生物安全柜及應(yīng)用

生物安全柜及應(yīng)用當(dāng)前第1頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)工作臺的分類

超凈工作臺生物安全柜生物安全柜的基本防護(hù)功能保護(hù)操作人員保護(hù)樣品保護(hù)環(huán)境當(dāng)前第2頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的定義

ClassII生物安全柜防止操作處理過程中，含有危險(xiǎn)性或未知性生物微粒氣溶膠散逸的箱形空氣凈化負(fù)壓安全裝置

當(dāng)前第3頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的分類根據(jù)處理樣品的危害不同，分為三個等級:Ⅰ級,Ⅱ級,Ⅲ級BSC-Ⅰ(Ⅰ級生物安全柜)BSC-Ⅱ(Ⅱ

級生物安全柜)BSC-Ⅲ(Ⅲ

級生物安全柜)當(dāng)前第4頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級生物安全柜的分類1.Ⅱ級A1型生物安全柜柜內(nèi)空氣70%循環(huán)，30%排出，窗口流速0.4ｍ/s2.Ⅱ級A2型生物安全柜柜內(nèi)空氣70%循環(huán)，30%排出，窗口流速0.5ｍ/s

3.Ⅱ級B1型生物安全柜柜內(nèi)空氣30%循環(huán)，70%排出,窗口流速0.5ｍ/s

Ⅱ級B2型生物安全柜柜內(nèi)空氣100%排出,窗口流速0.5ｍ/s

當(dāng)前第5頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級生物安全柜1.美國對Ⅱ級生物安全柜有新的分類方法2.歐洲產(chǎn)品無B2型Ⅱ級生物安全柜當(dāng)前第6頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)

Ⅰ級生物安全柜(BSCⅠ)主要功能：用于低度危險(xiǎn)性的微生物和病原體作業(yè)空間并未到達(dá)無菌潔凈的條件保護(hù)操作人員及環(huán)境但不保護(hù)樣品當(dāng)前第7頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)

Ⅰ級生物安全柜(BSCⅠ)主要結(jié)構(gòu):帶有抽氣裝置的操作箱氣體向操作箱內(nèi)流動,保護(hù)操作者排出氣體經(jīng)HEPA過濾氣流速度在0.4ｍ/s以上(排氣量/進(jìn)氣面積)當(dāng)前第8頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅰ級生物安全柜可開啟前窗在負(fù)壓下操作表面風(fēng)速75-100fpm排出的氣體經(jīng)HEPA過濾保護(hù)操作人員和環(huán)境

HEPA適用于樣品不需保護(hù)的實(shí)驗(yàn)工作當(dāng)前第9頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級生物安全柜（BSCⅡ）

主要功能：用于操作低、中度危險(xiǎn)的微生物，病原體操作空間到達(dá)無菌的潔凈條件當(dāng)前第10頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級生物安全柜（BSCⅡ）

主要結(jié)構(gòu)：具有前吸風(fēng)口和排氣口可防止內(nèi)部污染氣體流出避免外部氣體進(jìn)入箱內(nèi)污染樣品氣體經(jīng)HEPA過濾排出當(dāng)前第11頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級生物安全柜的分類B1TypeBB2

ClassIITypeAA1A2廢氣經(jīng)煙罩排入實(shí)驗(yàn)室或室外廢氣必須經(jīng)排風(fēng)系統(tǒng)排至室外，并帶報(bào)警裝置當(dāng)前第12頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)安全柜的選擇選用A類還是B類生物安全柜?不是生物因素而是是否使用揮發(fā)性的有害物質(zhì)或放射性物質(zhì)TypeBTypeA當(dāng)前第13頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級生物安全柜滿足生物安全等級1、2、3的要求不涉及放射性物質(zhì)不涉及揮發(fā)性有害化學(xué)品建議不應(yīng)有明火當(dāng)前第14頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)當(dāng)前第15頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級生物安全柜最小流速

