微生物檢測基本程序

微生物檢測基本程序第一頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二本章的主要內(nèi)容食品微生物檢驗(yàn)的一般步驟檢驗(yàn)前的準(zhǔn)備樣品的采集樣品的送檢樣品的處理方法致病菌檢驗(yàn)參考菌群的選擇樣品的檢驗(yàn)檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告第二頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二一.食品微生物檢驗(yàn)的一般步驟樣品采集樣品處理樣品保存選擇參考菌群檢驗(yàn)前的準(zhǔn)備菌落總數(shù)大腸菌群致病菌分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)增菌純化染色鏡檢生化試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)動物試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告第三頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二二.檢驗(yàn)前的準(zhǔn)備準(zhǔn)備好所需的各種儀器。按技術(shù)要求將各種玻璃儀器進(jìn)行清洗、烘干、包扎、滅菌，冷卻后送無菌室備用。準(zhǔn)備好所用的各種試劑，做好普通營養(yǎng)瓊脂或其他選擇必培養(yǎng)基。做好無菌室或超凈工作臺的滅菌工作，提前1h滅菌30~60min.工作衣、鞋、帽、等滅菌后備用。工作人員進(jìn)入無菌室后，實(shí)驗(yàn)沒有完成之前不得隨便出入無菌室。第四頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二三.樣品的采集第五頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二（一）采樣的目的和意義便于食品衛(wèi)生質(zhì)量監(jiān)督管理鑒別食品中是否存在有毒有害物質(zhì)。為新產(chǎn)品、新資源利用、新食品化工產(chǎn)品、新工藝投產(chǎn)前進(jìn)行衛(wèi)生鑒定。第六頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二（二）樣品的種類大樣，就是一整批；中樣，是從樣品中各部分取得的混合樣品，一般為200g；小樣，也稱檢樣，做分析用的，一般為25g。第七頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二（三）采樣的步驟采樣前調(diào)查→現(xiàn)場觀察→確定采樣方案→采樣→樣品封存→開具采樣證明第八頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二（四）采樣的要求1、嚴(yán)格遵守樣品采集的操作規(guī)程。2、所采樣品必須具有代表性。3、采樣操作要防止污染，防止變質(zhì)、損壞、丟失。4、不得加入防腐劑、固定劑等。5、樣品采集和現(xiàn)場測定必須有二人以上參加。第九頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二（五）食品微生物檢驗(yàn)的采樣方案第十頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二1、食品衛(wèi)生學(xué)微生物檢驗(yàn)的取樣方案檢驗(yàn)?zāi)康模簷z驗(yàn)食品的微生物衛(wèi)生指標(biāo)是否合格。第十一頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二取樣方案有：ICMSF取樣方案；美國FDA的取樣方案；世界糧農(nóng)組織（FAO）取樣方案；我國的食品取樣方案。第十二頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二2、食物中毒微生物檢驗(yàn)的取樣檢驗(yàn)?zāi)康模翰檎沂澄镏杏泻尾≡?。第十三頁，共四十四頁，編輯?023年，星期二3、人畜共患病病原菌檢驗(yàn)的取樣檢驗(yàn)?zāi)康模鸿b定畜禽及其產(chǎn)品是否帶有人獸共患的病原菌。第十四頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二（六）食品微生物檢驗(yàn)采樣方法采樣原則：上能采取完整包裝的樣品就不拆開取樣，必須拆開包裝取樣的應(yīng)按無菌操作進(jìn)行取樣.第十五頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二1、液體樣品采樣方法充分混勻后，無菌操作打開包裝，用100mL無菌注射器抽取,注入無菌盛樣容器.第十六頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二2、半固體樣品采樣方法無菌操作打開包裝，用無菌勺子從幾個部位挖取樣品，放入無菌容器。

第十七頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二3、固體樣品采樣方法大塊整體食品用無菌刀具和鑷子從不同的部位割取，并注意其代表性；小塊大包裝食品應(yīng)從不同部位的小塊上切取樣品，放入無菌容器。若為檢驗(yàn)食品的污染情況，可取表層樣品；若為檢驗(yàn)食品品質(zhì)的情況，應(yīng)從深部取樣。

