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第十一章鄭州大學(xué)藥學(xué)院吩噻嗪類抗精神病藥物的分析主講

張楠QQ

527752688教學(xué)內(nèi)容與學(xué)習(xí)要求臨床特性掌握結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和分析測定方法熟悉鑒別試驗(yàn)、有關(guān)物質(zhì)的檢查了解鄭州大學(xué)藥學(xué)院吩噻嗪類(硫氮雜蒽類，Phenothiazines)噻 硫雜蒽類，Thioxanthenes)噸類(丁酰苯類(Butyrophenones)苯甲酰胺類（Benzamides

）二苯氧氮平類（Dibenzoxazepines

）……

……抗精神病藥物無法顯示該圖片。鄭州大學(xué)藥學(xué)院吩噻嗪類(硫氮雜蒽類，Phenothiazines)藥物能夠阻斷多巴胺受體，在保持意識(shí)清醒的情況下控制幻覺及妄想等癥狀，主要用于治療Ⅰ型精神分裂癥，屬于抗精神病藥(Antipsychotics)?？咕癫∷幱址Q抗精神分裂癥藥(Antischizophrinics)或神經(jīng)安定藥(Neuroleptics)。鄭州大學(xué)藥學(xué)院第一節(jié) 基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)一、基本結(jié)構(gòu)吩噻嗪類藥物的基本結(jié)構(gòu)：NRR'1234S5678910母核上2位和10位被不同的基團(tuán)取代，得到一系列吩噻嗪類抗精神病藥物。2位的R‘為電負(fù)性較大的基團(tuán)，如?H、?Cl、?CF3、?SCH3；10位的R為堿性側(cè)鏈，如二甲氨基、哌嗪或哌啶的衍生基團(tuán)。臨床上常用本類藥物的鹽酸鹽。鄭州大學(xué)藥學(xué)院SN

HClCH2CHN(CH3)2CH3鹽酸異丙嗪NSClHClCH2CH2CH2N(CH3)2鹽酸氯丙嗪代表藥物鄭州大學(xué)藥學(xué)院NSClCH2CH2CH2

NN

CH2CH2OHNSCF3CH2CH2CH2

NN

(CH2)2OCO(CH2)8CH3奮乃靜鄭州大學(xué)藥學(xué)院癸氟奮乃靜代表藥物NSCF3CH2CH2CH2

NN

CH2CH2OH2

HClN鹽酸氟奮乃靜SCH2CH2CH2

NN

CH3CF32HCl鄭州大學(xué)藥學(xué)院鹽酸三氟拉嗪代表藥物1.硫氮雜蒽母核含S、N的三環(huán)共軛的大p體系，S、N與苯環(huán)形成p-p共軛——具有紫外吸收光譜特征。硫氮雜蒽環(huán)上硫原子為-2價(jià)，具有還原性，易氧化呈色。硫氮雜蒽環(huán)上硫原子有兩對(duì)孤對(duì)電子，易與金屬離子絡(luò)合呈色。鄭州大學(xué)藥學(xué)院結(jié)構(gòu)特點(diǎn)SN

R'R2.取代基R：脂烴胺基、哌嗪基，具堿性R￠：鹵素C

-

X一定方法破壞

-fi

X鄭州大學(xué)藥學(xué)院二、主要理化性質(zhì)1、弱堿性硫氮雜蒽母核的氮原子堿性極弱；10位取代的脂烴氨基、哌嗪及哌啶的衍生物所含的氮原子堿性較強(qiáng)，可用于鑒別和含量測定。2、易氧化性硫氮雜蒽母核具有還原性，可用于鑒別和含量測定。本類藥物光照時(shí)易氧化變色，應(yīng)避光保存。鄭州大學(xué)藥學(xué)院3、與金屬離子配合呈色硫氮雜蒽母核的二價(jià)硫可與鈀離子配合，生成有色化合物，可用于鑒別和含量測定。氧化產(chǎn)物亞砜和砜無此反應(yīng)。鄭州大學(xué)藥學(xué)院4、紫外光吸收特性鄭州大學(xué)藥學(xué)院本類藥物的紫外特征吸收，主要由母核三環(huán)的π系統(tǒng)所產(chǎn)生，一般具有三個(gè)峰值。即在204～209nm（205nm附近）、250～265nm（254nm附近）和300～325nm（300nm附近）。最強(qiáng)峰多在250～265nm。本類藥物的紫外光吸收特性可用于鑒別和含量測定2位上的取代基（R′）不同，會(huì)引起吸收峰發(fā)生位移。其結(jié)構(gòu)中-2

價(jià)的硫，易氧化，氧化產(chǎn)物砜及亞砜有4個(gè)吸收峰。SNRR'鄭州大學(xué)藥學(xué)院5、紅外光吸收特性吩噻嗪類藥物紅外光吸收圖譜的指紋特征隨取代基不同而不同，可用于鑒別。圖11-1A

