分子生物學(xué)名詞解釋及問(wèn)答題

名詞解釋、操縱序列（因）及其他調(diào)節(jié)序列構(gòu)成。順式作用元件是真核基因變大調(diào)控轉(zhuǎn)錄過(guò)程的特殊DNA通常包括啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、沉默子等。能不同分為基因轉(zhuǎn)錄因子和特異性轉(zhuǎn)錄因子。RNADNA序列，與基因轉(zhuǎn)錄起始有關(guān)。同源重組：是指發(fā)生在同源序列見得重組，它通過(guò)鏈的斷裂和再連接，在兩個(gè)DNA分子同源序列間進(jìn)行單鏈或雙鏈的交換。又稱基因重組。DNADNA細(xì)胞內(nèi)，使其在細(xì)胞擴(kuò)增和繁殖，從而獲得該DNA分子大量拷貝的過(guò)程稱為分子克隆，又叫基因克隆或重組DNA技術(shù)。基因工程：在體外將目的基因和載體DNA按照既定的目的基因進(jìn)行人工重組，并將重組體植物、基因工程生產(chǎn)藥物、基因診斷和基因治療等。限制性核酸內(nèi)切酶：指一類能識(shí)別和切割雙鏈DNA分子內(nèi)特定的堿基順序的核酸水解酶，絕大多數(shù)是從原核細(xì)胞中提取的，可分為三類，其中Ⅱ型是分子克隆中最常用的工具酶。Ampr和重組轉(zhuǎn)化菌。gDNA文庫(kù)：即基因組DNA文庫(kù)，是指存在于轉(zhuǎn)化菌內(nèi)、由克隆載體所攜帶的所有基因組DNA的集合。它涵蓋了基因組全部基因信息。cDNA文庫(kù)：是細(xì)胞總mRNA的克隆，文庫(kù)只包含表達(dá)蛋白質(zhì)或多肽的基因。態(tài)，此時(shí)的宿主細(xì)胞即稱為感受態(tài)細(xì)胞。基因診斷：又稱DNA診斷，是利用分子生物學(xué)即分子遺傳學(xué)的技術(shù)和原理，在DNA水平分析、鑒定遺傳性疾病所涉及的基因異常。基因治療：向有功能缺陷的細(xì)胞導(dǎo)入具有相應(yīng)功能的外源基因，以糾正活補(bǔ)償其基因缺陷，從而達(dá)到治療的目的，包括體細(xì)胞基因治療和性細(xì)胞基因治療。宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制或表達(dá)，所以對(duì)宿主細(xì)胞DNA而言，又稱它為外源性基因或外源性DNA。質(zhì)粒：是獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外，能自主復(fù)制的共價(jià)閉合環(huán)狀雙鏈DNA。細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)：細(xì)胞針對(duì)外源信息所發(fā)生的細(xì)胞內(nèi)生物學(xué)變化及效應(yīng)的全過(guò)程。receptr是蛋白質(zhì)，個(gè)別糖脂。鳥苷酸結(jié)合蛋白G蛋白亦稱GTP結(jié)合蛋白，是一類信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，此類蛋白由于其生理活性有賴于三磷酸鳥苷（GTP）的結(jié)合以及具有GTP水解酶的活性而得名，在各種細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)給不同的效應(yīng)蛋白。核酸分子雜交DNARNA來(lái)檢測(cè)樣品中未知核苷酸順序的分子生物學(xué)技術(shù)，若二者結(jié)合后，經(jīng)顯影或顯色可知結(jié)合的位置和大小，這一過(guò)程稱為核酸分子雜交。（印跡析的技術(shù)。核酸探針：指用來(lái)檢測(cè)某一特定核苷酸順序或基因順序的有同位素或非同位素標(biāo)記的已知DNA或NA片段。SouthernE.SouthernDNA片段轉(zhuǎn)移到載體膜（NC膜，并將DNA固定于膜上的過(guò)程稱為Southern印跡。PCR即聚合酶鏈反應(yīng)，是體外DNA即逆轉(zhuǎn)錄PCR，又稱RNA-PCRmRNA為模板，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄和體外擴(kuò)增放大得到大量cDNAPCR技術(shù)。