高中生物選修三動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體_第1頁(yè)
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關(guān)于高中生物選修三動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體第1頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月

回憶已學(xué)知識(shí),你是否已經(jīng)見到過動(dòng)物細(xì)胞融合的實(shí)例?人-鼠(想像圖)第2頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體第3頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月鼠細(xì)胞人細(xì)胞人工誘導(dǎo)一、動(dòng)物細(xì)胞融合雜交細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合(技術(shù)):是指(在一定的條件下)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。1、概念:第4頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月2、誘導(dǎo)融合的因素化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)融合.物理法:電激融合生物法:滅活的病毒誘導(dǎo)融合.病毒顆粒黏附細(xì)胞表面細(xì)胞膜連接細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通細(xì)胞融合、形成雜種細(xì)胞

為什么滅活的病毒能作誘導(dǎo)劑?滅活喪失感染性但保留融合活性第5頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月獲得雜種植株物理、化學(xué)方法(同左)滅活的病毒

物理(離心、振蕩、電激)化學(xué)(聚乙二醇)直接誘導(dǎo)細(xì)胞融合去壁—原生質(zhì)體融合—誘導(dǎo)新壁—雜種植株細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性結(jié)果誘導(dǎo)方法步驟融合的原理動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較獲得雜交細(xì)胞小結(jié)第6頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月3、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用第7頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月問題:抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生?其化學(xué)本質(zhì)是什么?與抗原作用的特點(diǎn)?主要分布在哪里?二、單克隆抗體的制備第8頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法:從血清中分離抗體

該法制備抗體的特點(diǎn):

產(chǎn)量低、純度低,且抗體的特異性差。多種漿細(xì)胞動(dòng)物體內(nèi)多種抗體抗原第9頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月提示:每一個(gè)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng)的抗體。如果利用單個(gè)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖(克?。纬杉?xì)胞群,這樣的細(xì)胞群就有可能產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體——單克隆抗體。問題:怎樣獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體呢?第10頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月材料:效應(yīng)B細(xì)胞在體內(nèi)只能由B淋巴細(xì)胞增殖、分化而來,不再進(jìn)行分裂,在體外培養(yǎng)的條件下,也很難分裂。思考:用什么方法才能讓B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖?第11頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月雜交瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)單克隆抗體

既能產(chǎn)生特異性抗體,又能大量繁殖的細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖+一個(gè)漿細(xì)胞只分泌一種特異性抗體設(shè)計(jì)方案:米爾斯坦科勒第12頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月讀下面一段文字資料,找出單克隆抗體的概念

人們發(fā)現(xiàn),在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中,體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體,但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體,必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖,即克隆。單克隆抗體的概念單:單個(gè)細(xì)胞克隆:無性繁殖單克隆抗體:單個(gè)細(xì)胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一特異性強(qiáng)的抗體第13頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月單克隆抗體的制備問題思考Q1Q2細(xì)胞兩兩融合后,有哪些類型?B-B;B-瘤;瘤-瘤哪種是需要的類型,要篩選嗎?第14頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月①細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。②人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑,但一般不分裂增殖。

③鼠骨髓瘤細(xì)胞中只有D途徑,沒有S途徑,可是能不斷分裂增殖。你想到篩選雜交瘤細(xì)胞的方案了么?

小資料:第15頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月單克隆抗體的制備問題思考Question經(jīng)過選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細(xì)胞群進(jìn)行克隆是否就得到產(chǎn)生純度高的抗體?還需怎么辦?第16頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月有限稀釋法稀釋多次稀釋對(duì)能產(chǎn)生特異性抗體的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆,即單細(xì)胞克隆。由它產(chǎn)生的抗體,即單克隆抗體。將培養(yǎng)皿孔內(nèi)的上清液取出,檢測(cè)抗體。多孔細(xì)胞培養(yǎng)板第17頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月單克隆抗體雜交細(xì)胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細(xì)胞第一次篩選用特定的選擇培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體4.單抗制備過程中應(yīng)用了那些技術(shù)?動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.此過程中至少進(jìn)行了幾次篩選?目的相同嗎?3.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)?特異性強(qiáng),靈敏度高,可大量制備。2.最終從哪兒提取單克隆抗體?第18頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(1)作為診斷試劑——最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速(如同位素標(biāo)記單克隆抗體,可診斷腫瘤、心血管畸形等)三、單克隆抗體的應(yīng)用第19頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(2)治療疾病和運(yùn)載藥物生物導(dǎo)彈=單克隆抗體+藥物(治療腫瘤)(“生物導(dǎo)彈”—單抗導(dǎo)向,藥物為彈頭)單克隆抗體的應(yīng)用療效高、副作用小第20頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合,得到雜交細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體,與骨髓瘤細(xì)胞融合的是()A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞

C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞D.沒經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞A鞏固練習(xí)2.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中,正確的是()誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段基本相同C.操作步驟基本相同D.都能形成雜種細(xì)胞D第21頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月3.單克隆抗體制備過程中培育的雜交細(xì)胞是()A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合B.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成C.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與肌瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成D.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成D4.只能使動(dòng)物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法是()

A.PEG

B.滅活的病毒C.電刺激D.離心B第22頁(yè),課件共25頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月5.單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后,要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是()①淋巴細(xì)胞②小鼠骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞A.②④B.①③⑤

C.①②③④

D.②③C6.“生

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