鹽酸氯丙嗪的紅外光吸收圖譜鄭州大學(xué)藥學(xué)院峰位(cm-1)歸屬1600~1450nC=C

(苯環(huán))1250nN-C

(芳氨基)1100nN-C

(脂氨基)950~700OOPC-H

(苯環(huán))圖11-1B

鹽酸異丙嗪的紅外光吸收圖譜鄭州大學(xué)藥學(xué)院峰位(cm-1)歸屬1600~1450nC=C

(苯環(huán))1330,

12301130,

1030nN-C

(芳氨基)nN-C

(脂氨基)950~700OOPC-H

(苯環(huán))吩噻嗪類藥物紅外光吸收圖譜的指紋特征隨取代基不同而不同，可用于鑒別。第二節(jié) 鑒別試驗(yàn)鄭州大學(xué)藥學(xué)院吩噻嗪類藥物可依據(jù)其不同性質(zhì)采用化學(xué)法、光譜法、色譜法及其他方法進(jìn)行鑒別。各國藥典一般選用2~4種不同原理的分析方法組成一組鑒別試驗(yàn)，對(duì)所收載的吩噻嗪類藥物進(jìn)行鑒別。鹽酸異丙嗪片（

ChP2010）氧化顯色反應(yīng)氯化物的鑒別反應(yīng)薄層色譜法(TLC)或高效液相色譜法(HPLC)鹽酸氯丙嗪（

USP34-NF29）提取后紅外分光光度法(IR)紅外分光光度法(IR)鄭州大學(xué)藥學(xué)院薄層色譜法(TLC)氯化物的鑒別反應(yīng)熔點(diǎn)測定m.p鹽酸硫利達(dá)嗪（

JP15）奮乃靜（

EP7）紅外分光光度法(IR)氧化顯色反應(yīng)鄭州大學(xué)藥學(xué)院紅外分光光度法(IR)氯化物的鑒別反應(yīng)一、化學(xué)法（一）與生物堿沉淀劑反應(yīng)吩噻嗪類藥物10位的含氮取代基有堿性，可與生物堿沉淀劑反應(yīng)。測定生成物的熔點(diǎn)，可鑒別本類藥物及其制劑。SNRR'鄭州大學(xué)藥學(xué)院取本品約0.1g，加水20ml溶解后，加稀鹽酸3滴與三硝基苯酚試液10ml，靜置5小時(shí)，生成沉淀，濾過；沉淀用水洗滌后，以少量丙酮重結(jié)晶，于105℃干燥1小時(shí)，熔點(diǎn)為

175~179℃?！臼纠?1-1

】鹽酸氯丙嗪鑒別（JP15

）SN

ClCH2CH2CH2N(CH3)2HCl鄭州大學(xué)藥學(xué)院【示例11-2

】

鹽酸氯丙嗪片鑒別

（JP15

）取本品，除去包衣，研細(xì)，稱取細(xì)粉適量(約相當(dāng)于鹽酸氯丙嗪0.2g)，加0.1mol/L鹽酸溶液40ml，振搖使鹽酸氯丙嗪溶解，濾過；取濾液20ml，滴加三硝基苯酚試液10ml，照鹽酸氯丙嗪項(xiàng)下的鑒別項(xiàng)試驗(yàn)，顯相同的反應(yīng)。示例通過提取與過濾，排除片劑輔料對(duì)分析的干擾。鄭州大學(xué)藥學(xué)院（二）氧化顯色反應(yīng)硫氮雜蒽母核的氧化顯色反應(yīng)被國內(nèi)外藥典用于吩噻嗪類藥物及其制劑的鑒別。反應(yīng)所顯顏色隨藥物的取代基及氧化劑不同而不同常用的氧化劑：硫酸、硝酸、過氧化氫和三氯化鐵試液。SNR氧化劑R'呈色鄭州大學(xué)藥學(xué)院鄭州大學(xué)藥學(xué)院（三）與鈀離子配合呈色反應(yīng)硫氮雜蒽母核與鈀離子配合呈色的反應(yīng)被ChP2010用于吩噻嗪類藥物及其制劑的鑒別。該反應(yīng)不受氧化產(chǎn)物亞砜和砜的干擾，專屬性強(qiáng)。SRNR'PdCl2SNRR'SRNR'Pd2Cl

-鄭州大學(xué)藥學(xué)院【示例11-7

】

癸氟奮乃靜及制劑

ChP（2010）取本品約50mg，加甲醇2ml溶解后，加0.1%氯化鈀溶液3ml，即有沉淀生成，并顯紅色，再加過量的氯化鈀溶液，顏色變深。N

(

C

H

2)

2OC

O

(C

H

2)

8CH

3SNCH

2CH

2CH

2

NCF

3鄭州大學(xué)藥學(xué)院（四）含鹵素取代基的反應(yīng)1、焰色反應(yīng)【示例11-8

】

奮乃靜

（

JP15）鹵化物的焰色反應(yīng)——取1.5cm×5cm的銅網(wǎng)(網(wǎng)孔0.25mm，絲徑0.174mm)，將一段銅線的一端纏繞于銅網(wǎng)上。在無色火焰中劇烈加熱銅網(wǎng)，直至火焰不再顯示綠色或藍(lán)色，冷