gDNAlibrar包含某一個(gè)生物的全部基因組DNADNA片段的形式貯存著某一生物的全部基因組DNA信息。cDNA文庫(kù)：包含某一組織細(xì)胞在一定條件下所表達(dá)的全部mRNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄而合成的cDNA序列的克隆群體，它以cDNA片段的形式貯存著該組織細(xì)胞的基因表達(dá)信息。指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接將大量DNA蛋白質(zhì)芯片：將高密度集排列的蛋白質(zhì)分子作為探針點(diǎn)陣固定在固相支持物上，當(dāng)與待測(cè)樣品反應(yīng)時(shí)，可捕獲樣品中靶蛋白，再經(jīng)檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)靶蛋白進(jìn)行定性和定量分析的一種技術(shù)。寫出下列代號(hào)的中文名稱：PCR-RFLP:PCR結(jié)合限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析（將正常和致病基因的PCR制內(nèi)切酶消化，可得長(zhǎng)度不等的限制性片段，據(jù)此判斷致病基因有無(wú)的分析方法）PCR-ASO:PCR產(chǎn)物與等位基因特異寡核苷酸探針的雜交分析PCR-SSCP:PCR產(chǎn)物的單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析DGGE:變性梯度凝膠電泳DMD:杜氏營(yíng)養(yǎng)不良癥SRY基因：Y染色體性別決定基因CT-PCR：模板競(jìng)爭(zhēng)PCRRAPD：隨即擴(kuò)增的多態(tài)性DNADDRT-PCR：RNA差別顯示逆轉(zhuǎn)錄PCR入動(dòng)物子宮，使之發(fā)育成個(gè)體。核酸轉(zhuǎn)移技術(shù):核轉(zhuǎn)移技術(shù)是將動(dòng)物的一個(gè)體細(xì)胞核導(dǎo)入另一個(gè)體得去除了胞核的卵細(xì)胞內(nèi)，將該卵細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物子宮，使之發(fā)育成個(gè)體。:在同源重組的基礎(chǔ)上。功能克隆和定位克隆克隆是指從一種致病基因的染色體定位出發(fā)逐步縮小范圍，最后克隆該基因?；蛟\斷：通過(guò)直接檢測(cè)基因的結(jié)構(gòu)及其表達(dá)水平是否正常，從而對(duì)疾病做出診斷的方法，通常用于遺傳病、病原體、腫瘤等基本，物補(bǔ)償缺陷基因的功能或使原有的功能得以加強(qiáng)。DNA使抗原基因在一定時(shí)間內(nèi)持續(xù)表達(dá)，不斷刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)，達(dá)到防病或治病目的。寫出下列代號(hào)的中文名稱：RFLP：限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性 VNTR：可變串聯(lián)重復(fù)多態(tài)性 SSCP：?jiǎn)捂湗?gòu)象多性PCR-ASO：聚合酶鏈?zhǔn)椒吹任换蛱禺愋怨押塑账釂?wèn)答題試述乳糖操縱子的調(diào)控機(jī)。乳糖操縱子的機(jī)構(gòu)中含有、YA三個(gè)結(jié)構(gòu)基因，分別編碼利用乳糖乳糖的半乳糖苷酶、通透酶、乙?；D(zhuǎn)移酶。此外還有一個(gè)操作序列O、一個(gè)啟動(dòng)序列P及上游的分解代謝物基因激活蛋白（CAP）結(jié)合位點(diǎn)，構(gòu)成乳糖操縱子的調(diào)控區(qū)。在操縱子的上游還有一個(gè)調(diào)節(jié)基因編碼一種阻遏蛋白，后者可與O縱子處于關(guān)閉狀態(tài)。基因編碼一種阻遏蛋白，與O序列結(jié)合，阻礙RNA聚合酶與P轉(zhuǎn)錄。