淺談植物病理實(shí)驗(yàn)室差不多儀器設(shè)備及其使用

/植物病理實(shí)驗(yàn)室差不多儀器設(shè)備及其使用植物病理實(shí)驗(yàn)室常需要進(jìn)行病原菌的分離、純化、接種和顯微觀看等，所需的差不多儀器設(shè)備，除了本書(shū)各有關(guān)章節(jié)已專門介紹的以外，尚有一些常用的儀器設(shè)備。一、玻璃器皿使用及洗滌(一)常用玻璃器皿的種類及用途

1．培養(yǎng)皿倒人適量的固體培養(yǎng)基制成平板，可用于病原菌的分離培養(yǎng)、純化、鑒定、菌落形態(tài)觀看等。是病理實(shí)驗(yàn)室中需用量最多的玻璃器皿之一。一般所用的規(guī)格為直徑9cm，高1．5cm。質(zhì)量，要求皿底要平，明亮無(wú)雜色，能耐高溫、高壓。

2．試管用于分離培養(yǎng)保存菌種，也是病理實(shí)驗(yàn)室中需用量最多的器皿之一。一般所用規(guī)格以1．6cmxl3．6em為宜。試管口以無(wú)翻卷的或光滑的為好。

3．三角瓶要緊用于盛裝培養(yǎng)基和滅菌水，需用量也較多。所用規(guī)格要緊為250ml，其次為200ml及50ml。

4．玻璃棒和玻璃管玻璃棒用于配置溶液時(shí)的混勻攪拌。一般使用直徑0.5cm左右的玻棒較多，依照需要可配備長(zhǎng)短不等的玻棒多個(gè)。玻璃棒和玻璃管還可燒制各種玻璃小用具。

5．滴瓶要緊用于盛裝各種試劑及染液。其規(guī)格以60ml容量為宜。有無(wú)色透明的和棕色的。棕色滴瓶用于盛放應(yīng)避光的試劑。

6．吸管用于吸取各種溶液或菌液。其規(guī)格有0．5ml、1ml、2ml、5ml、lOml等，應(yīng)各具備一定數(shù)量。有單刻度的移液管和多刻度吸管。使用時(shí)，關(guān)于lml以下的吸管都必須將尖端遺留的液體吹人配制溶液的容器中。lml以上(包括lml)的不應(yīng)吹出尖端遺留的液體，當(dāng)液體不再流出時(shí)，應(yīng)使該管尖端緊靠容器內(nèi)壁一段時(shí)刻。

7．燒杯用于各種溶液的配置。100--600ml不同規(guī)格的應(yīng)各具備一定數(shù)量。另外，也應(yīng)有少量的作為分離材料表面消毒用的lOml燒杯。

8．載玻片用于病原菌的顯微檢查、臨時(shí)性或永久性制片。有兩種，一種為一般載玻片，是平的；另一種為凹載玻片，其上有一個(gè)或兩個(gè)凹窩。一般載玻片以薄而無(wú)色的較好，厚而發(fā)綠的質(zhì)量較差。一般載玻片大小為7．5cm×2．5cm×0．1cm。

9．蓋玻片用于顯微檢查，或用于臨時(shí)性或永久性制片。薄而透明為好，其上有白色云斑的多為劣質(zhì)品，對(duì)顯微觀看阻礙極大。規(guī)格通常為18mm×18mm，過(guò)大時(shí)易使浮載劑流失在顯微鏡載物臺(tái)上。

10．雙層瓶由外層較大的瓶和內(nèi)層較小的瓶組成。外層盛放二甲苯，內(nèi)層盛放香柏油。

11．樹(shù)膠瓶用于盛放封片用樹(shù)膠，一般為茶色。

12．玻環(huán)為高1cm，內(nèi)徑lcm的磨口玻璃環(huán)，作真菌孢子萌發(fā)用。

13．蒸餾水瓶用于盛放實(shí)驗(yàn)用蒸餾水。有5000ml、10ml等不同規(guī)格。在頂蓋上有一小的進(jìn)氣孔，接近瓶底處有一出水口，可與橡膠管相連。