卻。重復(fù)此操作數(shù)次，使銅網(wǎng)表面完全被氧化銅覆蓋。除

另有規(guī)定外，置約1mg供試品于銅網(wǎng)上，點(diǎn)火燃燒。重復(fù)

此操作3次后，在無色火焰中檢視銅網(wǎng)。本品火焰顯綠色鄭州大學(xué)藥學(xué)院2、顯色反應(yīng)吩噻嗪類藥物2位的含氟取代基，可經(jīng)有機(jī)破壞使共價(jià)結(jié)合的氟元素分解成氟化物，在酸性條件下與茜素鋯試液反應(yīng)顯色，用于本類藥物及其制劑的鑒別。Cl綠色FF-紅色→黃色焰色反應(yīng)有機(jī)破壞茜素鋯試液鄭州大學(xué)藥學(xué)院【示例11-9

】

癸氟奮乃靜

ChP（2010）取本品15～20mg，加碳酸鈉與碳酸鉀各約0.1g，混勻，在600℃熾灼15～20分鐘，放冷，加水

2ml使溶解，加鹽酸溶液（1→2）酸化，濾過，濾液加茜素鋯試液0.5ml，應(yīng)顯黃色。鄭州大學(xué)藥學(xué)院溶液由紅色變?yōu)辄S色癸氟奮乃靜6酸性茜素鋯fi

[ZrF]2-+茜素Na2CO3

+K

2CO3，600℃fi

F-鄭州大學(xué)藥學(xué)院【示例11-10

】鄭州大學(xué)藥學(xué)院鹽酸氟奮乃靜注射液（

ChP2010）取本品適量(約相當(dāng)于鹽酸氟奮乃靜20mg)，加碳酸鈉及碳酸鉀各約100mg，混合均勻，先用小火小心加熱，并蒸干，然后在600℃灰化，加水2ml使溶解，加鹽酸溶液(1→2)酸化，濾過，濾液加茜素鋯試液0.5ml，溶液由紅變黃。通過小火加熱蒸干，排除注射液中溶劑對(duì)分析的干擾。（五）氯化物的鑒別反應(yīng)國內(nèi)外藥典均要求對(duì)吩噻嗪類藥物的鹽酸鹽及其制劑進(jìn)行氯化物的鑒別。與硝酸銀的沉淀反應(yīng)鑒別反應(yīng)與二氧化錳等氧化劑的氧化還原反應(yīng)鄭州大學(xué)藥學(xué)院注意事項(xiàng)采用與硝酸銀的沉淀反應(yīng)進(jìn)行鑒別時(shí)，由于硫氮雜蒽母核具有還原性，稀硝酸的加入將使吩噻嗪類藥物發(fā)生氧化顯色反應(yīng)?？稍诠┰嚻啡芤褐屑影痹囈菏钩蓧A性，吩噻嗪類藥物析出，濾除沉淀，取濾液進(jìn)行試驗(yàn)。鄭州大學(xué)藥學(xué)院【示例11-11

】

鹽酸氯丙嗪鑒別（

JP15）鄭州大學(xué)藥學(xué)院取本品0.5g，加水5ml溶解后，加氨試液2ml，水浴加熱5分鐘，冷卻，濾過；濾液用稀硝酸酸化，溶液顯氯化物的鑒別反應(yīng)。說明：ChP2010和USP32-NF27采用氯化物的鑒別反應(yīng)鑒別吩噻嗪類藥物鹽酸鹽的片劑，且均采用過濾法排除輔料的干擾?！臼纠?1-12】鹽酸氯丙嗪(糖衣)片鑒別（ChP2010）取本品，除去包衣，研細(xì)，稱取細(xì)粉適量(約相當(dāng)于鹽酸氯丙嗪50mg)，加水5ml，振搖使鹽酸氯丙嗪溶解，濾過；濾液照鹽酸氯丙嗪項(xiàng)下的鑒別項(xiàng)試驗(yàn)，顯相同的反應(yīng)。【示例11-13

】

鹽酸三氟拉嗪鑒別

（

EP7）取本品50mg，加水5ml溶解后，加硝酸2ml，溶液顯深紅色，后變淡黃色；溶液顯氯化物的鑒別反應(yīng)。鄭州大學(xué)藥學(xué)院二氧化錳等氧化劑的氧化還原反應(yīng)進(jìn)行鑒別：如果硫氮雜蒽母核和氯離子均被氧化，由于正反應(yīng)為具有揮發(fā)性的氧化產(chǎn)物氯氣所致（用水濕潤的碘化鉀淀粉試紙顯藍(lán)色），吩噻嗪類藥物的存在不干擾氯化物的鑒別反應(yīng)。鄭州大學(xué)藥學(xué)院二、光譜法鄭州大學(xué)藥學(xué)院（一）紅外分光光度法ChP2010收載的吩噻嗪類原料藥均采用紅外分光光度法(IR)鑒別。本類藥物的制劑可采用提取后紅外分光光度法(IR)鑒別。（二）紫外分光光度法λmax:

205,

254,300nmλmin:

220nm,

280nm最強(qiáng)峰多在250～265nm鄭州大學(xué)藥學(xué)院【示例11-16

】鹽酸氯丙嗪鑒別（ChP2010）取本品，加鹽酸溶液(9→1000)制成每1ml中含5mg的溶液，在254nm與306nm的波長處有最大吸收，在254nm的波長處吸光度約為0.46。ChP2010和EP7在用紫外分光光度法鑒別鹽酸氯丙嗪時(shí)，由于205nm為紫外末端波長，其最大吸收未作為鑒別的依據(jù)；又因?yàn)?06nm波長處的吸光度及吸收系數(shù)較低，也未作為鑒別的依據(jù)。鄭州大學(xué)藥學(xué)院鄭州大學(xué)藥學(xué)院【示例11-18

】奮乃靜(糖衣或薄膜衣)片鑒別（ChP2010）（避光操作）取含量測定項(xiàng)下的供試品溶液[避光操作。取本品20片，除去包衣后，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于奮

乃靜10mg)，置100ml量瓶中，加溶劑(取乙醇500ml，加鹽酸

10ml，加水至1000ml，搖勻)約70ml，充分振搖使奮乃靜溶

解，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置100ml量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶

液，在255nm的波長處有最大吸收。取續(xù)濾液作為供試品溶液，排除了片劑中不溶性輔料對(duì)光譜測量的影響。三、色譜法（一）薄層色譜法USP34-NF29和EP7采用薄層色譜法（TLC）鑒別吩噻嗪類藥物及其制劑，以藥物對(duì)照品制備對(duì)照品溶液。鄭州大學(xué)藥學(xué)院【示例11-20】奮乃靜注射液鑒別（

USP34-NF29）取本品1ml，加甲醇稀釋至5ml，作為供試品溶液；另取

奮乃靜對(duì)照品，加甲醇溶解并稀釋制成每1ml中含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅

膠薄層板上(色譜硅膠層厚0.25mm)，以丙酮-氨水(200∶1)為展開劑，展開至溶劑前沿前移約15cm，晾干，噴以碘鉑酸鉀試液(取氯鉑酸100mg，加1mol/L鹽酸溶液1ml溶解后，加4%

碘化鉀溶液25ml，加水使成100ml，再加甲酸0.50ml，搖勻，即得)，供試品溶液主斑點(diǎn)與對(duì)照品溶液主斑點(diǎn)的Rf值應(yīng)一致。鄭州大學(xué)藥學(xué)院供試品：取本品1ml，加甲醇稀釋至5ml鄭州大學(xué)藥學(xué)院對(duì)照品：奮乃靜對(duì)照品加甲醇溶解制成1mg/ml溶液層析板：硅膠薄層板(色譜硅膠層厚0.25mm)展開劑：丙酮-氨水(200∶1)顯色劑：碘鉑酸鉀參數(shù)：Rf值（二）高效液相色譜法鄭州大學(xué)藥學(xué)院ChP2010采用高效液相色譜法(HPLC)鑒別鹽酸氟奮乃靜及其制劑，以藥物對(duì)照品制備對(duì)照品溶液。四、其他方法吩噻嗪類藥物還可以通過熔點(diǎn)測定進(jìn)行鑒別?！臼纠?1-22】EP7奮乃靜鑒別法：照毛細(xì)管法測定，本品的熔點(diǎn)為96~100℃。吩噻嗪類藥物的有關(guān)物質(zhì)第三節(jié) 有關(guān)物質(zhì)檢查殘留的原料及中間產(chǎn)物副產(chǎn)物藥物的氧化產(chǎn)物高效液相色譜法（HPLC）檢查方法薄層色譜法（TLC）NRR'1234S5678910鄭州大學(xué)藥學(xué)院一、鹽酸氯丙嗪及其制劑的有關(guān)物質(zhì)檢查NH2COOHN2ClCOOHClCOOHCu2Cl2ClH2NCOOHNHClNHClSH

NClSNCH2CH2CH2N(CH3)2[重氮化]NaNO2,

HClCu[脫羧]Fe[縮合][環(huán)合]S,

I2S[分離異構(gòu)體]C6H5Cl,

C[縮合]ClCH2CH2CH2N(CH3)2,

NaOHSNCH2CH2CH2N(CH3)2HCl3-氯二苯胺（Ⅰ）S2-氯-10H-吩噻嗪（Ⅱ）ClCl

[成鹽]

HCl,

C2H5OHClClH

NH

N（一）合成路線與有關(guān)物質(zhì)1、合成路線鄭州大學(xué)藥學(xué)院2、有關(guān)物質(zhì)及其編號(hào)代碼殘留的中間產(chǎn)物：S3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N-甲基-1-丙胺（Ⅲ）NCH2CH2CH2NHCH3ClNHCl3-氯二苯胺（I)SHNCl2-氯-10H-吩噻嗪（II）SN-[3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)丙基]-N,N′,N′-三甲基-1,3-丙二胺（Ⅳ）CH2CH2CH2N(CH3)2CH2CH2CH2NCH3N

Cl鄭州大學(xué)藥學(xué)院貯藏不當(dāng)或存放時(shí)間過長產(chǎn)生的有關(guān)物質(zhì)：CH2CH2CH2N(CH3)2N