75fpmTypeA1有排風(fēng)管路TypeA1無排風(fēng)管路當(dāng)前第16頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)當(dāng)前第17頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級A2型生物安全柜（B3型）前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速≥0.5m/s經(jīng)HEPA的下送氣流與操作口向內(nèi)氣流混合循環(huán)氣流比例：70%經(jīng)HEPA過濾器的空氣，可以排回實(shí)驗(yàn)室或通過排風(fēng)罩排入環(huán)境當(dāng)前第18頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)無排風(fēng)管Ⅱ級A2型生物安全柜最小表面風(fēng)速0.5m/s有排風(fēng)管當(dāng)前第19頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級A2生物安全柜(無排風(fēng)管)滿足生物安全等級1、2、3的要求不涉及放射性物質(zhì)不涉及揮發(fā)性有害化學(xué)品建議不應(yīng)有明火當(dāng)前第20頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級A2型生物安全柜(有排風(fēng)管)滿足生物安全等級1、2、3的要求適用于含痕量放射性物質(zhì)的工作適用于含少量揮發(fā)性有害化學(xué)品的工作建議不應(yīng)有明火當(dāng)前第21頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)BSC-Ⅱ-A2型正壓污染區(qū)被負(fù)壓區(qū)域包圍無外接風(fēng)道有外接風(fēng)道當(dāng)前第22頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)當(dāng)前第23頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級B1型生物安全柜前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速≥0.5m/s經(jīng)HEPA過濾器的下送氣流，大部分是未被污染的循環(huán)吸入氣流循環(huán)氣流比例為30%污染的下送氣流經(jīng)HEPA過濾后，大多數(shù)經(jīng)過專門的排風(fēng)管排入大氣當(dāng)前第24頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級B1型生物安全柜最小表面風(fēng)速100fpm經(jīng)HEPA過濾的下送氣流，大部分未被污染污染的下送氣流經(jīng)HEPA過濾后，大部分經(jīng)排風(fēng)管排入大氣當(dāng)前第25頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級B1型生物安全柜滿足生物安全等級1、2、3的要求工作區(qū)域的后部可使用少量的放射性物質(zhì)工作區(qū)域的后部可使用少量的揮發(fā)性有害化學(xué)品建議不應(yīng)有明火當(dāng)前第26頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)BSC-Ⅱ-B1型正壓污染區(qū)被負(fù)壓區(qū)域包圍當(dāng)前第27頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級B2型生物安全柜（全排型）

前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速≥0.5m/s循環(huán)氣流比例為0，即柜中排出的氣體不再循環(huán)所有污染的風(fēng)道和壓力排風(fēng)系統(tǒng)均保持負(fù)壓當(dāng)前第28頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級B2型生物安全柜（全排型）當(dāng)前第29頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅱ級B2型生物安全柜（全排型）滿足生物安全等級適用于放射性物質(zhì)*適用于揮發(fā)性有害化學(xué)品

建議不應(yīng)有明火當(dāng)前第30頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)BSC-II-B2型正壓污染區(qū)被負(fù)壓區(qū)域包圍當(dāng)前第31頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)BSC-Ⅲ型保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員、實(shí)驗(yàn)對象和環(huán)境密閉結(jié)構(gòu)通過手套操作柜內(nèi)負(fù)壓不小于120Pa排風(fēng)兩道高效過濾器當(dāng)前第32頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)當(dāng)前第33頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)一般無定型產(chǎn)品，需特殊定貨若干Ⅲ級生物安全柜連在一起使用，全部操作流程均在柜內(nèi)完成，以確保安全Ⅲ級生物安全柜