乳糖操縱子的正調(diào)控：當(dāng)細(xì)菌只能以乳糖為能源時(shí)，乳糖轉(zhuǎn)變?yōu)榘肴樘?，后者與阻遏蛋白結(jié)合，使其構(gòu)象變化而不能結(jié)合OcAMP的含量升高，cAMPCAP結(jié)合，使CAPCAP結(jié)合位點(diǎn)上，促進(jìn)轉(zhuǎn)錄過(guò)程。何謂限制性核酸內(nèi)切酶？Ⅱ型限制酶的作用特點(diǎn)是什么？指一類能識(shí)別和切割雙鏈DNA分子內(nèi)特定的堿基順序的核酸水解酶，絕大多數(shù)是從（1）以內(nèi)切方式切斷雙鏈DNA）能識(shí)別切割4~8bp3）切割可有兩類切口，產(chǎn)生三種末端。何謂載體？分子克隆中良好的載體應(yīng)具備哪些條件？能夠攜帶外源DNA（目的基因）DNA的無(wú)性繁殖或表達(dá)有意義的蛋白質(zhì)所采用的一些DNA能在宿主細(xì)胞內(nèi)獨(dú)立自主復(fù)制并能攜帶重組DNAb、必須有限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)（即多克隆位點(diǎn)）以供外源DNA、具有可供選擇的遺傳標(biāo)記（如抗藥基因、酶基因、營(yíng)養(yǎng)缺陷型以及形成吞噬瘢的能力等、分子量應(yīng)盡量小，以便容納較大的外源DNA片段，具有拷貝數(shù)高，與宿主細(xì)胞核酸易分裂，抗剪切力強(qiáng)等特點(diǎn)。e、表達(dá)型載體還應(yīng)配備與宿主細(xì)胞相適應(yīng)的啟動(dòng)子、前導(dǎo)順序、增強(qiáng)子等調(diào)控元件。簡(jiǎn)述DNA克隆的基本步驟。目的基因的獲取基因載體的選擇與構(gòu)建目的基因與載體的體外拼接重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞篩選并無(wú)性繁殖含有重組分子的受體細(xì)胞（轉(zhuǎn)化子）常用的工具酶有哪些？其主要用途是什么？限制性核酸內(nèi)切酶（必須識(shí)別并特異切割DNA堿基序列，DNApolⅠ：催化缺口平移，制備高比度DNAKlenow片段（掌握：合成cDNA的第二條鏈，補(bǔ)齊或標(biāo)記雙鏈DNA3′端5′-羥基末端磷酸化，或標(biāo)記探針逆轉(zhuǎn)錄酶：催化合成cDNA3′-羥基末端進(jìn)行同質(zhì)多聚物加尾DNA連接酶（必須：催化2條DNA鏈之間形成磷酸二酯鍵堿性磷酸酶：切除常用的基因獲取方法有哪些？制備基因組文庫(kù) 建cDNA文庫(kù) PCR擴(kuò)增目的基因人工合成DNA技術(shù)常用的基因與載體連接方法有哪些？:將靶基因片段和載體DNA相同的黏性末端。然后經(jīng)黏性末端堿基配對(duì)，再經(jīng)DNA連接酶作用，共價(jià)連接成新的重組DNA分子，平頭末端連接：將平末端的DNA分子在連接酶催化下，使DNA5′P人工接頭法：是指利用人工接頭加在平端DNA片段的兩端，然后用相應(yīng)限制酶切割人工接頭以產(chǎn)生黏性末端，再與帶相同黏性末端的載體相連，dG組成的多聚尾，而在目的DNA分子的兩端加上dCDNA聚合酶Ⅰ或KlenowDNA復(fù)成環(huán)狀的雙鏈DNA什么是藍(lán)白斑篩選法？這種方法是根據(jù)組織化學(xué)的原理來(lái)篩選重組體桿菌半乳糖苷酶的基因片度，攜帶有l(wèi)ac基因片段的載體轉(zhuǎn)入lac的宿主菌后，在含有溴-4-氯-3-吲哚半乳糖苷平板上形成淺藍(lán)色的噬菌斑，外源基因插入lacX-gallac溴-4-氯-3-吲哚半乳糖苷（X-gal）平板上形成白色的噬菌斑，非重組的噬菌體則成為藍(lán)色噬菌斑。簡(jiǎn)述細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的基本路線。細(xì)胞外信號(hào)→受體→細(xì)胞內(nèi)多種分子的濃度、活性、位置變化→細(xì)胞應(yīng)答反應(yīng)簡(jiǎn)述細(xì)胞在轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)過(guò)程中所采用的基本方式。