醫(yī)學(xué)生畢業(yè)論文答辯演示文稿

醫(yī)學(xué)生畢業(yè)論文答辯演示文稿當(dāng)前第1頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)優(yōu)選醫(yī)學(xué)生畢業(yè)論文答辯當(dāng)前第2頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)主要內(nèi)容一、研究背景二、研究目的三、技術(shù)路線及試驗(yàn)方法四、研究特色與創(chuàng)新之處五、預(yù)期結(jié)果當(dāng)前第3頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)研究背景當(dāng)前第4頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)1.處理已形成的血栓

開通閉塞的血管恢復(fù)冠脈灌注溶栓治療

PCI治療2.防止新的血栓形成

防止血栓擴(kuò)展縮小損傷范圍抗凝治療

抗血小板治療CHD特別是ACS的治療原則抗血小板藥物抵抗當(dāng)前第5頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)治療反應(yīng)性差異血小板旁路途徑活化臨床危險(xiǎn)因素基因多態(tài)性依從性差/劑量不足藥物相互作用藥物的生物利用度外部因素內(nèi)部因素抗血小板藥物抵抗的可能機(jī)制當(dāng)前第6頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)研究內(nèi)容當(dāng)前第7頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)氯吡格雷的作用機(jī)制

氯吡格雷氯吡格雷無活性羧酸衍生物2-氧-氯吡格雷ADP對腺苷酸環(huán)化酶的抑制磷酸蛋白（VASP）的磷酸化纖維蛋白受體（GPⅡb/Ⅲa）活化P2Y12受體血小板聚集酯酶小腸吸收（50%）肝內(nèi)代謝（CYP2C19、CYP1A2、CYP2B6）肝內(nèi)代謝（CYP3A4/5、CYP2B6、CYP2C19、CYP2C9）+--肝細(xì)胞色素P450酶（CYP450）當(dāng)前第8頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)吸收環(huán)節(jié)：ABCB1代謝環(huán)節(jié)：CYP3A4、CYP3A5、CYP2C9、CYP2C19受體環(huán)節(jié)：P2Y12、GPⅡb/Ⅲa影響氯吡格雷療效相關(guān)基因一、遺傳多態(tài)性與氯吡格雷療效差異的相關(guān)性相關(guān)性權(quán)重體系個(gè)體化當(dāng)前第9頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)二、評價(jià)各種血小板功能檢測技術(shù)，建立行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)TEGPMPAF-100PL-11sc-2000VerifyNow當(dāng)前第10頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)血小板功能檢測方法的比較方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)預(yù)測臨床事件AR診斷CR診斷LTAsc-2000已有豐富的數(shù)據(jù)；結(jié)果與臨床預(yù)后相關(guān)；血小板功能檢測的金標(biāo)準(zhǔn)重復(fù)性差；需血量大；需制備血小板富集血漿；耗時(shí)多可可（AA）可（ADP）PFA-100操作簡便；需血量少；全血檢測；無需處理血樣受vWF、PCT、HCT、PLT等因素影響；無調(diào)校方法可可不可VerifyNow操作簡便；需血量少；全血檢測；床旁檢測；與LTA相關(guān)性好價(jià)格昂貴；無調(diào)校方法可可（AA）可（ADP）FCM檢測血小板表面的抗原；可區(qū)分激活狀態(tài)和非激活狀態(tài)的血小板儀器和試劑都比較昂貴；操作復(fù)雜，需受過特別培訓(xùn)的技術(shù)人員；不能作為快速檢測項(xiàng)目可可可PL-11操作簡便；重復(fù)性好；檢測信息真實(shí)、可靠；檢測靈敏；干擾因素少；采用原始樣品反映的血小板功能水平更真實(shí)；可可可當(dāng)前第11頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)

