DB15T 3075-2023 規(guī)?；驁?chǎng)圈舍空氣中有害微生物含量的測(cè)定方法

發(fā)布發(fā)布內(nèi)蒙古自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局2023-07-302023-06-30DeterminationmethodofharmfulmicrobialcontentintheairoflargescalesheephouseICS65.020.30CCSICS65.020.30CCSB40內(nèi) 蒙 古 自 治 區(qū) 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB15/T3075—2023規(guī)?；驁?chǎng)圈舍空氣中有害微生物含量的測(cè)定方法DB15/T3075—2023DB15/T3075—2023II前 言本文按GB/T1.1—2020《準(zhǔn)工導(dǎo)則 第部分標(biāo)化件結(jié)和起規(guī)》起草。本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAM/TC19）歸口。DB15/T3075—2023DB15/T3075—2023DB15/T3075—2023DB15/T3075—2023培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基制備GB4789.3（VRBA）AA.1。GB4789.10Baird-Parker（第二法金黃Baird-Parker）AA.2。GB/T13091AA.3。GB/T18204.3AA.4。GB/T18204.3AA.5。采樣4.2.1 14 規(guī)模羊場(chǎng) largescalesheepfarm存欄基礎(chǔ)母羊達(dá)到500只以上的標(biāo)準(zhǔn)化羊場(chǎng)。下列術(shù)語和定義適用于本文件。3 規(guī)模化羊場(chǎng)圈舍空氣中有害微生物含量的測(cè)定方法范圍（GB4789.2 GB4789.3 GB4789.10 GB/T13091 GB/T18204.3 公場(chǎng)衛(wèi)生驗(yàn)法 第部空氣生物22分別于8:00、14:00、20:00采樣。圈舍對(duì)角線五點(diǎn)法采樣，周邊4點(diǎn)距墻面1.5m，采樣點(diǎn)距地面1.5m。按照GB/T18204.3中的自然沉降法執(zhí)行，采樣點(diǎn)設(shè)置3個(gè)平行，靜置5分鐘。平板菌落計(jì)數(shù)按照GB4789.2規(guī)定的方法計(jì)數(shù)，每個(gè)采樣點(diǎn)取3個(gè)平板的平均值計(jì)算。微生物含量微生物含量以cfu/m3為記，按照奧梅梁斯基公示計(jì)算。微生物含量（cfu/m3）=50000*N/ATA：平板面積，單位為cm2；T：平板暴露時(shí)間，單位為min；N為平均菌落數(shù)，單位為cfu。30%卵黃鹽水50mL與經(jīng)過除菌過濾的1%亞碲酸鉀溶液10mL混合，保存于冰箱內(nèi)。制法pH7.0±0.295mL，121℃15min5095mL50菌劑5mL搖勻后傾注平板。培養(yǎng)基應(yīng)是致密不透明的。使用前在冰箱儲(chǔ)存不應(yīng)超過48h。A.3 345℃～503。Baird-Parker成分附錄A（）成分蛋白胨 7.0g酵母膏 3.0g乳糖 10.0g氯化鈉 5.0g膽或3膽鹽 1.5g中性紅 0.03g結(jié)晶紫 0.002g瓊脂 15.0g蒸餾水 1000mL制法將上述成分溶于蒸餾水中，充分?jǐn)嚢?，調(diào)節(jié)pH為7.4±0.1。煮沸2min，將培養(yǎng)基融化并恒溫至胰蛋白胨10.0g牛肉膏5.0g酵母膏1.0g丙酮酸鈉10.0g甘氨酸12.0g氯化鋰（LiCl·6H2O）5.0g瓊脂20.0g蒸餾水950mL44A.4.2 制法將各成分加到蒸餾水中，加熱煮沸至完全溶解，調(diào)節(jié)pH為7.2～7.6，121℃、20min滅菌，冷至50℃～55℃傾注平板。成分1000mL蒸餾水其選擇性，本培養(yǎng)基宜于當(dāng)天制備，第二天使用。成分成分蛋白胨 10.0g牛肉膏5.0g葡萄糖5.0g硫酸亞鐵0.3g磷酸氫二鈉4.0g煌綠 0.025g或5.0g/L水液5.0mL檸檬鉍銨 2.0g亞硫鈉 6.0g瓊脂 18.0g～20.0g蒸餾水 1000mL制法300mL20mL30mL20mL30mL600mL80pH7.5±0.2，50℃～55注：本培養(yǎng)基不需要高壓滅菌，在制備過程中不宜過分加熱，避免降低其選擇性，貯于室溫暗處，超過48h會(huì)降低蛋白胨10.0g氯化鈉5.0g牛肉膏5.0g瓊脂20.0g蛋白胨10.0g葡萄糖40.0g瓊脂20.0g氯霉素