ClSO3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N,N-二甲基-1-丙胺S-氧化物（Ⅴ）OCH2CH2CH2N(CH3)2N

ClS3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N,N-二甲基-1-丙胺N-氧化物（Ⅵ）鄭州大學(xué)藥學(xué)院（二）有關(guān)物質(zhì)檢查方法1、鹽酸氯丙嗪的有關(guān)物質(zhì)檢查【示例11-23】ChP2010色譜條件檢查方法：

HPLC高低濃度法色譜柱：C8(0.25m·4.0mm，5μm)鄭州大學(xué)藥學(xué)院流動(dòng)相：乙腈-0.5%三氟乙酸(pH5.3)(50∶50)檢測波長：254nm判斷標(biāo)準(zhǔn)：鄭州大學(xué)藥學(xué)院供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積(0.5%)，各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的2倍(1.0%)。【示例11-24】

EP7檢查法

檢查方法：

HPLC雜質(zhì)對(duì)照品法雜質(zhì)編號(hào)代碼分別為，A(Ⅴ)、B(Ⅳ)、C(3-(10H-吩噻嗪-10-基)-N,N-二甲基-1-丙胺(丙嗪))、D(Ⅲ)和E(Ⅱ)雜質(zhì)對(duì)照品：A：3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N,N-二甲基-1-丙胺-S-氧化物(氯丙嗪亞砜)(Ⅴ)；B：N-[3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N,N,N-三甲基-1，3-丙二胺(Ⅳ)；C：3-(10H-吩噻嗪-10-基)-N,N-二甲基-1-丙胺(丙嗪)；D：3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N-甲基-1-丙胺(Ⅲ)；E：2-氯-10H-吩噻嗪(Ⅱ)。鄭州大學(xué)藥學(xué)院色譜柱：C8(0.25m·4.0mm，5μm)流動(dòng)相：硫二甘醇-乙腈-0.5%三氟乙酸（pH

5.3)(0.2∶50∶50)色譜條件檢測波長：254nm流速：1.0ml/min系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以氯丙嗪(保留時(shí)間約為8分鐘)為參比，雜質(zhì)A、B、C、D和E的相對(duì)保留時(shí)間分別約為0.4、0.5、0.7、0.9和3.4。用對(duì)照D溶液進(jìn)行試驗(yàn)，雜質(zhì)D峰與氯丙嗪峰的分離度不得小于2.0。鄭州大學(xué)藥學(xué)院限

度：鄭州大學(xué)藥學(xué)院供試品溶液中，雜質(zhì)A的峰面積不得大于對(duì)照溶液(c)的峰面積(0.1%)；雜質(zhì)B、C、D各峰面積均不得大于對(duì)照溶液(b)主峰面積的0.6倍(0.3%)；雜質(zhì)E的峰面積不得大于對(duì)照溶液(d)的相應(yīng)峰面積(0.1%)

；其他各雜質(zhì)峰面積均不得大于對(duì)照溶液(b)主峰面積的0.2倍(0.1%)；各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液(b)主峰面積的2倍(1.0%)；任何小于對(duì)照溶液(b)主峰面積0.1倍的雜質(zhì)峰面積可忽略不計(jì)(0.05%)。EP7檢查法特點(diǎn)：①規(guī)定了各雜質(zhì)峰與主峰的相對(duì)保留時(shí)間。②采用主成分自身對(duì)照法控制雜質(zhì)B(0.3%)、雜質(zhì)C(0.3%)、雜質(zhì)D(0.3%)、其他雜質(zhì)(0.1%)、雜質(zhì)總量(1.0%)和可忽略雜質(zhì)(0.05%)，采用雜質(zhì)對(duì)照品法控制雜質(zhì)A(0.1%)和雜質(zhì)

E(0.1%)。③制備溶液時(shí)，稱量和量取的精度要求隨溶液及其溶質(zhì)的用途不同而不同。鄭州大學(xué)藥學(xué)院【示例11-25】其他烷基化吩噻嗪類化合物的檢查（USP32-NF27

）檢查方法：

TLC高低濃度法固定相：硅膠薄層板TLC條件展開劑：新鮮配制的、氨水飽和的乙醚-乙酸乙酯(1∶1)判斷標(biāo)準(zhǔn)：供試品溶液除主斑點(diǎn)外的其他斑點(diǎn)，其面積和強(qiáng)度均不得大于對(duì)照品稀釋液的主斑點(diǎn)(0.5%)。鄭州大學(xué)藥學(xué)院2、鹽酸氯丙嗪(糖衣)片的有關(guān)物質(zhì)檢查鄭州大學(xué)藥學(xué)院【示例11-26】

ChP2010檢查法檢查方法：

HPLC

高低濃度對(duì)比法判斷標(biāo)準(zhǔn)：供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積(0.5%)。說明：①采用過濾法排除片劑輔料的干擾；②取消了對(duì)雜質(zhì)總量的控制，在一定程度上減弱了控制。3、鹽酸氯丙嗪注射液的有關(guān)物質(zhì)檢查鄭州大學(xué)藥學(xué)院【示例11-27】

