果蠅雙因子雜交張玉杰實(shí)驗(yàn)報(bào)告

果蠅雙因子雜交、伴性遺傳雜交和三點(diǎn)測交姓名：張玉杰 系年級：2013級生物科學(xué)班 同組者：鞏昊洲科目：遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn) 題目：果蠅雜交實(shí)驗(yàn) 學(xué)號201300140138實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、 學(xué)習(xí)果蠅雜交方法。2、 通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證自由組合規(guī)律、伴性遺傳規(guī)律。3、 通過三點(diǎn)測交學(xué)習(xí)基因定位(遺傳做圖)方法。4、 學(xué)習(xí)遺傳學(xué)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理方法。實(shí)驗(yàn)原理1?實(shí)驗(yàn)室果蠅品系：18野生型14檀黑體殘翅(eevgvg)6白眼小翅卷剛毛wmsnw白眼B(bar)棒眼Cy翻翅Notch缺刻翅b(bb)黑體y黃體nub2匙形翅2?雙因子雜交本實(shí)驗(yàn)使用18號野生型果蠅和14號純合黑檀體、殘翅果蠅進(jìn)行雜交，其中黑檀體對灰體為隱性，殘翅對長翅為隱性，兩對基因位于非同源染色體上。反交正交反交18?X148P灰長黑殘F(tuán)1灰長014?X18臺18?X148P灰長黑殘F(tuán)1灰長0F]灰長0灰殘：黑長：黑殘=9:3:3:1雙因F:灰長：灰殘：黑長：黑殘=9灰殘：黑長：黑殘=9:3:3:1雙因3?伴性遺傳雜交本實(shí)驗(yàn)使用18號野生型果蠅與純合白眼果蠅雜交，其中白眼相對于紅眼是隱性性狀，白眼基因位于X染色體上。反交 正交18?Xw18?Xw臺P x+x+ XwY?紅眼臺白眼w?X188PXWXWX+Y8白眼？紅眼F:X+X+2X+XwX+YXwYF: X+Xw2XwXwX+YXwY皐紅眼皐紅眼臺紅眼臺白眼皐紅眼皐白眼臺紅眼臺白眼1:1:1:111:1:100伴性遺傳圖解三點(diǎn)測交本實(shí)驗(yàn)使用6號純合白眼、卷剛毛、小翅果蠅與18號野生型果蠅雜交，獲得F1代后再自由交配即可獲得具有8種表型的測交F2代。白眼、卷剛毛、小翅均為X染色體上的隱性性狀。18號P6號皐（wsnm/wsnm） 臺（+++/Y）白卷?。?紅直F［： ￡（+++/wsnm） b（wsnm/丫）v0（測交）紅直長（+++）白直長（w++）紅直小（++m）紅卷長（+sn+）

白卷?。╳snm）紅卷?。?snm）白卷長（wsn+）白直?。╳+m）F28種表型實(shí)驗(yàn)材料：18號野生型果蠅，14號純合黑檀體、殘翅果蠅，白眼果蠅，6號純合白眼、卷剛毛、小翅果蠅；麻醉瓶、酒精燈、玻璃板、毛筆、培養(yǎng)管、酒精棉球、乙醚、解剖鏡實(shí)驗(yàn)步驟：【實(shí)驗(yàn)步驟】1、 培養(yǎng)上表所示4個(gè)品系的果蠅，從子代中分別挑選出處女蠅和雄果蠅。2、 對麻醉瓶進(jìn)行消毒，將各品系果蠅分別麻醉。按照表2所示分別放入有玉米培養(yǎng)基的指管中，保證每管至少2只雌蠅和2只雄蠅。23°C培養(yǎng)。做好標(biāo)記。3、 7天后移去親本，待F1成蠅出來后觀察記錄F1的性狀。正反交產(chǎn)生的F1不必挑處女蠅。4、 將F1雌雄果蠅進(jìn)行自交，把雌雄果蠅分別轉(zhuǎn)移到新的指管中，每管3-4對，23C培養(yǎng)。全程中注意檢查有無霉菌污染，受到霉菌污染的生物材料要及時(shí)處理、不再使用。果蠅不足時(shí)，可引入其他組對應(yīng)品系的果蠅，或?qū)?yīng)的子代果蠅進(jìn)行補(bǔ)充。5、 7天后移去F1，待F2化為成蠅后觀察性狀，并記錄統(tǒng)計(jì)數(shù)量（觀察的性狀為：眼色、翅形、剛毛、體色）。