第十八頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二4、冷凍食品采樣方法大包裝小塊冷凍食品按小塊個體采??；大塊冷凍食品可用無菌刀從不同部位削取或用無菌手鋸從凍塊上鋸取樣品，放入無菌容器。若為檢驗(yàn)食品污染情況，可取表層樣品；若為檢驗(yàn)食品品質(zhì)情況，應(yīng)從深部取樣。第十九頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二5、生產(chǎn)工序監(jiān)測采樣車間用水：從車間各龍頭采樣；車間臺面、用具、及加工售貨員手的衛(wèi)生監(jiān)測：用5cm2孔無菌采樣板和5支無菌棉簽擦拭25cm2面積，擦拭后立即用無菌剪刀將棉簽頭剪入無菌容器中。第二十頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二車間空氣采樣：將5個直徑90mm的普通瓊脂平板分別置于車間的四角和中部，打開平皿蓋5min，然后蓋蓋送檢。平皿第二十一頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二（七）采樣標(biāo)簽的填寫標(biāo)簽內(nèi)容主要：

編號、樣品名稱、生產(chǎn)單位、生產(chǎn)日期、產(chǎn)品批號、產(chǎn)品數(shù)量、存放條件、采樣時(shí)間、采樣人姓名，現(xiàn)場情況。第二十二頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二×××××采樣單樣品編號：━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━產(chǎn)品名稱（商品名）______規(guī)格型號__________注冊商標(biāo)_____________生產(chǎn)廠家_______________通訊地址__________郵政編碼□□□□□□受檢地點(diǎn)_______________通訊地址__________郵政編碼□□□□□□采樣地點(diǎn)_______________采樣日期__________采樣基數(shù)______________生產(chǎn)日期_______________批號__________產(chǎn)品依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)__________有效成分及含量____________________________________________________________檢驗(yàn)?zāi)康豞_______________檢測項(xiàng)目_____________________________

采樣人仔細(xì)閱讀以下句子，然后簽字我認(rèn)真負(fù)責(zé)地填寫了該樣品采樣單，承認(rèn)以上填寫的合法性，被該采親單位所證實(shí)的樣品系按照采樣方法取得的，該樣品具有代表性、真實(shí)性和公正性。代表單位（章）代表單位（章）簽字簽字日期年月日日期年月日