①改變細(xì)胞內(nèi)各種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的構(gòu)象②改變信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的細(xì)胞內(nèi)定為③促進(jìn)各種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子復(fù)合物的形成④改變小分子信使的細(xì)胞內(nèi)濃度或分布論述：G蛋白歐聯(lián)受體如何通過(guò)發(fā)揮信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的作用，舉例說(shuō)明。要點(diǎn)：G蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）得名于這類受體的細(xì)胞內(nèi)部分總是與異源三聚體G蛋白結(jié)合，受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的第一步反應(yīng)都是活化G蛋白。GPCR是七跨膜受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的基本模式：配體+受體→G蛋白→效應(yīng)分子→第二信使→靶分子→生物學(xué)效應(yīng)例子：胰高血糖素受體通過(guò)AC-ｃＡＭＰ－ＰＫＡ通路轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)核酸分子雜交的基本原理、操作要點(diǎn)和常見類型?；驹恚菏抢茫模危磷冃院蛷?fù)性這一基本性質(zhì)來(lái)進(jìn)行DNA和RNA定性或定量的分析技術(shù)。雙鏈DNA分開的單鏈重新結(jié)合并形成雙鏈。交→檢測(cè)（放射自顯影和化學(xué)檢測(cè)）、NorthernDNA術(shù)試述PCR系統(tǒng)的原理、過(guò)程及應(yīng)用。1）體細(xì)胞分裂中DNA的半保留復(fù)制機(jī)理2）體外DNA分子的熱變性和退火（3）dNTP存在時(shí)，耐高溫的TaqDNA聚合酶使引物沿單鏈模板延伸為dsDNA故通過(guò)高溫變性、低溫退火、適溫延伸的若干循環(huán)，目的DNA被擴(kuò)增、放大1DNA模板的高溫變性：在9dsDNssDN（）ssDNA火形成模板—引物復(fù)合體72℃催化以dNTP為底物的目的DNA合25—30次循環(huán)，目的基因被擴(kuò)大至可供檢測(cè)或應(yīng)用的量、目的基因克隆b、DNARNAdDNAe、基因突變分析說(shuō)明PCR系統(tǒng)的組成及其在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)。組成PCR系統(tǒng)的成分有、耐熱TaqDNA聚合酶、與擴(kuò)增的目的基因兩側(cè)序列互補(bǔ)的一對(duì)引物cDNA合成所需的四種dNTP d、微量的模板、反應(yīng)緩沖液，其中較為重要。在醫(yī)學(xué)上主要應(yīng)用以下方面、感染性疾病病原體的診斷和研究：如鑒定形態(tài)和生化反應(yīng)不典型的病原體鑒定生長(zhǎng)慢和難培養(yǎng)的病原（結(jié)核麻風(fēng)桿菌HIV、以及丙肝、戊肝病毒等2、進(jìn)行遺傳病的基因診斷和產(chǎn)前診斷：如α—地貧、DMD、鐮刀形紅細(xì)胞性貧血ＰＫＵ甲型血友病等３惡性腫瘤的診斷和研究腫瘤分子標(biāo)記的檢測(cè)癌基因和抗癌基因缺失與突變的研究等４、法醫(yī)學(xué)研究：如個(gè)體識(shí)別、親自鑒定等。分子生物學(xué)復(fù)習(xí)提綱（個(gè)人答案，僅供參考）名詞解釋,且形態(tài)、大小相同，并在減數(shù)分裂前期相互配對(duì)的染色體。含相似的遺傳信息。用限制酶切割來(lái)源不同的DNDNA片段，稱為限制性片段。