ChP2010檢查法檢查方法：HPLC高低濃度對(duì)比法判斷標(biāo)準(zhǔn)：①供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，大于對(duì)照溶液主峰面積(0.5%)且小于對(duì)照溶液主峰面積10倍(5%)的雜質(zhì)峰不得多于一個(gè)。②其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積均不得大于對(duì)照溶液主峰面積(0.5%)。說

明：與鹽酸氯丙嗪片的有關(guān)物質(zhì)檢查相比，允許有一個(gè)雜質(zhì)大于0.5%，但應(yīng)小于5%，減弱了對(duì)單個(gè)雜質(zhì)的控制?！臼纠?1-28】氯丙嗪亞砜的限量檢查（USP34-NF29）檢查方法：TLC法固定相：硅膠薄層板鄭州大學(xué)藥學(xué)院TLC條件展開劑：新鮮配制的、氨水飽和的乙醚-乙酸乙酯(1∶1)判斷標(biāo)準(zhǔn)：?供試品溶液除主斑點(diǎn)外的其他斑點(diǎn)，其面積和強(qiáng)度均不得大于對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)(5.0%)

。二、奮乃靜及其制劑的有關(guān)物質(zhì)檢查（一）合成路線與有關(guān)物質(zhì)COOHCl+NH2Cl[縮合]NaOHNCOONaHClNCOOHHClNHClSHNSNClCH2CH2CH2NNNN(CH2)3Cl[縮合][環(huán)合][脫羧][酸化]ClCH2CH2OHCH2CH2OH（二）有關(guān)物質(zhì)檢查方法【示例11-29】

奮乃靜的有關(guān)物質(zhì)檢查

（ChP2010）檢查方法：

HPLC

高低濃度對(duì)比法色譜條件色譜柱：C18流動(dòng)相：甲醇和0.03mol/L醋酸銨溶液鄭州大學(xué)藥學(xué)院洗脫方式：梯度洗脫檢測波長：254nm系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：奮乃靜峰保留時(shí)間約為27分鐘，與相對(duì)保留時(shí)間約為0.73的降解雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于7.0。判斷標(biāo)準(zhǔn)：鄭州大學(xué)藥學(xué)院①供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的0.5倍(0.5%)②各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的2倍(2.0%)。③供試品溶液色譜圖中任何小于對(duì)照溶液主峰面積0.01倍的色譜峰可忽略不計(jì)說明：①少量30%過氧化氫溶液使部分奮乃靜氧化用于系統(tǒng)分離能力的測試；②因氧化還原反應(yīng)速度較慢，溶液需放置1.5小時(shí)；③奮乃靜與降解產(chǎn)物之間分離度達(dá)到7.0

。【示例11-30】鄭州大學(xué)藥學(xué)院奮乃靜(糖衣或薄膜衣)片的有關(guān)物質(zhì)檢查（

ChP2010）檢查方法：

HPLC

高低濃度對(duì)比法判斷標(biāo)準(zhǔn)：①供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的0.5倍(0.5%)

；②各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的3倍(3.0%)。③供試品溶液色譜圖中任何小于對(duì)照溶液主峰面積0.05倍的色譜峰可忽略不計(jì)。說明：樣品處理過程中采用離心法及過濾法以排除片劑輔料對(duì)檢查的干擾第四節(jié)

含

量

測

定酸堿滴定法分光光度法高效液相色譜法液質(zhì)聯(lián)用法Assay鄭州大學(xué)藥學(xué)院一、酸堿滴定法鄭州大學(xué)藥學(xué)院（一）非水溶液滴定法【示例11-31】

鹽酸氯丙嗪的含量測定（ChP2010，USP34-NF29和JP15

）取本品約0.2g，精密稱定，加冰醋酸10mL與醋酐30mL溶解后，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液

(0.1mol/L)相當(dāng)于35.53mg的C17H19ClN2S·HCl。討論溶

劑

冰醋酸與醋酐的混合溶液由于醋酐解離生成的醋酐合乙酰離子[CH3CO+·(CH3CO)2O]比醋酸解離生成的醋酸合質(zhì)子[H+·CH3COOH]酸性強(qiáng)，更利于增強(qiáng)氯丙嗪的堿性，因此能夠顯著增大滴定突躍范圍。滴定劑高氯酸滴定液(0.1mol/L)指示終點(diǎn)方法電位法指示電極：玻璃電極參比電極：飽和甘汞電極(玻璃套管內(nèi)裝氯化鉀的飽和無水甲醇溶液)高氯酸滴定液溫度校正：①若滴定供試品與標(biāo)定高氯酸滴定液時(shí)的溫度差>10℃，應(yīng)重新標(biāo)定；②若≤10℃，則用下式校正：1l

