生物化學檢驗【課堂】糖化血紅蛋白測定吳小波

職業(yè)教育醫(yī)學檢驗技術專業(yè)教學資源庫生物化學檢驗技術糖化血紅蛋白測定BASICCLINICALLABORATORYMEDICINE2糖化血紅蛋白(GHb)是由血清中糖類物質和血紅蛋白結合形成的化合物。糖化血紅蛋白模型圖血紅蛋白HbA(α2β2)模型圖正常成人的血紅蛋白有三種，分別為：HbA、HbA2、HbF。HbA是由2條α鏈和2條β鏈組成的，即α2β2。它是正常成人體內含量最多的血紅蛋白，占比約為95%-97%；HbA2的分子結構是α2δ2，它在正常成人體內含量占比約為2%-3%；HbF的分子結構是α2γ2，它在正常成人體內含量最少，占比約為0.5%左右。血清中的糖類物質通過紅細胞膜進入紅細胞體內與血紅蛋白β鏈上的N-末端纈氨酸殘端，以非酶促、共價的方式結合在一起就形成了糖化血紅蛋白。葡萄糖分子血紅蛋白分子糖化血紅蛋白這種結合是一種緩慢的、不可逆的反應，糖化血紅蛋白一旦形成就不再解離，在血液中會相對穩(wěn)定的存在。通過以上的概念我們發(fā)現(xiàn)，血清中的糖類物質結合血紅蛋白的位點是β鏈上的N-末端，所以，我們不難理解，血清中的糖類物質只能與含有β鏈的HbA相結合，而HbA2和HbF沒有β鏈，所以它們不能和糖類物質結合。我們將結合了糖類物質的HbA命名為HbA1，也稱為糖化血紅蛋白。

通過HbA與不同的糖類物質結合又可分類為HbA1a、HbA1b

、HbA1c，其中HbA1c是HbA與血清中的葡萄糖結合形成的糖化血紅蛋白，是HbA1中含量最多的，占比達80%。因此，臨床上常以HbA1c代表糖化血紅蛋白的水平，也有人將糖化血紅蛋白直接稱為HbA1c。

GHb生成速率取決于一段時間內血糖的平均含量和紅細胞的壽命，血糖濃度越高，血糖與紅細胞接觸時間越長，GHb的生成量也就越多。正常紅細胞平均壽命約為120天，因此GHb的濃度可以反映測定前2-3個月內受試者血糖的平均水平，而與血糖的短期波動無關，是評價糖尿病患者血糖控制效果的良好指標。

GHb的測定方法可分為兩大類：一類是將HbA1從HbA中分離出來并進行定量分析。常用的方法有離子交換層析微柱法、比色法、電泳法和親和層析法等。離子交換層析微柱法在臨床上較常用。它利用HbA1和HbA所帶電荷不同，以及對交換樹脂的附著力不同的原理將它們分離，然后用分光光度計在410nm處測定HbA1的濃度，最后計算HbA1占總血紅蛋白的百分比。健康成人的正常參考區(qū)間為5.0%-8.0%。另一類是將HbA1c分離出來并進行定量分析。如高效液相色譜法、免疫法、等電聚焦法等。高效液相色譜法需要高精密的專業(yè)儀器，技術要求高，準確度高，是HbA1c測定的參考方法。全自動糖化血紅蛋白儀（高效液相色譜法）免疫學方法測定HbA1c是利用抗原-抗體反應的原理，直接測定溶血后的HbA1c的濃度，再計算HbA1c占總血紅蛋白的百分比。

由于存在兩種計算方案，所以就形成了兩個不同的健康成人正常參考區(qū)間：1、國際臨床化學和實驗室醫(yī)學聯(lián)盟（IFCC）計算方案：HbA1c（%）=HbA1c/Hb100%健康成人：HbA1c：2.8%-3.8%。2、糖尿病控制和并發(fā)癥實驗/美國糖化血紅蛋白標準化方案

（DCCT/NGSP）計算方案：

HbA1c（%）=87.6HbA1c/Hb+2.27健康成人：HbA1c：4.8%-6.0%。糖化血紅蛋白測定的臨床意義：（1）糖化血紅蛋白是糖尿病患者長期血糖控制的評價指標：能反映檢測前2-3個月內的平均血糖水平，而與抽血時間、患者是否空腹、當前是否使用胰島素等因素無關，是糖尿病監(jiān)控達標的“金標準”。當血糖控制不佳時，GHb可達正常的2倍以上。目前我國糖尿病患者GHb控制標準，以HbA1c測定結果為例，評價如下：GHb4.0%~6.0%表明血糖控制正常；GHb6.0%~7.0%表明血糖控制比較理想；GHb7.0%~8.0%表明血糖控制一般；GHb8.0%~9.0%表明血糖控制較差，應注意飲食；GHb>9.0%表明血糖控制很差，應注意飲食結構，同時還需調整治療方案。（2）對糖尿病性高血糖和應激性高血糖作出鑒別：前者GHb水平多增高，后者正常。（3）HbA1c水平低于參考區(qū)間，可能表明最近有低血糖發(fā)作、或者有Hb變異體存在或者是紅胞壽命縮短，減少了紅細胞暴露到葡萄糖中的時間。但較少出現(xiàn)此類情況，所以需謹慎解釋此類患者的H