14．干燥器可用于盛放需要干燥的樣品或儀器部件(如顯微鏡鏡頭等)。干燥器的下部盛放干燥劑。常用干燥劑有硅膠和無(wú)水氯化鈣等。

15．量筒10ml、100ml、500ml、1000ml等各種規(guī)格的都應(yīng)具備一定數(shù)量。量筒為粗量器，不需矯正，可粗略度量液體體積。使用時(shí)應(yīng)依照所量溶液的多少來(lái)選擇合適的規(guī)格，不可使用過(guò)大的量筒量取較小的體積。如用100ml或500ml量筒量取5ml或10ml溶液，顯然誤差太大。讀數(shù)時(shí)，視線必須和溶液凹面成一水平，不可過(guò)高或過(guò)低。

16．微量吸管(micropipette)微量吸管又稱微量加樣器。要緊用來(lái)吸取微量液體，規(guī)格型號(hào)專門多。每個(gè)微量吸管在一定范圍內(nèi)可調(diào)節(jié)體積，并都標(biāo)有使用范圍。例如，0．5～10μl、2～10μl、10～100μl、100～1000μl、5000μl等。使用方法：將合適大小的塑料嘴(tip)牢固地套在微量吸管的下端，旋動(dòng)調(diào)節(jié)鍵，使數(shù)字顯示器上顯示出所需要吸取的體積，用大姆指按下調(diào)節(jié)鍵，并將吸嘴插入液體中；緩慢放松調(diào)節(jié)鍵，使液體進(jìn)入吸嘴，并將其移至接收試管中；按下調(diào)節(jié)鍵，使液體進(jìn)入接收管；按下排除鍵，以去掉用過(guò)的空吸嘴或直接用手取下吸嘴。

微量加樣器分為可滅菌式和不可滅菌式。進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí)，假如使用的是不可滅菌式微量加樣器，則要盡量使用帶有過(guò)濾棉紗的吸嘴。

17．小塑料離心管又稱Eppendorf管。有1．5ml和0．5ml兩種型號(hào)。要緊用于小量菌體的離心、核酸提取、PCR反應(yīng)等。

18．容量瓶有50ml、100ml、250ml、500ml、1000ml等規(guī)格。用于配置一定體積的溶液。在瓶頸上有一刻度，加入溶液到此刻度時(shí)，就相當(dāng)于瓶上所標(biāo)明溫度(通常為20C)時(shí)的體積。使用量瓶時(shí)，不要將溶質(zhì)直接倒人量瓶然后加水至刻度，而應(yīng)使溶質(zhì)首先在小燒杯中加水溶解，再將溶液沿玻棒到人量瓶。在量瓶?jī)?nèi)，可事先加水至體積223或1／2。蓋上磨口瓶塞子后，用食指或掌心頂住瓶塞，倒置量瓶，不時(shí)搖動(dòng)和翻轉(zhuǎn)量瓶，以使溶液充分混勻，然后加水至刻度。

19．滴定管有帶玻璃塞的酸性溶液滴定管和帶橡皮管的堿性滴定管兩種。不能用酸性滴定管裝盛堿性溶液，以免把玻璃塞腐蝕。常量滴定管有25ml及50ml兩種。這兩種滴定管的最小刻度單位是0．1ml，滴定后讀數(shù)時(shí)能夠可能到小數(shù)點(diǎn)后兩位數(shù)字，即液體的體積可量至0．01ml。此外，還有半微量滴定管，最小可讀單位是0．01--0．02ml，讀數(shù)可到小數(shù)點(diǎn)后第三位數(shù)字。

此外，還應(yīng)有廣口瓶、細(xì)口瓶、漏斗、標(biāo)本瓶、研缽、表面皿、滴管、染色缸；酒精燈、稱量瓶等玻璃器皿及用具。

(二)常用玻璃器皿的洗滌

實(shí)驗(yàn)室的各種玻璃器皿，必須通過(guò)洗滌以后才能使用。清潔的方法和所用的洗滌劑因目的而不同。但需要注意：玻璃器皿用過(guò)后，最好在未干燥之前洗滌，尤其是滴管、吸管等，如不能立即洗，也應(yīng)浸入水中；為了防止發(fā)生意外，器皿沾染了對(duì)人有傳染性的或者是屬于植物檢疫范圍內(nèi)的微生物，應(yīng)先用水煮沸或高壓蒸汽滅菌，或在消毒液中浸過(guò)以后再洗，消毒可用5％福爾馬林或漂白粉液(漂白粉10g，水140ml)。

1．洗滌劑洗滌劑的種類專門多，各種洗滌劑的性能和用途各不相同。水是用量最大的天然洗滌劑。但只能洗去可溶于水的污物，不能溶于水的污物，需先用其他方法處理后再用水清洗。要求比較潔凈的器皿，清水洗過(guò)后，還需再用蒸餾水洗。常用的化學(xué)洗滌劑有以下幾種。