當(dāng)用特別的探針與這些DNA片段雜交時(shí)，發(fā)現(xiàn)同一物種不同個(gè)體DNA的雜交信號(hào)有所不同，這種技術(shù)就是限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性技術(shù)。（EST從cDNA文庫(kù)隨機(jī)取樣進(jìn)行測(cè)序，在基因組中定位，作為表表達(dá)序列標(biāo)記就是以EST組圖，又稱cDNA圖或表達(dá)序列圖。引物：DNA聚合酶不能從無(wú)到有地合成DNA鏈，只能把脫氧核苷酸連接在已有核酸的3’-羥基上，而且該核酸的序列必須與DNA模板的3’端序列互補(bǔ)，并形成結(jié)合，這已有的核酸就是引物。核酸分子雜交：異源互補(bǔ)的核苷酸序列通過(guò)Walson-Crick堿基配對(duì)形成穩(wěn)定的雜合雙鏈分子的過(guò)程稱為分子雜交。可分為液相雜交和固相雜交兩種。是一種內(nèi)切核酸酶，由細(xì)菌產(chǎn)生，能識(shí)別雙鏈DNA的特定序列（限制位點(diǎn)其中Ⅱ型限制位點(diǎn)和切割位點(diǎn)都確定。探針：是指用以與待測(cè)核酸進(jìn)行雜交的已知序列的標(biāo)記核酸片段。的整個(gè)過(guò)程。細(xì)胞從上一次有絲分裂結(jié)束到下一次有絲分裂開始的時(shí)間叫細(xì)胞分裂間期。Southernblotting：即DNA印跡法，將通過(guò)凝膠電泳分離的待測(cè)核酸轉(zhuǎn)移并結(jié)合到固相支持物上，然后與探針進(jìn)行雜交并分析。Westernblotting：即蛋白質(zhì)印跡法，它和DNARNAA和假肥大型肌營(yíng)養(yǎng)不良癥。病毒癌基因。是原癌基因的突變體，其編碼產(chǎn)物可以使培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化，或在動(dòng)物體內(nèi)誘發(fā)腫瘤。果這類基因發(fā)生突變而失活，可以引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。量或活性狀態(tài)。問(wèn)答題一、簡(jiǎn)述PCR引物設(shè)計(jì)原則長(zhǎng)度15nt15~30nt。引物堿基的組成和分布具有隨機(jī)性列?？梢詰?yīng)用相同的退火溫度，確保PCR的成功。二級(jí)3bp?；パa(bǔ)性——會(huì)造成引物之間退火，發(fā)生引物擴(kuò)增，降低擴(kuò)增效率。3’端最好是G/C5’端可以修飾——即使不互補(bǔ)，也基本不影響PCR的特異性。特異濃度合適質(zhì)量好印跡雜交過(guò)程：樣品制備—電泳分離—印跡—預(yù)雜交—雜交—洗膜—分析二、試述DNA印跡法的原理、操作過(guò)程及其應(yīng)用交并分析。過(guò)程：1、提取DNA、用限制酶切割，獲得DNA片段混合物。2、瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段3、用堿處理電泳凝膠，將DNA片段原位變性解鏈。4、將變性的DNA片段從凝膠轉(zhuǎn)移到固相膜上。5、用封閉物預(yù)雜交，然后漂洗除去未結(jié)合封閉物。6、用探針雜交液浸泡固相膜，與待測(cè)DNA片段進(jìn)行雜交。7、用不同離子強(qiáng)度的溶液依次漂洗固相膜，除去未雜交探針和形成非特異性雜交體的探針。8、通過(guò)顯影或顯色分析固相膜上的雜交體，將雜交體位置和凝膠電泳圖譜進(jìn)行對(duì)比，可計(jì)算待測(cè)DNA片段的分子量。檢出特異的DNA片段，測(cè)定分子量，分析DNADNA突變、基因擴(kuò)增和DNA多態(tài)性等。三、根據(jù)被測(cè)定的對(duì)象，簡(jiǎn)述分子雜交印跡的種類、特點(diǎn)及其應(yīng)用上優(yōu)缺點(diǎn)1、DNA印跡法2、RNA印跡法RNase無(wú)處不在，要絕對(duì)消除外源RNase的污染。先變性后電泳、轉(zhuǎn)移。不能采用堿變性，只能采用甲醛、乙二醛、二甲基亞砜等變性。定性或定量分析組織細(xì)胞內(nèi)的總RNA或某一種特異RNAmRNA的長(zhǎng)度和含量。