實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測定_第1頁
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關(guān)于實(shí)驗(yàn)三網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血沉測定第1頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月一、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)目的

掌握網(wǎng)織紅細(xì)胞(Ret)試管法計(jì)數(shù)的原理及操作方法。原理

網(wǎng)織紅細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)殘存少量核蛋白體及核糖核酸等嗜堿性物質(zhì),經(jīng)煌焦油藍(lán)或新亞甲藍(lán)等染液活體染色后,呈藍(lán)色網(wǎng)狀或點(diǎn)狀結(jié)構(gòu),可與成熟紅細(xì)胞相區(qū)別。第2頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月器材

顯微鏡、試管、吸管、玻片、推片、香柏油、擦鏡紙、擦鏡液試劑

新亞甲藍(lán)標(biāo)本新鮮全血第3頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月操作步驟1.加染液將Ret染液2滴加至小試管中,做好標(biāo)記。2.加血在已加入染液的小試管內(nèi)注入新鮮全血2滴,立即混勻。3.染色室溫下染色10-15min。4.涂片制備取染色血1小滴推制成薄血涂片,自然干燥5.觀察低倍鏡下選擇紅細(xì)胞分布均勻、著色好、背景清晰的部位進(jìn)行計(jì)數(shù)。6.計(jì)數(shù)

常規(guī)法:在油鏡下計(jì)數(shù)至少1000個(gè)紅細(xì)胞中的網(wǎng)織紅細(xì)胞。7.計(jì)算

Ret百分?jǐn)?shù)=(1000個(gè)RBC中的Ret數(shù)/1000)×100%8.結(jié)果報(bào)告網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù):X.X%第4頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月血涂片制備推片載玻片血液將推片勻速向前,勿停頓。涂片的厚薄取決于速度和角度。一張滿意的血涂片應(yīng)厚薄均勻

頭體尾涂片干燥后用鉛筆在血涂片的頭部寫上姓名和編號(hào)李四B123第5頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月參考區(qū)間成人、兒童:0.5%-1.5%新生兒:2.0%-6.0%第6頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月注意事項(xiàng)1.試劑準(zhǔn)備推薦使用新亞甲藍(lán)染液,試劑應(yīng)定期配制,用前過濾。2.染色染液與血液比以1:1為宜,染色時(shí)間不能過短。試劑用后及時(shí)蓋好蓋子,以免揮發(fā)。3.標(biāo)本應(yīng)及時(shí)染色,及時(shí)測定。4.計(jì)數(shù)選擇紅細(xì)胞分布均勻,網(wǎng)織紅細(xì)胞著色好的、背景清晰的部位計(jì)數(shù)。應(yīng)兼顧血片邊緣和尾部。第7頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月目的掌握魏氏法測定血沉的原理及方法。原理將一定量的枸櫞酸鈉抗凝全血置于魏氏血沉管中,直立于血沉架上,由于紅細(xì)胞比重大于血漿,克服血漿阻力而下沉,1h后讀取上層血漿高度的毫米數(shù),即為紅細(xì)胞沉降率。器材魏氏管、血沉架、洗耳球。(血沉管)試劑

109mmol/L枸櫞酸鈉溶液。標(biāo)本外周血。二、血液沉降率測定(魏氏法)第8頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月1.采血采靜脈血1.6ml加入含0.4ml109mmol/L枸櫞酸鈉溶液抗凝劑的采血管中(即采血量到采血管2ml刻度線處),混勻。2.吸血混勻血吸入血沉管內(nèi)至刻度“0”處,拭去管外殘余血。3.立血沉管將血沉管直立于血沉架上。4.讀數(shù)

1h末準(zhǔn)確讀取紅細(xì)胞下沉后露出的血漿高度。5.報(bào)告方式

XXmm/h操作步驟第9頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月參考值

<50歲:男性<15mm/h

女性<20mm/h

>50歲:男性<20mm/h

女性<30mm/h

>85歲:男性<30mm/h

女性<42mm/h

兒童:<10mm/h二、血液沉降率測定(魏氏法)第10頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月注意事項(xiàng)

1.嚴(yán)格控制采血量,使抗凝劑與血液比例為1:4。

2.血沉管應(yīng)垂直放置,不得傾斜。

3.測量時(shí),血沉架應(yīng)避免直接光照、移動(dòng)和振動(dòng)。

4.本實(shí)驗(yàn)最適宜溫度為18~25℃,并要求在采血后2h內(nèi)完成。

5.紅細(xì)胞沉降率在1h沉降過程中,并不是均衡等速度的沉降,絕不可以只觀察30min沉降率,將結(jié)果乘以2作為1h血沉結(jié)果。第11頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月二、血液沉降率測定(自動(dòng)血沉儀法)第12頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月白細(xì)胞計(jì)數(shù)一、目的

掌握顯微鏡白細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法。二、原理

用白細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù),同時(shí)破壞溶解紅細(xì)胞。將稀釋的血液沖入計(jì)數(shù)池后,在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的白細(xì)胞數(shù),經(jīng)換算求出每升血液中的白細(xì)胞數(shù)。第13頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月三、器材

顯微鏡、改良計(jì)數(shù)板、血蓋片、試管、微量吸管、加樣槍、乳膠吸頭、紗布四、試劑

白細(xì)胞稀釋液五、標(biāo)本

EDTA鹽抗凝血第14頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月六、操作1.加稀釋液用加樣槍吸取白細(xì)胞稀釋液0.38ml于小試管中。2.加血用清潔干燥微量吸管吸取抗凝血20μl,擦去管外余血,輕輕加至白細(xì)胞稀釋液底部,再輕吸上清液清洗吸管2~3次,混勻。3.充池混勻后用微量吸管將細(xì)胞懸液沖入計(jì)數(shù)池,室溫下平放3~5分鐘,待細(xì)胞下沉后于顯微鏡下計(jì)數(shù)。4.計(jì)數(shù)用低倍鏡依次計(jì)數(shù)四角4個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。5.計(jì)算白細(xì)胞/L=N/4×10×20×106=N/20×109/L6.報(bào)告方式X.X×109/L。第15頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月七、注意事項(xiàng)1.充池前應(yīng)將白細(xì)胞懸液充分混勻。

2.在充池時(shí)要一次完成,不能產(chǎn)生滿溢、氣泡或充池不足及充液后玻片移動(dòng)的現(xiàn)象。

3.白細(xì)胞在計(jì)數(shù)池中若分布不均,各大方格間細(xì)胞計(jì)數(shù)不得相差8個(gè)以

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