(1)鉻酸洗滌液。這是常用的洗滌液，其成分和配法如下：

濃鉻酸洗滌液稀鉻酸洗滌液

重鉻酸鉀60g60g

濃硫酸60ml60ml

水300ml1000ml

重鉻酸鉀溶解在溫水中，待冷卻后緩緩加入濃硫酸，邊加邊攪拌。配好的溶液呈深紅色，同時(shí)可見(jiàn)均勻的紅色小結(jié)晶。

此外，也可用重鉻酸鈉代替重鉻酸鉀，按重鉻酸鈉60g濃硫酸100ml水100ml配制。配制鉻酸洗滌液的濃硫酸，相對(duì)密度在1．84左右，能夠利用廢硫酸配制。鉻酸洗滌液是強(qiáng)氧化劑，去污能力專門強(qiáng)，但在玻璃器皿上如沾有油脂、凡士林和石蠟等時(shí)，用該洗滌液無(wú)效。同時(shí)沾有鋇鹽的玻璃器皿也不宜用鉻酸洗滌液。因?yàn)殂t酸洗滌液可與鋇鹽起作用形成硫酸鋇，附著在玻璃器皿上，專門難洗去。玻璃器如帶有較多的還原性物質(zhì)，要先用水洗過(guò)后再用鉻酸洗滌液洗，否則洗滌液的去污能力會(huì)專門快降低。通過(guò)初步洗滌的玻璃器皿在鉻酸洗滌液中浸泡至少15min，再用清水沖洗。將洗滌液加熱至45-50℃能夠增加去污能力。稀的鉻酸洗滌液能夠煮沸用。此洗滌液可反復(fù)使用，直至呈青褐色為止，現(xiàn)在鉻酸已被還原而無(wú)去污作用。

鉻酸洗滌液的腐蝕性專門強(qiáng)，濺到桌、椅上應(yīng)立即用水洗去，并用濕布擦凈。沾到皮膚和衣物上應(yīng)立即用水洗，再用蘇打水(碳酸鈉)或氨水沖洗。

(2)高錳酸鉀溶液。高錳酸鉀溶液是專門好的洗滌液，特不是在加酸和加熱的情況下，它的氧化和去污能力更強(qiáng)。一般使用的是5％的高錳酸鉀溶液。使用的方法是將高錳酸鉀溶液加在需要洗滌的器皿中，加入少許濃硫酸(100ml溶液加濃硫酸3-5ml)，可加熱至50～60℃。但需注意不能用鹽酸代替硫酸，因?yàn)辂}酸在高錳酸鉀溶液中會(huì)分解產(chǎn)生有毒的氯氣。玻璃器皿經(jīng)高錳酸鉀溶液洗滌后，必須用水沖洗潔凈，有時(shí)器皿上會(huì)殘留一層褐色物質(zhì)，可用硫酸酸化的5％草酸溶液洗去。

(3)酸和堿。器皿上沾有煤膏、焦油和樹(shù)脂等物質(zhì)，可用濃硫酸或40％氫氧化鈉溶液使它們?nèi)芙?，處理時(shí)刻5—10min。濃鹽酸(工業(yè)用)可洗去水垢和某些無(wú)機(jī)鹽沉淀。

(4)有機(jī)溶劑。脂類、樹(shù)脂和其他可溶于有機(jī)溶劑的物質(zhì)，可用乙醚、丙酮、酒精、石油醚、苯、二甲苯、松節(jié)油及四氯化碳等有機(jī)溶劑洗去。二甲苯可洗脫油漆的污垢。但這些溶劑較貴，在必要時(shí)才使用。

(5)5％～10％乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na2)溶液。加熱煮沸可洗脫玻璃儀器內(nèi)壁的白色沉淀物。

(6)肥皂和其他洗滌劑。肥皂是專門好的去污劑，熱肥皂的去污能力更強(qiáng)，能夠洗去器皿上的油脂。10％磷酸三鈉(Na3PO4)溶液去污去油脂的能力專門強(qiáng)，比用肥皂洗得更潔凈。

總之，洗滌劑的種類專門多，能夠依照要求，選擇經(jīng)濟(jì)而有效的洗滌液。一般實(shí)驗(yàn)室用得最多的是肥皂(包括合成洗滌劑)和鉻酸洗滌液，這兩種洗滌劑能夠解決大部分器皿的洗滌問(wèn)題。