3、蛋白質(zhì)印跡法也是由電泳分離、轉(zhuǎn)移固定和檢測(cè)分析等組成。只能用電轉(zhuǎn)移法進(jìn)行轉(zhuǎn)移。用抗原抗體反應(yīng)檢測(cè)目的蛋白四、原癌基因是如何被激活的1、點(diǎn)突變——某一個(gè)核苷酸發(fā)生改變——蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)改變——功能異?！┳?。2、基因擴(kuò)增——基因拷貝數(shù)的增加。原癌基因的擴(kuò)增如果在不恰當(dāng)?shù)碾A段發(fā)生，會(huì)造成持續(xù)性高水平表達(dá)，導(dǎo)致其表達(dá)產(chǎn)物癌蛋白的增加，從而引起細(xì)胞的功能紊亂。3、基因重排——染色體易位——使無(wú)活性或低活性的原癌基因轉(zhuǎn)移到某些強(qiáng)啟動(dòng)子或增強(qiáng)子附近而激活，從而使原癌基因表達(dá)產(chǎn)物顯著增加，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。4、插入突變——在原癌基因附近插入某種DNA序列，從而引起基因表達(dá)改變。5、DNA去甲基化——DNA的甲基化程度對(duì)于保持雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性、阻抑基因表五、試述人類基因組計(jì)劃的主要內(nèi)容及意義1、內(nèi)容：2、意義：人類疾病相關(guān)的基因是人類基因組中結(jié)構(gòu)和功能完整性至關(guān)重要的信息性結(jié)腸癌和乳腺癌等一大批單基因遺傳病致病基因的發(fā)現(xiàn)（HGP的重1997六、試述研究蛋白質(zhì)組學(xué)的方法及意義1、方法：以蛋白質(zhì)組為研究對(duì)象，從整體、動(dòng)態(tài)和網(wǎng)絡(luò)水平上對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行研究。2、意義：蛋白質(zhì)組研究是尋找疾病分子標(biāo)記最有效的方法。為探索腫瘤、老年癡呆癥等疾病的發(fā)生機(jī)制提供了新的方法。對(duì)病原微生物進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析，尋找致病因子并研制疫苗。推動(dòng)新藥的開發(fā)。七、試從細(xì)胞周期調(diào)控的角度論述腫瘤的發(fā)生Cyclin單獨(dú)或與其相應(yīng)的CDKCyclinA瘤組織。在人類乳腺癌細(xì)胞株中發(fā)現(xiàn)了CyclinB1啟動(dòng)子活性增高，及其在G1期有非75％的腫瘤細(xì)胞系有P16P16p21突變，但存在多態(tài)性改變，使表達(dá)減弱。八、試述細(xì)胞凋亡調(diào)控的分子機(jī)制1、bcl-2基因：可以抑制細(xì)胞凋亡，特別是抑制生發(fā)中心的BBcl-2可以抑制由許多因素引起的細(xì)胞凋亡，如血清和生長(zhǎng)因子的缺乏、膜脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)和Ca+能抑制p53Myc共同作用，抑制細(xì)胞凋亡，使細(xì)胞持續(xù)增生。2當(dāng)DNA的損傷比較嚴(yán)重，超過(guò)了細(xì)胞的自我修復(fù)能力時(shí)，激活的p53通過(guò)誘導(dǎo)bax基因表達(dá)、抑制bcl-2常的器官功能。3Caspases的活化；二是與TNF受體相關(guān)因子結(jié)合，激活NF-kB，使細(xì)胞表達(dá)生存必需的基因。4、病毒蛋白：E1A蛋白既能激活E1A的表達(dá)受p53的調(diào)控，同時(shí)E1A誘導(dǎo)的P53介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡可被腺病毒E1B蛋白抑制。