糞便內(nèi)蟲卵檢查法

實驗一蠕蟲學(xué)糞便檢查法（一）一、 內(nèi)容直接涂片法；飽和鹽水漂浮法；各種蠕蟲卵的特征。二、 參考資料蠕蟲學(xué)糞便檢查是蠕蟲病生前診斷的重要方法。因為大多數(shù)的寄生性蠕蟲是寄生在家畜、家禽的消化道及其相連的器官（如肝臟、胰臟），有的寄生在呼吸器官和生殖器官（家禽），如后圓線蟲、前殖吸蟲。寄生在這些部位的寄生蟲，它們的蟲卵、幼蟲或節(jié)片都隨著宿主的糞便排除體外，因此，通過糞便檢查可以獲得生前診斷。除蠕蟲以外，還有一些原生動物的寄生蟲，如結(jié)腸小袋纖毛蟲及球蟲，它們的包囊或卵囊亦隨著宿主的糞便排除體外，依靠糞便檢查也可以建立生前診斷。根據(jù)蠕蟲學(xué)糞便檢查的目的可分為：（一） 蠕蟲蟲體檢查法：是從糞便中檢查蟲體或節(jié)片，如莫尼茨絳蟲，一般以肉眼直接檢查；（二） 蠕蟲蟲卵檢查法：是從糞便中檢查蟲卵，如大多數(shù)的吸蟲、絳蟲和線蟲；（三） 蠕蟲幼蟲檢查法：是從糞便中檢查幼蟲，如牛、羊的網(wǎng)尾線蟲等，隨糞便排出的不是蟲卵而是幼蟲。下面主要分述蟲卵和幼蟲檢查法。蠕蟲蟲卵檢查法（之一）：（1） 直接涂片法：取一片潔凈的載玻片，在玻片中央滴加1-2滴50%甘油生理鹽水，然后用鑷子或牙簽挑取少量糞便，與甘油生理鹽水混勻，并將粗糞渣推向一邊，涂布均勻，作成涂片，涂片的厚薄以放到書上隱約可見下面的字跡為宜，加上蓋玻片，置顯微鏡下檢查，檢查時先在低倍鏡下順序查找，如發(fā)現(xiàn)蟲卵，再換高倍鏡仔細(xì)觀察。如無甘油生理鹽水時可以用常水代替，加甘油可使標(biāo)本清晰，易于觀察，并可防止涂膜很快變干燥。但是檢查原蟲的滋養(yǎng)體，必須以生理鹽水進(jìn)行稀釋，不應(yīng)加甘油，否則會影響其運動而妨礙觀察。本法操作簡單，能檢查各種蠕蟲卵，但檢出率不高，特別是輕度感染時，往往得不到可靠結(jié)果，因此，本法只能為輔助的診斷方法，并且每次檢查要重復(fù)觀察8-10片，才能收到確實的效果。（2）飽和鹽水漂浮法：本法基本原理是采用比重比蟲卵大的溶液，使蟲卵浮集于液體的表面，形成一層蟲卵液膜，然后蘸取此液膜，進(jìn)行鏡檢。方法：先配制飽和鹽水溶液，配制時先將水煮開，然后加入食鹽攪拌，使之溶解，邊攪拌邊加食鹽，直加至食鹽不再溶解而生成沉淀為止（1000毫升沸水中約加食鹽380克），再以雙層紗布或棉花過濾至另一干凈的容器內(nèi)，待涼后即可使用。（溶液涼后如出現(xiàn)食鹽結(jié)晶，則說明該溶液是飽和的，合乎要求，其比重為1.18,此溶液應(yīng)保存于溫度不低于13°C的情況下，才能保持較高的比重）。取糞便5-10克，置于100-200毫升的燒杯中，先加入少量飽和鹽水，把糞便調(diào)勻，然后加入約為糞便的12倍量的飽和鹽水，并攪拌均勻，用紗布或40目的銅絲篩過濾于另一干凈的燒杯內(nèi)，濾液靜置30-40分鐘，此時比飽和鹽水比重輕的蟲卵，大多浮于液體表面，再用鉑耳或直徑0.5-1厘米的鐵絲圈蘸取此液膜，并抖落在載玻片上，進(jìn)行鏡檢，或者將此濾液直接倒入試管內(nèi)，補加飽和鹽水使試管充滿，加上載玻片（蓋玻片應(yīng)與液面完全接觸，不能留有氣泡），靜置30-40分鐘，取下蓋玻片，貼在載玻片上進(jìn)行鏡檢，可以收到同樣效果。