2．玻璃器皿的洗滌

(1)新玻璃器皿的洗滌。新購(gòu)置的玻璃器皿，不管是軟玻璃依舊硬玻璃，都會(huì)產(chǎn)生一些可溶性物質(zhì)。這些物質(zhì)會(huì)阻礙實(shí)驗(yàn)結(jié)果，使用前必須洗滌潔凈。最好的方法是先用2％的鹽酸溶液處理數(shù)小時(shí)，再用清水洗凈。必要時(shí)，再按一般的方法用肥皂和鉻酸洗滌液洗，清水沖凈。

(2)一般器皿。試管、燒杯、燒瓶和培養(yǎng)皿等器皿，洗滌前應(yīng)先用鐵絲或鐵片將其中的殘?jiān)宄缓笥盟磧?，或者用肥皂水洗滌，再用清水沖洗。依照實(shí)驗(yàn)要求，必要時(shí)，用蒸餾水沖洗一次。需要更潔凈的器皿，在上述洗滌的基礎(chǔ)上，再用鉻酸洗滌液處理10min，然后用清水將洗滌液完全沖凈。器皿中如有有害微生物，應(yīng)先高壓蒸汽滅菌處理后，將培養(yǎng)物倒去，再進(jìn)行洗滌。

(3)載玻片和蓋玻片。載玻片和蓋玻片能夠按以上步驟，水洗后放在鉻酸洗滌液中浸泡幾小時(shí)，或者在稀的鉻酸洗滌液(也可用濃的鉻酸洗滌液稀釋3--4倍)中煮沸半小時(shí)，然后取出用清水沖凈，再用脫脂的潔凈紗布擦干。載玻片和蓋玻片上如有油脂或加拿大樹(shù)膠，可先用肥皂水或合成洗滌劑煮過(guò)再洗。通過(guò)染色和加拿大樹(shù)膠封蓋的載玻片，放在濃的硅酸鈉中煮效果更好。細(xì)菌的鞭毛染色，要求用特不潔凈的載玻片。應(yīng)將載玻片在鉻酸洗滌液中煮沸10min，取出用10％的氫氧化鈉溶液沖凈，然后再在鉻酸洗滌液中煮沸，最后用水沖凈。洗凈的載玻片，可儲(chǔ)放在酸化的95％酒精(滴人數(shù)滴濃鹽酸)中，用時(shí)取出擦干或在酒精燈上將酒精燒去。而一般染色用的載玻片，在不太臟時(shí)，可用毛刷沾上去污粉，在載玻片上濕擦，然后用水沖凈，以潔凈紗布擦干。

(4)滴定管和吸管。滴定管和吸管可用鉻酸洗滌液洗，但連在滴定管上的橡皮管不要沾上洗滌液，橡皮一旦汲取洗滌液就專門難洗去。滴定管用洗滌液洗過(guò)后還不夠清潔，可試用如下方法：先用少量95％酒精洗滌，然后在管中盛2ml的95％酒精，再加入5mi的濃硝酸。在滴定管上端，罩一試管，以免藥物飛濺。當(dāng)化學(xué)作用終止時(shí)，滴定管已洗滌潔凈。

(5)專門清潔法。周密的實(shí)驗(yàn)所用玻璃器皿只將表面附著物洗去是不夠的，玻璃中的可溶性物質(zhì)也阻礙實(shí)驗(yàn)結(jié)果。這些玻璃器皿，可先在0．1mol/L氫氧化鉀或氫氧化鈉溶液中煮1h，再在0．1mol／L的硫酸或鹽酸溶液中煮1h，然后用蒸餾水洗幾次，再在蒸餾水中浸泡幾小時(shí)后取出于燥。二、金屬小用具小鑷子、小剪刀、解剖刀。這些用具是分離培養(yǎng)時(shí)剪取或解剖材料所必需的。

撥針、三角針。在鏡檢時(shí)用于挑取病菌。

接種針、接種環(huán)。接種針是在培養(yǎng)基上作真菌接種用；培養(yǎng)環(huán)是在培養(yǎng)基上作細(xì)菌接種用的。接種針是用鉑金絲或一般鋼針將端部彎成90’的鉤狀作成；接種環(huán)是用有彈性的鉑金絲將端部彎成環(huán)形作成的。兩者都裝在鋁度的長(zhǎng)柄上，柄端連接一段膠柄，以減弱其導(dǎo)熱性，防止?fàn)C手。