九、原癌基因、癌基因、抑癌基因與細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡調(diào)控基因的關(guān)系ras基因——一些生長(zhǎng)因子如EGF和胰島素可通過(guò)蛋白酪氨酸激酶受體）RasIL-2、35的受體無(wú)蛋白酪氨酸激酶活性，則通過(guò)激活細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)蛋白酪氨酸激酶）而激活Ras蛋白。激RasRafPI-3K、myc——Myc蛋白的NMyc水平的Myc3bcl-2一些原癌基因產(chǎn)物就是Cyclin一些原癌基因產(chǎn)物誘導(dǎo)Cyclin一些原癌基因產(chǎn)物調(diào)節(jié)CDK活性一些原癌基因產(chǎn)物是Cyclin，CDK底物癌基因：RbG1Rb蛋白阻止細(xì)胞G1/S期和G2/MRb蛋白E2F的作用來(lái)調(diào)控細(xì)胞增殖和分化。、p53p53蛋白在維持細(xì)胞正常生長(zhǎng)、抑制惡性增殖過(guò)程中起重要作用。促進(jìn)DNA修復(fù)。3、p16蛋白既是細(xì)胞周期的有效調(diào)控者，又是抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的關(guān)鍵因子。抑CDK4Rb蛋白保持低磷酸化，抑制細(xì)胞從G1S期的過(guò)渡，從而抑制細(xì)胞增殖。、nm23作為CDKI：p15、p16、p21和p27通過(guò)CDKI抑制細(xì)胞周期：p53，Rb十、基因治療的主要策略、基本過(guò)程及存在的問(wèn)題1、策略：基因修復(fù)——即基因矯正，是指通過(guò)矯正突變堿基來(lái)修復(fù)致病基因。基因置換——以正?；蛉〈虏』??；蛟鲅a(bǔ)——將目的基因?qū)氘惓＜?xì)胞，其表達(dá)產(chǎn)物能補(bǔ)償致病基因的功能。RNA干擾技術(shù)、自殺基因技術(shù)。免疫基因治療——把產(chǎn)生抗病毒或抗腫瘤免疫應(yīng)答的基因?qū)塍w內(nèi)狀態(tài)，達(dá)到預(yù)防和治療疾病的目的。耐藥基因治療基因激活——重新開放已經(jīng)關(guān)閉的基因。2、基本過(guò)程：目的基因的選擇和制備靶細(xì)胞的選擇病毒載體法兩種。轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選和導(dǎo)入基因的鑒定3、存在問(wèn)題：需要更多的切實(shí)有效的目的基因需要提高基因?qū)胄市枰岣呋驅(qū)氲奶禺愋孕枰岣吣康幕虮磉_(dá)的可控性PPT細(xì)胞凋亡的特征:1、胞質(zhì)濃縮、染色質(zhì)凝集、染色體降解呈DNAladder、細(xì)胞膜出芽形成凋亡小體。2、體內(nèi)被正常細(xì)胞或吞噬細(xì)胞清除，而不引發(fā)炎癥。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死在形態(tài)學(xué)上的差別細(xì)胞凋亡：一般都要經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)-調(diào)控與執(zhí)行-效應(yīng)3個(gè)階段1、單細(xì)胞丟失2、細(xì)胞膜發(fā)泡但仍完整3、細(xì)胞膜內(nèi)陷將細(xì)胞分割成多個(gè)有膜包裹、內(nèi)涵物不外溢的凋亡小體4、不發(fā)生炎癥反應(yīng)5、被臨近正常細(xì)胞或吞噬細(xì)胞吞噬6、溶酶體完整7、染色質(zhì)均一凝集細(xì)胞壞死：1、細(xì)胞成群丟失2、細(xì)胞膜不完整3、細(xì)胞腫脹、溶解4、發(fā)生嚴(yán)重炎癥反應(yīng)5、被巨噬細(xì)胞吞噬6、溶酶體裂解7、染色質(zhì)凝集成塊、不均一細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死在生物化學(xué)上的區(qū)別細(xì)胞凋亡：1、生理因素或非生理因素誘導(dǎo)2、受大分子合成和激活過(guò)程的嚴(yán)格調(diào)控3、需要能量4、需要大分子合成5、有新基因從頭