表2雜交實(shí)驗(yàn)親本雜交類型父本母本雙因子正交14號18號雙因子反交18號14號伴性正交w號18號伴性反交18號w號三點(diǎn)測交18號6號實(shí)驗(yàn)結(jié)果及數(shù)據(jù)處理:伴性遺傳：反交：18早XW￡雄性白眼：16雄性紅眼：10雌性白眼：1雌性紅眼：24伴性遺傳反交X2檢月僉自由度df=3-1=2,查表知，p〉0.05,0與E在5%顯著水平上差異不顯著，遺傳學(xué)上可以認(rèn)為觀察頻數(shù)與理論頻數(shù)間的差異屬于隨機(jī)誤差，伴性遺傳正交符合理論預(yù)測規(guī)律。正交：W早X18￡雄性白眼：18雄性紅眼：11雌性白眼：11雌性紅眼：30伴性遺傳正交X2檢驗(yàn)f2表型皐紅眼皐白眼臺紅眼臺白眼總計(jì)O3011111870E17.517.517.517.570(O-E)156.2542.25156.250.25

(O-E；2/E8.932.418.930.01420.284自由度df=4-l=3，查表知，p〈0.01，結(jié)果與理論值差異顯著，實(shí)得數(shù)非常不符合。實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)與按孟德爾第二定律所預(yù)期的數(shù)據(jù)偏差較大，不可能完全由隨機(jī)誤差導(dǎo)致，所以雙因子反交可能不符合孟德爾自由組合定律或是孟德爾自由組合定律出現(xiàn)的明顯例外。雙因子雜交：正交：18早X14￡黑體長翅：6黑體殘翅：2灰體長翅：34灰體殘翅：8雙因子正交X2檢驗(yàn)f2表型黑體長翅黑體殘翅灰體長翅灰體殘翅總計(jì)O6234850E9.3753.12528.1259.37550(O-E；211.391.26634.5161.89(O-E；2/E1.2150.4051.2270.2023.049自由度df=4-1=3，查表知，p〉0.05,所以結(jié)果與理論數(shù)無顯著差異，實(shí)得數(shù)符合理論值。雙因子雜交：反交：14早X18￡黑體長翅：12黑體殘翅：3灰體長翅：21灰體殘翅：11雙因子反交X2檢驗(yàn)f2表型黑體長翅黑體殘翅灰體長翅灰體殘翅總計(jì)O123211147E&81252.937526.4375&812547(O-E；210.1600.003929.56644.7852(O-E；2/E1.1530.00131.11840.54302.816自由度df=4-1=3，查表知，p〉0.05,所以結(jié)果與理論數(shù)無顯著差異，實(shí)得數(shù)符合理論值。三點(diǎn)測交：6早X18￡表7三點(diǎn)測交F2結(jié)果組別/性狀12 3456789101112總數(shù)+++13+711+87+1110+821+713+611+913+716+1021+716+1311+12268wmsn4+413+70+62+05+56+413+108+120+310+27+17+4142++sn0+01+06+00+00+00+00+01+11+11+00+00+012wm+0+01+11+01+00+11+03+20+10+00+00+00+012+msn1+11+21+01+02+02+01+22+00+00+00+00+019W++3+12+12+31+53+12+24+33+12+02+00+12+649+m+1+23+11+07+01+65+37+31+01+11+00+04+052w+sn0+16+01+52+20+01+11+13+27+07+02+00+040表8重組值計(jì)算發(fā)牛重組伎冒重組值圖距（單位：cM）w-sn15.5%15.5w-m26.9%26.9sn-m19.5%19.5雙交換值=[（15.5+19.5）-26.9]/2=4.05%基因連鎖圖：六?討論與分析我組雙因子雜交可以看出，正反交符合理論值，而且殘翅基因并不影響實(shí)驗(yàn)室果蠅的生存。但是伴性遺傳出現(xiàn)了較大問題，首先是伴性遺傳正交中出現(xiàn)了理論預(yù)測之外的結(jié)果（1只早白眼）。如果排除實(shí)驗(yàn)操作中的問題，那么異常表型的產(chǎn)生可能是由F1代雌果蠅產(chǎn)生配子時(shí)減數(shù)分裂發(fā)生異常，減數(shù)分裂II期XwXw未分離，產(chǎn)生XwXwX+基因型（初級例外）導(dǎo)致的。另外，在正交中出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)數(shù)偏離理論值較大的情況，從正交F2代各表型和相應(yīng)的數(shù)量來看，無論哪一對性狀都偏離了孟德爾基因分離定律。觀察也發(fā)現(xiàn)，在果蠅性別上雄蠅與雌蠅數(shù)也并非1：1.這么大的誤差很有可能是實(shí)驗(yàn)