雙面刀片。要緊用于徒手切片。

保溫漏斗。一般為銅質(zhì)雙層的，漏斗形，中間夾層能夠盛裝熱水保溫，在其上插入一般漏斗，漏斗下端接上橡皮管及夾子，即可作為向試管分裝培養(yǎng)基用。

消毒盒。有不銹鋼質(zhì)的和鋁質(zhì)的，用于盛裝注射針筒、針頭和其他需消毒的小用具。

酒精噴燈。用于燒制各種玻璃小用具。

手持噴霧器。用于小空間范圍消毒噴霧及盆栽試驗(yàn)的噴藥。

孢子噴霧器。用于接種時(shí)噴灑孢子或細(xì)菌懸浮液。三、幾種常用儀器(一)天平

天平可分為兩大類：一類是藥物天平，或叫架盤天平，結(jié)構(gòu)比較粗糙，用于不需要太精確的一般性稱重；另一類是分析天平，結(jié)構(gòu)精細(xì)，用于精確的稱重。

1．架盤天平依照其最大稱量可分為100g(感量0．18)、200g(感量0．2g)、500g(感量0．5g)和1000g(感量1．0g)四種。一般用于稱量藥品、大試量的樣品和配料。

2．分析天平分析天平是植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)定量分析中常用的周密儀器之一。分析天平按其稱量的精度可分為千分之一(準(zhǔn)確到0．001g)，萬(wàn)分之一或萬(wàn)分之二(準(zhǔn)確到0．0001g或0．0002g)。這種天平通常被稱作稱感量為干分之一的分析天平，或感量為萬(wàn)分之一或萬(wàn)分之二的分析天平。另外，還有半微量和微量天平，其感量為十萬(wàn)分之一或百萬(wàn)分之一克。它們可稱量至微克。

被稱量的物品要求稱準(zhǔn)到lmg時(shí)，方可使用分析天平。應(yīng)保持天平內(nèi)外的清潔。天平內(nèi)若有污物只能用毛刷輕輕刷去。每次稱量前，應(yīng)檢查天平位置是否水平，并測(cè)定零點(diǎn)。如零點(diǎn)偏差較大，必須經(jīng)校正后使用。稱量的物品必須放在稱量瓶或試管內(nèi)，不可直接放在天平盤上。稱量能腐蝕金屬并有揮發(fā)性質(zhì)的藥品時(shí)，必須在帶蓋的稱量瓶中稱量。稱量液體藥品時(shí)，應(yīng)特不小心，切勿滴灑。天平使用完畢后，必須登記使用情況。

(二)超凈工作臺(tái)

植物病原菌的分離、培養(yǎng)等工作，要求在無(wú)菌的環(huán)境中進(jìn)行，以減少雜菌的污染機(jī)會(huì)，提高工作效率。因此，超凈工作臺(tái)在植物病害研究中是專門常用的。

超凈工作臺(tái)可提供高潔凈度的工作環(huán)境。超凈工作臺(tái)型號(hào)專門多，有可供單人使用和雙人使用的。按氣流方向的不同有幾種不同的類型：一種為垂直流，凈化后的氣流從上向下，形成氣流屏障保持臺(tái)面無(wú)菌；另一種為水平流，氣流面向操作者方向流淌，使外界氣流不能混入。

1．工作原理室內(nèi)空氣經(jīng)初過(guò)濾器過(guò)濾后，利用離心風(fēng)機(jī)，將通過(guò)預(yù)過(guò)濾的空氣，壓往高效過(guò)濾器，進(jìn)行二次過(guò)濾，使得具有一定潔凈度、一定風(fēng)速的空氣進(jìn)入需要凈化的區(qū)域內(nèi)，并將該潔凈區(qū)域內(nèi)的塵埃帶走，形成高潔凈度的無(wú)塵無(wú)菌工作環(huán)境。

2．使用方法

(1)為延長(zhǎng)使用壽命，一般應(yīng)將超凈工作臺(tái)置于較潔凈的環(huán)境中，并盡量遠(yuǎn)離塵源與震源。

(2)關(guān)于新安裝的或長(zhǎng)期未使用的工作臺(tái)，在使用前必須用吸塵器或不產(chǎn)生纖維的工具認(rèn)真進(jìn)行清潔，再采納紫外線滅菌法進(jìn)行滅菌處理。