本法檢出率高，在實際工作中廣泛應(yīng)用，可以檢查大多數(shù)的線蟲卵和絳蟲卵，為了提高漂浮效果，可用其他飽和溶液代替飽和鹽水。如在檢查比重較大的后圓線蟲時，可先將豬糞便按沉淀法操作，取得沉渣后，在沉渣中加入飽和硫酸鎂溶液，進(jìn)行漂浮，收集蟲卵。常見蟲卵及漂浮比重如下表：寄生蟲卵比重漂浮液比重種類比重種類1000ml水中加入比重的試劑量（g）豬蛔蟲卵1.145飽和鹽水3801.170—1.190鉤蟲卵1.085—1.090硫酸鋅溶液3301.180毛圓線蟲卵1.115—1.130氯化鈣溶液851.050豬后圓線蟲卵1.20以上同上4401.250肝片吸蟲卵1.20以上硫代硫酸鈉溶液17501.37—1.39姜片吸蟲卵1.20以上飽和硫酸鎂9201.26華支睪吸蟲卵1.20以上飽和硝酸鈉10001.20—1.40雙腔吸蟲卵1.20以上操作、觀察注意點：（1）在操作中，糞便不能互相感染，已經(jīng)使用過的工具，必須進(jìn)行消毒，或另換工具，才能檢查第二個糞樣，糞樣更不能搞錯，特別在大面積普查工作中，一定要做好登好編號，每次檢查都要有詳細(xì)記錄。（2） 糞便要求新鮮，防止暴曬、腐敗而失效。（3） 鏡檢時一定要詳細(xì)觀察，嚴(yán)格區(qū)別蟲卵與非蟲卵。蟲卵：都有一定的卵殼結(jié)構(gòu)，且都有一定的形狀，如圓形、橢圓形、三角形等，多數(shù)都是兩側(cè)對稱，內(nèi)含有卵細(xì)胞或一個已發(fā)育的幼蟲或毛蝴。非蟲卵：在糞便中容易與蟲卵混淆的雜物有各種植物細(xì)胞、花粉顆粒、脂肪球、氣泡、真菌孢子、螨類及其蟲卵、纖毛蟲等等。但這些物質(zhì)，由于種類不同，其形狀、大小、顏色也各不相同。如各種植物細(xì)胞，有的呈螺旋形，有的呈雙層環(huán)狀物的，也有呈鋪石狀的，但都有明顯的細(xì)胞壁，與蟲卵結(jié)構(gòu)顯然不同；各種花粉顆粒，往往都帶有一定的顏色，易誤認(rèn)為蛔蟲卵，但花粉顆粒沒有卵殼的結(jié)構(gòu)，表面呈蜂窩狀或鋸齒狀，仔細(xì)觀察，可以區(qū)分。還有脂肪和氣泡之類，亦很像蟲卵，但脂肪球和氣泡往往大小不一，無色，且折光性很強，周圍壁較厚，而內(nèi)部是空虛的。不具有蟲卵的一般結(jié)構(gòu)?？傊S渣中與蟲卵混淆的雜物較多，但只要掌握蟲卵的結(jié)構(gòu)和特征是可以辨認(rèn)的，有時某物與蟲卵分辨不清，也可用解剖針輕輕推動蓋玻片下的東西滾動，這樣往往可以把蟲卵和其他物體區(qū)別開來。各種蠕蟲的特征：（1） 吸蟲卵：多呈卵圓形或橢圓形，大小不一，卵殼有數(shù)層卵膜組成較堅實；大多數(shù)吸蟲卵其一端有一個卵蓋（日本血吸蟲卵、嗜眼吸蟲卵除外），卵內(nèi)含有許多卵黃細(xì)胞及一個胚細(xì)胞，還含有一個已成形的毛蝴；顏色多為黃色，黃褐色，有的呈灰白色。