備注

第二十三頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二四.樣品的送檢要求1、要快速運(yùn)送：不要超過3小時(shí)；2、若路途遙遠(yuǎn)，可在1~5℃低溫下運(yùn)送；3、要注意防污染、防散漏、防變質(zhì)；4、要填寫檢驗(yàn)申請單。第二十四頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二五.樣品的處理方法（一）液體樣品（二）固體樣品（三）冷凍樣品第二十五頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二(一)液體樣品的處理瓶裝液體樣品的處理盒裝或軟塑料包裝樣品的處理第二十六頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二1.瓶裝液體樣品的處理用點(diǎn)燃的酒精棉球灼燒瓶口滅菌，接著用石炭酸或來蘇爾消毒后的紗布蓋好，再用滅菌開瓶器將蓋啟開；含有二氧化碳的樣品可倒入500mL磨口瓶內(nèi)，口勿蓋緊，覆蓋一滅菌紗布，輕輕搖蕩，待氣體全部逸出后，取樣25mL檢驗(yàn)。第二十七頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二2.盒裝或軟塑料包裝樣品的處理將其開口處用75%酒精棉擦拭消毒，用滅菌剪子剪開包裝，覆蓋上滅菌紗布或浸有消毒液的紗布在剪開部分，直接吸取樣品25mL，或傾入另一滅菌容器中再取樣25mL檢驗(yàn)。第二十八頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二（二）固體樣品的處理搗碎均質(zhì)法剪碎振搖法研磨法整粒振搖法胃蠕動均質(zhì)法第二十九頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二1.搗碎均質(zhì)法將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g放入帶225mL稀釋液的無菌均質(zhì)杯中，8000~10000r/min均質(zhì)1~2min即可。第三十頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二2.剪碎振搖法將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g檢樣進(jìn)一步剪碎，放入帶225mL稀釋液和直徑5mm左右玻璃珠的稀釋瓶中，蓋緊瓶蓋，用力快速振搖50次，振幅要大于40cm。第三十一頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二3.研磨法將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g檢樣放入無菌乳缽中充分研磨后，再放入帶有225mL無菌稀釋液的稀釋瓶中，蓋緊蓋后充分搖勻。第三十二頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二4.整粒振搖法直接稱取25g整粒樣品置于帶有225mL稀釋液和直徑5mm左右玻璃珠的稀釋瓶中，蓋緊瓶蓋，用力快速振搖50次，振幅要大于40cm。第三十三頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二（三）冷凍樣品冷凍樣品，先將中樣在0~4℃下解凍，時(shí)間不能超過18h，或在45℃下解凍，時(shí)間不能超過15min。再取檢樣25g做稀釋處理。第三十四頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二六.致病菌檢驗(yàn)參考菌群的選擇第三十五頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二第三十六頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二第三十七頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二蛋及蛋制品：沙門氏菌、葡萄球菌、變形桿菌等水產(chǎn)品海產(chǎn)品：鏈球菌、副溶血性弧菌乳制品：沙門氏菌、志賀氏菌、葡萄球菌、鏈球菌、蠟樣芽胞桿菌畜禽肉類：腸道致病菌和致病性球菌米面類：蠟樣芽胞桿菌、變形桿菌、酵母霉菌等罐頭：耐熱性芽胞桿菌、嗜熱脂肪桿菌、大芽胞桿菌、凝值芽胞桿菌第三十八頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二七.樣品的檢驗(yàn)（一）、收樣：1、收到樣品后逐一核對驗(yàn)收，登記編號；如2004年收到的50號樣品，編號可寫成：200400502、立即將樣品放在冰箱或冰盒中，并積極做好準(zhǔn)備工作。第三十九頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二（二）、檢驗(yàn)

1、選擇檢驗(yàn)方法：國內(nèi)：國家標(biāo)準(zhǔn)國外：國際標(biāo)準(zhǔn)：如FAO標(biāo)準(zhǔn)、WHO標(biāo)準(zhǔn)；每個進(jìn)口國的標(biāo)準(zhǔn)：如美國FDA標(biāo)準(zhǔn)、日本厚生省標(biāo)準(zhǔn)、歐共體標(biāo)準(zhǔn)等第四十頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二2、檢驗(yàn)要求（1）按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行檢驗(yàn)操作，邊工作邊做原始記錄。（2）檢測結(jié)束，連同結(jié)果一起交同條線技術(shù)人員復(fù)核。復(fù)核過程中發(fā)現(xiàn)錯誤，復(fù)核人應(yīng)通知檢測人更正，然后重新復(fù)核。（3）檢測人和復(fù)核人在原始記錄上簽名，并編寫“檢測報(bào)告底稿”。（4）所有檢測項(xiàng)目完成后，檢測人員將原始記錄、樣品卡、報(bào)告書底稿交科主任作全面校核。第四十一頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二3、樣品的保留（1）陰性樣品：在發(fā)出報(bào)告可及時(shí)處理；（2）陽性樣品：在發(fā)出報(bào)告以后3天才能處理樣品；（3）進(jìn)口食品的陽性樣品：要保留6個月才能處理。（4）微生物檢驗(yàn)不進(jìn)行復(fù)檢第四十二頁，共四十四頁，編輯于2023年，星期二八、檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告經(jīng)審核后的報(bào)告底稿、樣品卡、原始記錄，上交打印正式報(bào)告二份。將報(bào)告正本交審核人及批準(zhǔn)人簽名，并在報(bào)告書上蓋上“檢驗(yàn)