當(dāng)前第34頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)Ⅲ級生物安全柜當(dāng)前第35頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的操作理論顆粒經(jīng)HEPA過濾去除氣流為層流氣流有方向生物安全柜的要求:當(dāng)前第36頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的操作理論HEPA濾膜馬達(dá)/風(fēng)扇強(qiáng)制氣體流動馬達(dá)轉(zhuǎn)速的控制部分氣體的吸入、平衡控制及管路系統(tǒng)生物安全柜的主要部件:當(dāng)前第37頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)操作理論--層流層流氣流向下掃過工作區(qū)域，捕獲氣溶膠，經(jīng)安全柜的內(nèi)層至HEPA濾膜為實(shí)現(xiàn)真正的層流，各點(diǎn)的氣流速率必須在平均流速的+/-20%以內(nèi)當(dāng)前第38頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)操作理論--有方向的氣流空氣從柜前和周圍吸入，使工作區(qū)域的氣溶膠更難逃逸此氣流通常以向內(nèi)吸入的體積或平均流速計(jì)算、表示當(dāng)前第39頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)操作理論-煙氣分束在工作區(qū)域的一個垂直平面內(nèi)煙氣被分束，向前方和后方的氣孔移動為最有效的防止煙氣逃逸，物品應(yīng)放在煙氣分束以后的區(qū)域，操作也應(yīng)在此進(jìn)行當(dāng)前第40頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用1.正確安裝，確保安全柜與外部 排風(fēng)系統(tǒng)壓力平衡，保證安全柜處于正常工作狀態(tài)2.定期維護(hù)和檢測，確保安全性當(dāng)前第41頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用工作前認(rèn)真理解操作步驟和所需設(shè)備盡量減少擾動準(zhǔn)備好消毒劑制定計(jì)劃當(dāng)前第42頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用關(guān)紫外燈，前窗開至適當(dāng)高度，打開安全柜的燈和風(fēng)扇檢查出風(fēng)口是否有障礙物，等待5min用消毒液徹底洗凈手和手臂；穿長袖工作服和手套；帶防護(hù)眼鏡開始清潔用70%的乙醇或適當(dāng)?shù)南緞┎潦霉ぷ鲄^(qū)域內(nèi)壁當(dāng)前第43頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用只放入所需物品不能超載出風(fēng)口不要有障礙物大物體間要保持一定距離前窗降至適當(dāng)高度2-3min以吹掃污染物上樣當(dāng)前第44頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用工作結(jié)束，繼續(xù)開機(jī)10-15min

最后的吹掃下樣與污染物接觸的物品，取出之前必須經(jīng)表面去污處理所有托盤或容器取出前必須加蓋當(dāng)前第45頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用用消毒劑清潔內(nèi)壁，待其干燥定期抬起工作面清潔下面的區(qū)域清潔當(dāng)前第46頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用關(guān)閉燈、風(fēng)機(jī)、關(guān)閉前窗開紫外燈關(guān)機(jī)當(dāng)前第47頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用所有物品離前窗至少2英寸，所有污染性的操作盡量遠(yuǎn)離工作區(qū)域的后部干凈的與污染的物品分開放置；污染物品盡量放置在工作區(qū)域后部操作時物品和手臂不要穿過前窗技巧當(dāng)前第48頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用避免使用明火，用適當(dāng)?shù)臏缇胧┍苊馐褂酶蓴_安全柜內(nèi)層流的實(shí)驗(yàn)手段安全柜處于操作狀態(tài)時，徹底消毒內(nèi)壁技巧當(dāng)前第49頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用干凈物品理想的工作臺擺放污染區(qū)域廢棄物托盤垃圾袋當(dāng)前第50頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)當(dāng)前第51頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)當(dāng)前第52頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)當(dāng)前第53頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)當(dāng)前第54頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)當(dāng)前第55頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)當(dāng)前第56頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜內(nèi)感染性材料溢灑的處理發(fā)生少量溢灑，用吸收紙巾立即處理，并浸滿消毒液的毛巾或紗布對生物安全柜及其內(nèi)部的所有物品擦洗。消毒后更換手套，不論是摘下手套還是更換手套都要洗手。若發(fā)生大量溢灑，液體通過柜前面或后面的格柵流到下面，柜內(nèi)所有物品都應(yīng)進(jìn)行表面消毒，并從柜中取出，關(guān)閉排水閥，將消毒液倒在工作臺面上，使液體通過格柵流到排水盤上。所有接觸溢出物品的材料都要進(jìn)行消毒和/或高壓滅菌處理。當(dāng)前第57頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)調(diào)整椅子高度，讓肩膀放松雙肘自然放于兩側(cè)人體工程學(xué)方面的考慮肘和肩膀當(dāng)前第58頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)常見說法和錯誤認(rèn)識噴燈火焰將嚴(yán)重影響安全柜內(nèi)的層流，可能造成氣溶膠的擴(kuò)散若噴燈的火苗很大，可能融化HEPA濾膜的粘結(jié)劑或燒濾膜若無人看守，噴燈可能熄滅，在A類或A/B3類安全柜內(nèi)，泄露的氣體可能達(dá)到爆炸極限“可以在安全柜中使用噴燈..."替代方法：如電熱套或可拋的加熱環(huán)。當(dāng)前第59頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)排風(fēng)柜用于排出有害有毒的煙和氣溶膠，應(yīng)該用對多種化學(xué)試劑惰性的材料構(gòu)成“可以把生物安全柜當(dāng)排風(fēng)柜使用…”不能常見說法和錯誤認(rèn)識當(dāng)前第60頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)常見說法和錯誤認(rèn)識錯!只有在正確使用的情況下，才能保護(hù)操作人員、樣品和環(huán)境。在生物安全柜中工作，什么時候都需無菌操作

