生物化學(xué)檢驗(yàn)【課堂】糖化血紅蛋白測(cè)定吳小波

職業(yè)教育醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)生物化學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)糖化血紅蛋白測(cè)定BASICCLINICALLABORATORYMEDICINE2糖化血紅蛋白(GHb)是由血清中糖類物質(zhì)和血紅蛋白結(jié)合形成的化合物。糖化血紅蛋白模型圖血紅蛋白HbA(α2β2)模型圖正常成人的血紅蛋白有三種，分別為：HbA、HbA2、HbF。HbA是由2條α鏈和2條β鏈組成的，即α2β2。它是正常成人體內(nèi)含量最多的血紅蛋白，占比約為95%-97%；HbA2的分子結(jié)構(gòu)是α2δ2，它在正常成人體內(nèi)含量占比約為2%-3%；HbF的分子結(jié)構(gòu)是α2γ2，它在正常成人體內(nèi)含量最少，占比約為0.5%左右。血清中的糖類物質(zhì)通過紅細(xì)胞膜進(jìn)入紅細(xì)胞體內(nèi)與血紅蛋白β鏈上的N-末端纈氨酸殘端，以非酶促、共價(jià)的方式結(jié)合在一起就形成了糖化血紅蛋白。葡萄糖分子血紅蛋白分子糖化血紅蛋白這種結(jié)合是一種緩慢的、不可逆的反應(yīng)，糖化血紅蛋白一旦形成就不再解離，在血液中會(huì)相對(duì)穩(wěn)定的存在。通過以上的概念我們發(fā)現(xiàn)，血清中的糖類物質(zhì)結(jié)合血紅蛋白的位點(diǎn)是β鏈上的N-末端，所以，我們不難理解，血清中的糖類物質(zhì)只能與含有β鏈的HbA相結(jié)合，而HbA2和HbF沒有β鏈，所以它們不能和糖類物質(zhì)結(jié)合。我們將結(jié)合了糖類物質(zhì)的HbA命名為HbA1，也稱為糖化血紅蛋白。

通過HbA與不同的糖類物質(zhì)結(jié)合又可分類為HbA1a、HbA1b

、HbA1c，其中HbA1c是HbA與血清中的葡萄糖結(jié)合形成的糖化血紅蛋白，是HbA1中含量最多的，占比達(dá)80%。因此，臨床上常以HbA1c代表糖化血紅蛋白的水平，也有人將糖化血紅蛋白直接稱為HbA1c。

GHb生成速率取決于一段時(shí)間內(nèi)血糖的平均含量和紅細(xì)胞的壽命，血糖濃度越高，血糖與紅細(xì)胞接觸時(shí)間越長(zhǎng)，GHb的生成量也就越多。正常紅細(xì)胞平均壽命約為120天，因此GHb的濃度可以反映測(cè)定前2-3個(gè)月內(nèi)受試者血糖的平均水平，而與血糖的短期波動(dòng)無關(guān)，是評(píng)價(jià)糖尿病患者血糖控制效果的良好指標(biāo)。

GHb的測(cè)定方法可分為兩大類：一類是將HbA1從HbA中分離出來并進(jìn)行定量分析。常用的方法有離子交換層析微柱法、比色法、電泳法和親和層析法等。離子交換層析微柱法在臨床上較常用。它利用HbA1和HbA所帶電荷不同，以及對(duì)交換樹脂的附著力不同的原理將它們分離，然后用分光光度計(jì)在410nm處測(cè)定HbA1的濃度，最后計(jì)算HbA1占總血紅蛋白的百分比。健康成人的正常參考區(qū)間為5.0%-8.0%。另一類是將HbA1c分離出來并進(jìn)行定量分析。如高效液相色譜法、免疫法、等電聚焦法等。高效液相色譜法需要高精密的專業(yè)儀器，技術(shù)要求高，準(zhǔn)確度高，是HbA1c測(cè)定的參考方法。全自動(dòng)糖化血紅蛋白儀（高效液相色譜法）免疫學(xué)方法測(cè)定HbA1c是利用抗原-抗體反應(yīng)的原理，直接測(cè)定溶血后的HbA1c的濃度，再計(jì)算HbA1c占總血紅蛋白的百分比。

由于存在兩種計(jì)算方案，所以就形成了兩個(gè)不同的健康成人正常參考區(qū)間：1、國(guó)際臨床化學(xué)和實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)聯(lián)盟（IFCC）計(jì)算方案：HbA1c（%）=HbA1c/Hb100%健康成人：HbA1c：2.8%-3.8%。2、糖尿病控制和并發(fā)癥實(shí)驗(yàn)/美國(guó)糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化方案

（DCCT/NGSP）計(jì)算方案：

HbA1c（%）=87.6HbA1c/Hb+2.27健康成人：HbA1c：4.8%-6.0%。糖化血紅蛋白測(cè)定的臨床意義：（1）糖化血紅蛋白是糖尿病患者長(zhǎng)期血糖控制的評(píng)價(jià)指標(biāo)：能反映檢測(cè)前2-3個(gè)月內(nèi)的平均血糖水平，而與抽血時(shí)間、患者是否空腹、當(dāng)前是否使用胰島素等因素?zé)o關(guān)，是糖尿病監(jiān)控達(dá)標(biāo)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。當(dāng)血糖控制不佳時(shí)，GHb可達(dá)正常的2倍以上。目前我國(guó)糖尿病患者GHb控制標(biāo)準(zhǔn)，以HbA1c測(cè)定結(jié)果為例，評(píng)價(jià)如下：GHb4.0%~6.0%表明血糖控制正常；GHb6.0%~7.0%表明血糖控制比較理想；GHb7.0%~8.0%表明血糖控制一般；GHb8.0%~9.0%表明血糖控制較差，應(yīng)注意飲食；GHb>9.0%表明血糖控制很差，應(yīng)注意飲食結(jié)構(gòu)，同時(shí)還需調(diào)整治療方案。（2）對(duì)糖尿病性高血糖和應(yīng)激性高血糖作出鑒別：前者GHb水平多增高，后者正常。（3）HbA1c水平低于參考區(qū)間，可能表明最近有低血糖發(fā)作、或者有Hb變異體存在或者是紅胞壽命縮短，減少了紅細(xì)胞暴露到葡萄糖中的時(shí)間。但較少出現(xiàn)此類情況，所以需謹(jǐn)慎解釋此類患者的H