血小板功能檢測在血栓病治療、預(yù)防上具有重要價(jià)值；但現(xiàn)有的血小板功能檢測方法、質(zhì)量及標(biāo)準(zhǔn)不足以滿足臨床需要。---《實(shí)驗(yàn)室檢測診斷對抗血小板治療的效能》專題研討會，2011年7月，美國亞特蘭大，由AACC與美國心臟病學(xué)會聯(lián)合舉辦當(dāng)前第12頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)PL-11血小板功能分析儀檢測原理PL-11血小板分析儀采取“自動連續(xù)檢測法”方法，直接對全血中血小板原始數(shù)量檢測后，繼續(xù)對加入誘聚劑后血小板數(shù)量進(jìn)行連續(xù)計(jì)數(shù)檢測，通過對比加誘聚劑前血液中血小板數(shù)量與加入誘聚劑后血小板數(shù)量的變化及血小板下降的速度，評價(jià)分析PL-11功能運(yùn)用價(jià)值，建立行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。

原始血小板數(shù)-聚集后最低血小板數(shù)

×100=MAR%

原始血小板數(shù)*（原始血小板數(shù)-聚劑后最低血小板數(shù)=聚集的血小板數(shù)量）當(dāng)前第13頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)sc-2000血小板聚集測試儀原理

本儀器采用光電比濁法測試血小板聚集:在特定的連續(xù)攪拌條件下，在富血小板血漿(PRP)中加入誘導(dǎo)劑，血小板發(fā)生聚集，PRP的透光度增高或濁度下降。將光濁度的變化轉(zhuǎn)換為電訊號的變化，從而計(jì)算出血小板的聚集率。攪拌方式采用國際先進(jìn)的磁棒攪拌方式。計(jì)算公式如下:

PPP光電電壓值-實(shí)測光電電壓值聚集率=(1—）×100%PPP光電電壓值-PRP光電電壓值*（PPP即貧血小板血漿）當(dāng)前第14頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)技術(shù)路線及研究方法當(dāng)前第15頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)技術(shù)路線目的基因選擇，引物設(shè)計(jì)行PCI術(shù)的冠心病患者血小板功能檢測評估患者應(yīng)用氯吡格雷后的血小板功能狀態(tài)（低下or正常）提取全血基因組ＤＮＡＰＣＲ-測序*PCR最佳反應(yīng)條件的建立*患者遺傳多態(tài)性分析缺血事件發(fā)生情況：致死或非致死性心肌梗死、急性或亞急性血栓（支架內(nèi)再狹窄）、需要再次住院治療的不穩(wěn)定心絞痛、腦卒中*評估基因多態(tài)性與氯吡格雷療效的相關(guān)性，建立血栓性疾病抗血小板藥物治療的療效的評估體系。*評價(jià)血小板功能檢測技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)，選擇最優(yōu)技術(shù)，并建立行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。診斷標(biāo)準(zhǔn)、納入標(biāo)準(zhǔn)、排除標(biāo)準(zhǔn)同一標(biāo)本先進(jìn)行血小板功能檢測，再進(jìn)行基因分析標(biāo)本采集病例資料采集*一般資料*實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)*冠脈照影結(jié)果*PCI手術(shù)情況患者臨床特征對TEG檢測結(jié)果的相關(guān)性隨訪6個(gè)月隨訪6個(gè)月隨訪6個(gè)月不同臨床類型的CHD患者的臨床特征分析血小板功能與基因多態(tài)性的相關(guān)性當(dāng)前第16頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)血小板功能檢測的同一標(biāo)本提取全血基因組

（反應(yīng)條件的優(yōu)化）基因測序

多態(tài)性與缺血事件的相關(guān)性研究方法DNAPCR當(dāng)前第17頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)研究特色與創(chuàng)新之處當(dāng)前第18頁\共有20頁\編于星期六\22點(diǎn)（1）在國內(nèi)外的研究中，首次同時(shí)針對影響氯吡格雷療效的吸收環(huán)節(jié)、代謝環(huán)節(jié)和受體環(huán)節(jié)的3個(gè)環(huán)節(jié)7個(gè)目的基因進(jìn)行了遺傳多態(tài)性研究，分析各目的基因?qū)β冗粮窭庄熜У挠绊憴?quán)重，并考慮了多基因聯(lián)合多態(tài)性的影響；（2）國內(nèi)外首次探索建立一個(gè)以遺傳多態(tài)性為核心，綜合考慮患者其它臨床信息，通過計(jì)算危險(xiǎn)分?jǐn)?shù)，評估患者氯吡格雷療效的評價(jià)體系；（3）PL-11型血小板分