如果在生物安全柜中工作，就不必很小心的操作當(dāng)前第61頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)常見說法和錯誤認(rèn)識錯!使用紫外燈可以減少安全柜不用時工作區(qū)域的污染。紫外線穿透力差，不能殺滅被灰塵或有機(jī)物保護(hù)的微生物

生物安全柜有紫外燈，就不必消毒清潔工作區(qū)域

當(dāng)前第62頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)常見說法和錯誤認(rèn)識不能！工作區(qū)域放置大物體將影響氣流，降低安全柜的效率離心機(jī)、攪拌機(jī)等電器的風(fēng)扇，可能破壞安全柜內(nèi)的氣流離心機(jī)內(nèi)最好使用密封的安全杯，在安全柜內(nèi)裝樣和下樣“離心機(jī)可以放在生物安全柜內(nèi)使用?"當(dāng)前第63頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)常見說法和錯誤認(rèn)識不一定。對于遠(yuǎn)離揮發(fā)性有害化學(xué)品的侵害，對于遠(yuǎn)離生物有害氣溶膠的侵害，則不是根據(jù)實(shí)際工作的要求和研究內(nèi)容，確定使用B類或A類的生物安全柜“B類安全柜和A類相比能提供更好的保護(hù)..”當(dāng)前第64頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)常見說法和錯誤認(rèn)識某些應(yīng)用，如研究生物毒素藥物的工作，為防止有害物質(zhì)逃逸，建議連續(xù)使用連續(xù)使用將降低HEPA濾膜的壽命”所有的生物安全柜應(yīng)連續(xù)工作..”當(dāng)前第65頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)常見說法和錯誤認(rèn)識

假若房間密閉，沒有通風(fēng)系統(tǒng)，沒有什么活動，循環(huán)式的A類安全柜可能會把空氣凈度降至100級。不幸的是，一旦人員進(jìn)入，將再次被污染。這樣做將降低HEPA濾膜的壽命”如果讓安全柜連續(xù)工作，室內(nèi)空氣潔凈度將達(dá)到100級...”當(dāng)前第66頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)常見說法和錯誤認(rèn)識不一定！HEPA濾膜應(yīng)在壓力差過大時更換（濾膜沾滿顆粒）決定濾膜壽命的兩大因素：房間內(nèi)空氣污染的程度安全柜工作的時間按時間表更換濾膜，而不考慮濾膜被污染的程度,可能造成不必要的浪費(fèi)”

應(yīng)每年更換HEPA濾膜？..”當(dāng)前第67頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)常見說法和錯誤認(rèn)識錯!

I級安全柜適用于一級、二級和三級安全實(shí)驗(yàn)室

Ⅱ級和Ⅲ級安全柜則適用于所有級別安全實(shí)驗(yàn)室I級安全柜只適用于一級安全實(shí)驗(yàn)室Ⅱ級安全柜只適用于二級安全實(shí)驗(yàn)室Ⅲ級安全柜只適用于三級安全實(shí)驗(yàn)室當(dāng)前第68頁\共有78頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的選用