xì)胞精子體外卵母細(xì)胞的采集精子的獲取受精a.如何使雌性動物排出更多的卵子？b.對實驗動物小鼠、兔和小家畜豬、羊如何采集卵子？c.對于大家畜或大型動物如何采集卵子？d.采集的卵子是否馬上可以受精？閱讀P69、70思考以下問題：1.卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)采用的主要方法是給供體注射

，使其排出更多的卵子，之后從

中沖取卵子，直接與獲能的精子在體外受精。促性腺激素輸卵管a.如何使雌性動物排出更多的卵子？超數(shù)排卵處理b.對實驗動物小鼠、兔和小家畜豬、羊如何采集卵子？對不同動物,采集卵母細(xì)胞的方法不同。1.卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)大家畜或大型動物，如牛，卵細(xì)胞的采集：從屠宰場已屠宰母畜的

中采集卵母細(xì)胞，也可以借助

、

或

等工具，直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞。卵巢超聲波(B超)探測儀內(nèi)窺鏡腹腔鏡1.卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)c.對于大家畜或大型動物如何采集卵子？d.采集的卵子是否馬上可以受精？經(jīng)超數(shù)排卵處理獲得卵子可直接與獲能的精子在體外受精；但從已屠宰母畜的卵巢或活體采卵采集的卵母細(xì)胞，都要在體外經(jīng)

后，才能與

精子結(jié)合完成受精。人工培養(yǎng)成熟獲能MⅡ中期2、精子細(xì)胞的采集和獲能（2）體外精子獲能的方法：培養(yǎng)法:化學(xué)誘導(dǎo)法:如：嚙齒動物、家兔和豬等如：牛、羊等家畜放入人工配制的獲能液中放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中b.體外受精需要哪些前處理？卵巢卵母細(xì)胞新鮮或解凍的精液卵母細(xì)胞培養(yǎng)精子離心處理MⅠ期卵母細(xì)胞MⅡ期卵母細(xì)胞精子獲能處理獲能精子體外受精受精卵培養(yǎng)3、受精獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵子，一般情況下在或中完成受精過程。

獲能溶液專用的受精溶液為什么要經(jīng)過離心處理？精液包含精子和精清（精漿）兩部分，經(jīng)離心處理后，可以除去精清以利于精子獲能精子和卵子在體外受精后，應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。培養(yǎng)液成分：有機鹽、無機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等三、胚胎的早期培養(yǎng)“兩鹽”、“兩酸”、“兩素”、血清和水糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、促生長因子、血清、血漿等三、胚胎的早期培養(yǎng)發(fā)育培養(yǎng)液成分較一般動物細(xì)胞培養(yǎng)液復(fù)雜動物細(xì)胞培養(yǎng)液：動物胚胎培養(yǎng)液成分：有機鹽、無機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等培養(yǎng)發(fā)育到適宜階段時，可將其取出向受體移植或冷凍保存三、胚胎的早期培養(yǎng)不同動物胚胎移植時間不同牛、羊：小鼠、家兔：試管嬰兒：桑椹胚或囊胚階段注：胚胎發(fā)育的主要場所是母體（在體內(nèi)發(fā)育）可在更早的階段移植8~16個細(xì)胞階段采集良種母牛的卵母細(xì)胞卵母細(xì)胞的體外培養(yǎng)采集良種公牛精子精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎胚胎移植受體牛良種犢牛成熟期牛屠宰加工廠市場采集卵巢中的卵母細(xì)胞“試管牛”工廠化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖（早期胚胎培養(yǎng)）早期胚胎胚胎移植C代孕母體D新個體（與B遺傳物質(zhì)相同）克隆動物的培育過程A雌性動物卵母細(xì)胞去核細(xì)胞質(zhì)取核B動物體細(xì)胞核移植顯微注射重組細(xì)胞有性生殖

核移植遵循

體外受精試管動物克隆動物發(fā)育起點生殖方式產(chǎn)生過程遺傳物質(zhì)遺傳規(guī)律比較試管動物和克隆動物來自雙親受精卵重組細(xì)胞無性生殖主要來自核供體不遵循二者都要經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植胚胎移植采集卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)采集精子體外獲能體外受精早期胚胎培養(yǎng)受體牛小結(jié)（時期：）

1）超數(shù)排卵（試劑）

2）活體取卵（儀器）

3）從屠宰的卵巢取卵培養(yǎng)法化學(xué)法獲能液或?qū)Ｓ檬芫芤海ㄅ囵B(yǎng)條件、目的階段）成熟的卵子獲能的精子MII中期

1）假陰道法

2）手握法

3）電刺激法1、下列動物可用培養(yǎng)法進行精子體外獲能處理的是（）A、牛B、羊C、驢D、家兔D鞏固練習(xí)2、不同動物胚胎移植的時間不同，但一般不會在下列哪個時期移植（）

A、卵裂期B、桑椹胚期

C、囊胚期D、原腸胚期D3、下列關(guān)于試管動物技術(shù)的敘述正確的是：A、應(yīng)用該技術(shù)繁育后代的過程屬于無性繁殖類型B、應(yīng)用該技術(shù)繁育后代的過程屬于有性繁殖類型C、試管動物技術(shù)是利用體細(xì)胞繁育后代的技術(shù)D、試管動物技術(shù)培育動物過程全部在體外進行B5、動物試管技術(shù)是指通過人工操作使精子和卵子在_______條件下成熟和________，并通過培養(yǎng)發(fā)育為_______后，再經(jīng)_______產(chǎn)生后代的技術(shù)。體外受精胚胎移植6、哺乳動物的體外受精主要包___