0N0N

=1+

0.0011(t

-

t

)式中：0.0011為冰醋酸的膨脹系數(shù)；t0為標(biāo)定高氯酸滴定液時(shí)的溫度；

t1為滴定供試品時(shí)的溫度；N0為t0時(shí)高氯酸滴定液的濃度；

N1為t1時(shí)高氯酸滴定液的濃度?？瞻自囼?yàn)一定程度上校正溶劑等對(duì)測定的影響【示例11-32】鹽酸氯丙嗪注射液的含量測定（JP15）鄭州大學(xué)藥學(xué)院精密量取本品適量(約相當(dāng)于鹽酸氯丙嗪0.15g)，置分液漏斗中，加水

30ml與20%氫氧化鈉溶液10ml，用乙醚30ml提取2次，再用乙醚20ml提取3次，合并提取液；用水10ml逐次洗滌上述提取液，直至水層遇酚酞指示液不再顯紅色。水浴濃縮乙醚層至20ml，加無水硫酸鈉5g，靜置20分鐘，脫脂棉過濾，乙醚洗滌，合并洗液與濾液，水浴揮干乙醚。殘?jiān)颖?0ml與冰醋酸5ml使溶解，加溴甲酚綠-結(jié)晶紫混合指示液3滴，用高氯酸滴定液

(0.05mol/L)滴定至溶液由紫紅色變?yōu)樗{(lán)紫色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于17.77mg的C17H19ClN2S·HCl。說明：通過堿化、有機(jī)溶劑提取游離堿氯丙嗪，排除了水的干擾(為減少水分對(duì)測定的干擾，在乙醚提取液中加入無水硫酸鈉脫水)。（二）乙醇-水溶液中的氫氧化鈉滴定法鄭州大學(xué)藥學(xué)院吩噻嗪類藥物鹽酸鹽的水溶液顯酸性，在乙醇-水溶液中，可采用氫氧化鈉滴定液測定其含量。反應(yīng)體系中加入適量的鹽酸，采用電位法指示滴定終點(diǎn)。NaCl

+

H2O第一個(gè)等當(dāng)點(diǎn)：

H

+

+Cl

-

+NaOH

fi過

過第二個(gè)等當(dāng)點(diǎn)：BH

++Cl

-+NaOH

fiB

+

NaCl

+

H2O根據(jù)兩個(gè)等當(dāng)點(diǎn)間相應(yīng)的氫氧化鈉滴定液的體積，即可計(jì)算吩噻嗪類藥物的鹽酸鹽的含量。【示例11-33】

鹽酸異丙嗪的含量測定（

ChP2010）取本品約0.25g，精密稱定，加0.01mol/L鹽酸溶液5鄭州大學(xué)藥學(xué)院mL與乙醇50mL使溶解。照電位滴定法，用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，出現(xiàn)第一個(gè)突躍點(diǎn)時(shí)記下消耗的毫升數(shù)V1，繼續(xù)滴定至出現(xiàn)第二個(gè)突躍點(diǎn)時(shí)記下消耗的毫升數(shù)

V2，V2與V1之差即為本品消耗滴定液的體積。每1ml氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于32.09mg的C17H20N2S·HCl。EP7采用該法測定鹽酸異丙嗪、鹽酸氯丙嗪和鹽酸三氟拉嗪的含量。二、分光光度法鄭州大學(xué)藥學(xué)院直接分光光度法：適用于純度較高、雜質(zhì)及輔料

無干擾或干擾易排除的吩噻嗪類藥物的含量測定；提取后分光光度法：通過提取排除輔料等干擾以測定吩噻嗪類藥物制劑提取后雙波長分光光度法：排除吩噻嗪類藥物的氧化物的干擾；（一）直接分光光度法鄭州大學(xué)藥學(xué)院本法適用于純度較高、雜質(zhì)及輔料無干擾或干擾易排除的吩噻嗪類藥物的含量測定。【示例11-34】鹽酸氯丙嗪(糖衣)片的含量測定（ChP2010）取本品10片，除去包衣后，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于鹽酸氯丙嗪10mg)，置100ml量瓶中，加溶劑[鹽酸溶液(9→1000)70mlL，振搖使鹽酸氯丙嗪溶解，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5mL，置100ml量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法，在254nm的波長處測定吸光度，按C17H19ClN2S·HCl的吸收系數(shù)(E1%

1cm)為915計(jì)算，即得。【示例11-35】鄭州大學(xué)藥學(xué)院鹽酸氯丙嗪注射液的含量測定（ChP2010）精密量取本品適量(約相當(dāng)于鹽酸氯丙嗪50mg)，置200mlL量瓶中，用鹽酸溶液(9→1000)稀釋至刻度，搖勻；精密量取2mL，置100ml量瓶中，用鹽酸溶液(9→1000)稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法，在254nm的波長處測定吸光度，按C17H19ClN2S·HCl的吸收系數(shù)(E1%

1cm)為915計(jì)算，即得。（二）提取后分光光度法測

定通過提取排除輔料等干擾以測定吩噻嗪類藥物制劑【示例11-36】鹽酸異丙嗪口服液的含量測定(USP32-NF27)提取方法：在堿性條件下采用三氯甲烷提取分離游離堿異丙嗪樣品溶解：揮干三氯甲烷后，用稀硫酸溶解異丙嗪殘?jiān)ㄩL：298nm空白對(duì)照液：稀硫酸計(jì)

