桂枝附子湯的抗炎鎮(zhèn)痛作用試驗(yàn)研究

桂枝附子湯的抗炎鎮(zhèn)痛作用試驗(yàn)研究【摘要】目的：通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證桂枝附子湯的抗炎、鎮(zhèn)痛作用。方法：抗炎實(shí)驗(yàn)：大鼠試劑關(guān)節(jié)炎實(shí)驗(yàn)，大鼠棉球肉芽腫實(shí)驗(yàn)。鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)：熱刺激致痛實(shí)驗(yàn)，醋酸致痛實(shí)驗(yàn)。結(jié)果：桂枝附子湯對(duì)各炎證模型均有一定的抑制作用。對(duì)熱刺激致痛、醋酸致痛有明顯的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)論：桂枝附子湯有一定的抗炎及鎮(zhèn)痛作用。

【關(guān)鍵詞】桂枝附子湯；鎮(zhèn)痛試驗(yàn)；抗炎試驗(yàn)；大鼠

桂枝附子湯出自《傷寒論》，具有溫經(jīng)散寒，祛風(fēng)除濕，止痛之功效［1］。本文對(duì)該方進(jìn)行了抗炎及鎮(zhèn)痛試驗(yàn)，對(duì)其有效性作出客觀評(píng)價(jià)，為臨床用藥提供參考?，F(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告

1實(shí)驗(yàn)材料1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小白鼠，體重18-22g，SD大鼠，體重150-200g。二級(jí)，雌雄兼有。由昆明醫(yī)學(xué)院動(dòng)物科提供，合格證號(hào)：滇實(shí)動(dòng)證2001040號(hào)。2實(shí)驗(yàn)儀器電子天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；足趾容量測(cè)量?jī)x，根據(jù)文獻(xiàn)制作；微量移液器，上海求精生化試劑儀器有限公司；GJ8402型熱板測(cè)痛儀。3藥物制備及試劑按原方比例：桂枝12g，附子15g，生姜9g，大棗(12枚)25g，甘草6g配藥，先煎附子40～60min，然后納諸藥水煎2次和并藥液，過(guò)濾濃縮成1：1ml/mg，即每毫升水煎湯藥相當(dāng)于生藥1g。阿司匹林腸溶片(昆明友誼制藥廠)；弗氏完全佐劑(美國(guó)sigma公司)；冰醋酸(重慶南方試劑廠)。

2實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果

抗炎實(shí)驗(yàn)

對(duì)大鼠佐劑關(guān)節(jié)炎原發(fā)病變的影響取大鼠32只，雌雄各半，隨機(jī)分成4組。分組及給藥劑量如表1所示，連續(xù)給藥7d。于末次給藥前用容量法測(cè)量每只大鼠右后肢足趾容積2次，取其平均值為致炎前足趾容積。然后分別給藥并于30min后，每只大鼠右后肢足趾皮下注射Freunds完全佐劑致炎，分別于第3、4、5、24h測(cè)量右后趾容積，減去致炎前足趾容積作為腫脹度。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1對(duì)大鼠佐劑關(guān)節(jié)炎原發(fā)病變足趾腫脹的影響

注：與生理鹽水組比較**P＜，*P＜。(下同)

對(duì)大鼠佐劑關(guān)節(jié)炎繼發(fā)病變的影響分組及給藥劑量如表2所示。實(shí)驗(yàn)前先用容量法測(cè)量每只大鼠左后肢足趾容積2次，取其平均值為用藥前的容積。然后致炎(方法同上)。于致炎后第7d按表2所示劑量給藥，連續(xù)7d。測(cè)量致炎后第10～14d左后肢足趾容積。根據(jù)給藥前后左后肢的足趾容積之差，計(jì)算腫脹度。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2對(duì)大鼠佐劑關(guān)節(jié)炎繼發(fā)病變足趾腫脹的影響

對(duì)大鼠棉球肉芽腫形成的影響取大鼠32只，雌雄各半，隨機(jī)分成4組。分組及給藥劑量同上。1d灌胃給藥后全部腹腔注射1%戊巴比妥鈉30ml/kg麻醉后，于左右腋下剪毛，碘酒消毒后再用75%的酒精棉球脫碘，各切1個(gè)1cm長(zhǎng)切口分別埋入1個(gè)處理過(guò)的20mg棉球。隨即縫合皮膚。連續(xù)給藥10d，于末次給藥后1h處死大鼠，將棉球取出后，剔盡脂肪組織置于烘箱中(60℃)烘干，用電子天平秤其干重，計(jì)算肉芽腫的干重。結(jié)果：桂枝附子湯高、低劑量組與生理鹽水組比較有非常顯著性差異P＜，P＜。表明對(duì)大鼠棉球肉芽腫形成有一定的抑制作用。

鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)

對(duì)熱刺激致痛的影響(熱板法)參照文獻(xiàn)方法［2］，篩選合格小鼠。按表3所列組別和劑量灌胃給藥，連續(xù)給藥3d，末次給藥后分別測(cè)量第30、60、120、180、240min小鼠痛閾值。結(jié)果桂枝附子湯高、低劑量組對(duì)熱刺激致痛有一定的抑制作用。

表3對(duì)熱刺激致痛的影響

對(duì)醋酸致痛的影響(扭體法)分組及給藥劑量如表3所示。連續(xù)灌胃給藥3d，于末次給藥30min后，腹腔注射%醋酸溶液/10g，觀察記錄30min內(nèi)小鼠出現(xiàn)扭體的次數(shù)，給藥組與空白組比較計(jì)算鎮(zhèn)痛百分率。結(jié)果與生理鹽水組比較，桂枝附子湯高劑量組有顯著性差異，低劑量組有非常顯著性差異，表明對(duì)醋酸所致小鼠疼痛有明顯的抑制作用。

3小結(jié)

桂枝附子湯在風(fēng)濕病方面應(yīng)用廣泛，臨床主要用治風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)炎、腰膝痛、坐骨神經(jīng)痛、產(chǎn)后痹痛［3］等。本實(shí)驗(yàn)表明桂枝附子湯對(duì)佐劑引起的免疫性炎癥及棉球引起的一般性炎癥有一定的抗炎作用，對(duì)熱板法和扭體法引起的疼痛有明顯的鎮(zhèn)痛作用。

【參考文獻(xiàn)】

［1］王付，石昕昕.仲景方劑臨床應(yīng)用指導(dǎo)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2001：760.

［2］徐淑