（2） 絳蟲卵：因種類不同，形狀差異很大，蟲卵多數(shù)無色，少數(shù)為黃色或黃褐色，在高倍鏡下可見到三對小鉤狀物。圓葉目絳蟲卵殼脆弱，無卵蓋，卵殼在蟲卵排出時已破裂脫落，常見的所謂“卵殼”實際上是胚膜，在帶科絳蟲胚膜的兩層間呈輻射紋，蟲卵圓形或不正圓形，內(nèi)含六鉤蝴；裸頭科絳蟲卵呈圓形，方圓形或三角形，內(nèi)有一個含六鉤蝴的梨形器；假葉目絳蟲卵橢圓形，卵殼頗厚，一端常有卵蓋，胚膜被有許多纖毛，內(nèi)含一個鉤球蝴。（3） 線蟲卵：一般呈橢圓形，大小不一，無色透明，有的呈灰白色，或褐色或黃褐色，多數(shù)蟲卵兩側(cè)對稱，卵可多半由最外層的蛋白質(zhì)膜，中間幾丁質(zhì)膜和內(nèi)層的卵黃膜組成，有些線蟲如圓形科和毛圓科的蟲卵無蛋白質(zhì)膜，有的卵殼平滑，有的凹凸不平或呈蜂窩狀，蟲卵內(nèi)含單個或多個卵細(xì)胞或已發(fā)育的幼蟲。（4） 棘頭蟲卵：多呈橢圓形或長橢圓形，卵殼很厚，外膜上常呈點窩狀或蜂窩狀的構(gòu)造，卵內(nèi)中央有一個長橢圓形的胚胎，胚胎的一端有六個小鉤，顏色多呈棕黃色。三、作業(yè)在顯微鏡下怎樣識別蟲卵與非蟲卵？任選繪一蟲卵形態(tài)圖。畜禽寄生蟲疾病病料檢查6.1糞便內(nèi)蟲卵檢查法默認(rèn)分類2009-07-1820:47閱讀5評論0字號：大大中中小小售秘方雞藥李寶Q：1204167829@（詳見第一篇）直接涂片檢查法集卵法糞便內(nèi)蟲卵檢查法分直接涂片檢查法和集卵法。直接涂片檢查法是最簡便和常用的方法，但是，當(dāng)畜禽體內(nèi)寄生蟲數(shù)量不多而糞便中蟲卵少時，有時不能查出蟲卵。本法是在載玻片上滴一些甘油和水的等量混合液，再用牙簽挑取少量糞便加入其中，混勻，夾去較大的或過多的糞渣，最后使玻片上留有一層均勻的糞液，其濃度的要求是將此玻片放于報紙上，能通過糞便液膜模糊地辨認(rèn)其下的字跡為合適。在糞膜上覆以蓋玻片，置低倍顯微鏡下檢查。檢查時，應(yīng)順序地查遍蓋玻片下的所有部分。集卵法沉淀法取糞便5g，加清水100ml以上，攪勻成糞汁，通過260?250|Jm（40?60目）銅篩過濾，濾液收集于三角燒瓶或燒杯中，靜置沉淀20?40min，傾去上層液，保留沉渣。再加水混勻，再沉淀，如此反復(fù)操作直到上層液體透明后，吸取沉渣檢查。此法適用于檢查吸蟲卵。漂浮法取糞便10g，加飽和食鹽水100ml，混合，通過250pm（60目）銅篩，濾入燒杯中，靜置半小時，則蟲卵上?。挥靡恢睆??10mm的鐵圈，與液面平行接觸以沾取表面液膜，抖落于載玻片上檢查。此法適用于線蟲卵的檢查。也可取糞便1g，加飽和食鹽水10ml，混勻，篩濾，濾液注入試管中，補加飽和鹽水溶液使試管充滿，管口覆以蓋玻片，并使液體和蓋玻片接觸，其間不留氣泡，直立半小時后，取下蓋玻片鏡檢有無蟲卵。以上漂浮法和沉淀法，均使液體靜置待其自然下沉或上浮。也可將以上糞液置于離心管中，在離心機內(nèi)離心，借助離心力以加快其沉淀或上浮過程。常用的漂浮液飽和食鹽水：在1000ml水中加食鹽380g，比重約1.18。飽和硫代硫酸鈉溶液：在1000ml水中，加硫代硫酸鈉1750g，比重在1