算：500(C

/V

)(

AU

/

AS

)式中：C(mg/ml)為對(duì)照品溶液的濃度；V(ml)為所取供試品的體積；AU和AS分別為供試品溶液及對(duì)照品溶液的吸光度。（三）提取后雙波長分光光度法鄭州大學(xué)藥學(xué)院提取后分光光度法能夠除去一些干擾物質(zhì)，但卻不能除去吩噻嗪類藥物的氧化物。提取時(shí)，氧化物隨游離堿進(jìn)入有機(jī)相；測定時(shí)，因結(jié)構(gòu)相近，氧化物在吩噻嗪類藥物的測定波長處產(chǎn)生吸收，干擾測定。【示例11-37】

鹽酸氯丙嗪注射液的含量測定

（

USP32-NF27）測定波長：

254nm（最大吸收波長）及277nm（等吸收波長）空白對(duì)照液：0.1mol/L鹽酸溶液計(jì)算公式：12.5C(

A254

-

A277

)U

/V

(

A254

-

A277

)S式中：C(mg/ml)為對(duì)照品溶液的濃度；V(ml)為所取供試品的體積；括號(hào)內(nèi)的公式分別為供試品溶液(U)和對(duì)照品溶液(S)在下標(biāo)所示波長處的吸光度差。（四）二階導(dǎo)數(shù)分光光度法鄭州大學(xué)藥學(xué)院吩噻嗪類藥物制劑中其他成分對(duì)含量測定的干擾，可以采用提取后分光光度法或提取后雙波長分光光度法消除，但操作煩瑣。鹽酸氯丙嗪注射液抗氧劑維生素C的二階導(dǎo)數(shù)光譜近似為接近基線的一條直線，不干擾鹽酸氯丙嗪的測定.鹽酸氯丙嗪可從其二階導(dǎo)數(shù)光譜量取峰266nm～谷254nm距離，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量（五）鈀離子比色法吩噻嗪類藥物在pH2±0.1的緩沖溶液中，與鈀離子(Pd2+)形成紅色配合物，在500nm波長附近具有最大吸收，由于鈀離子僅與未被氧化的硫元素配合顯色，消除了藥物中氧化物對(duì)測定的干擾。比色液的濃度：50

~

250

mg/mL顯色穩(wěn)定性：10分鐘后可穩(wěn)定約2小時(shí)鄭州大學(xué)藥學(xué)院【示例11-38】鹽酸異丙嗪片的含量測定（

USP34-NF29）鄭州大學(xué)藥學(xué)院操作步驟：取3支試管，分別精密加入對(duì)照品溶液、供試品溶液與

0.1mol/L鹽酸溶液(空白溶液)各2ml，再分別加入氯化鈀緩沖溶液各3.0ml，搖勻。取對(duì)照品管溶液和供試品管溶液，以空白管溶液為參比，照紫外-可見分光光度法，分別在最大吸收波長470nm處測定吸光度。計(jì)算公式：50CAU

/

AS式中：C(mg/ml)為對(duì)照品溶液的濃度；AU和AS分別為供試品溶液及對(duì)照品溶液的吸光度。三、高效液相色譜法鄭州大學(xué)藥學(xué)院（一）反相高效液相色譜法在分離具有弱堿性的吩噻嗪類藥物時(shí)，未硅烷化的硅醇基與吩噻嗪類藥物發(fā)生吸附或離子交換作用，使分離效能下降，表現(xiàn)為吩噻嗪類藥物的色譜峰拖尾、保留時(shí)間過長(甚至不能被洗脫)。通常在流動(dòng)相中加入含氮堿性競爭試劑

(掃尾劑)，以抑制堿性藥物與未硅烷化的硅醇基作用。常用的掃尾劑：醋酸銨、三乙胺、二乙胺、乙腈等?！臼纠?1-39】鹽酸氯丙嗪片的含量測定（JP15）色譜條件色譜柱：ODS柱(15cm×4.6mm,

5mm)流動(dòng)相：0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液的稀釋液(1→2)-乙腈(27∶13)柱溫：25℃檢測波長：256nm系統(tǒng)適用性試驗(yàn)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)與氯丙嗪分離度不得小于10氯丙嗪與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰面積比值的RSD不得大于1.0%（n=6)定量方法：

內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量分析內(nèi)標(biāo)物：對(duì)羥基苯甲酸乙酯鄭州大學(xué)藥學(xué)院計(jì)算公式：

(C17

H19ClNS

HCl)

=

Ws

·(QT

/

QS

)·

2鄭州大學(xué)藥學(xué)院式中：WS為鹽酸氯丙嗪對(duì)照品的量(mg)；QT和QS分別為供試品溶液及對(duì)照品溶液中氯丙嗪與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積比值?！臼纠?1-40】

氟奮乃靜注射液的含量測定（ChP2010）色譜條件色譜柱：ODS柱流動(dòng)相：碳酸銨甲醇溶液(1%碳酸銨溶液-甲醇(75∶450)，用醋酸調(diào)節(jié)pH至7.5±0.1)-乙腈(525∶450)檢測波長：260

nm系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：①出峰順序依次為降解物