(3)每次使用之前應(yīng)提早15min開(kāi)機(jī)，以保證工作區(qū)域的潔凈度。開(kāi)機(jī)后即開(kāi)啟紫外燈，殺滅工作區(qū)域內(nèi)表面積存的微生物，使用時(shí)關(guān)閉紫外燈，開(kāi)啟日光燈，并啟動(dòng)風(fēng)機(jī)。

(4)當(dāng)需要調(diào)節(jié)風(fēng)機(jī)風(fēng)速時(shí)，用工作臺(tái)操作面板上輕觸型開(kāi)關(guān)進(jìn)行調(diào)節(jié)。

3．維修與保養(yǎng)

(1)操作區(qū)內(nèi)的使用溫度不得超過(guò)6012。

(2)操作區(qū)內(nèi)不要存放不必要的物品，以保持操作區(qū)的潔凈氣流不受干擾。

(3)定期(一般每2個(gè)月1次)用O．DF-2A型熱球式電風(fēng)計(jì)測(cè)量操作區(qū)風(fēng)速。

(4)定期對(duì)環(huán)境進(jìn)行滅菌(一般1周1次)，同時(shí)經(jīng)常用紗布蘸上酒精或丙酮等將紫外燈表面擦凈，保持表面清潔，以免阻礙殺菌效果。

(5)當(dāng)加大風(fēng)機(jī)電壓已不能使操作區(qū)風(fēng)速達(dá)到0．32m／s時(shí)，必須更換高效空氣過(guò)濾器。

(6)更換高效空氣過(guò)濾器時(shí)，可打開(kāi)頂蓋，注意過(guò)濾器上的箭頭標(biāo)志，箭頭指向即為氣流流向。

(7)更換高效空氣過(guò)濾器后，應(yīng)用Y09—4型塵埃離子計(jì)數(shù)器檢查四邊框密封是否良好，調(diào)節(jié)風(fēng)機(jī)電壓，使操作區(qū)平均風(fēng)速保持在0．32—0．48m／s范圍內(nèi)，再用Y09～4型塵埃離子計(jì)數(shù)器檢查潔凈度。

(三)離心機(jī)

1．離心機(jī)的種類離心機(jī)依照可達(dá)到的最高轉(zhuǎn)速能夠分為低速離心機(jī)、高速離心機(jī)和超速離心機(jī)。

(1)低速離心機(jī)。最大速度一般小于10000r／min左右。要緊用于種子帶菌的洗滌檢驗(yàn)和病毒提純過(guò)程中的低速離心等。

(2)高速離心機(jī)。離心速度能夠達(dá)10000—25000r／min，具有冷凍控溫系統(tǒng)，可依照需要調(diào)節(jié)離心時(shí)的離心機(jī)腔的溫度。離心機(jī)轉(zhuǎn)頭配備齊全，種類繁多，用戶可依照需要配置。高速離心機(jī)一般使用塑料及金屬離心管。

(3)超速離心機(jī)。離心速度可達(dá)到20000r／min以上，有的最高速度可達(dá)80000r／min以上。超速離心機(jī)又可分為分析超速離心機(jī)和制備超速離心機(jī)兩類。分析超速離心機(jī)具有光學(xué)系統(tǒng)，要緊用于鑒定、分析或測(cè)定樣品的特性，也可用于制備。制備超速離心機(jī)要緊用于分離、純化及制備樣品，有些可加分析附件，用于分析測(cè)定。超速離心機(jī)適于各種細(xì)胞器、病毒和生物大分子的分離和分析需要。

2．離心機(jī)的轉(zhuǎn)頭是離心機(jī)的重要組成部分。要緊包括以下幾種。

(1)角型轉(zhuǎn)頭。在離心管與轉(zhuǎn)頭的轉(zhuǎn)軸之間有一固定角度。要緊用于差速制備離心及樣品濃縮，為圓錐型。每個(gè)轉(zhuǎn)頭有一個(gè)最大離心半徑和最小離心半徑，兩者的差值確實(shí)是樣品在離心管中的最大沉降距離(或旋轉(zhuǎn)半徑)。

(2)水平轉(zhuǎn)頭。要緊用于密度梯度離心。離心管放在吊桶中，吊桶按號(hào)懸掛于轉(zhuǎn)頭的中心主體上。當(dāng)離心機(jī)開(kāi)始運(yùn)轉(zhuǎn)加速，吊桶受離心力作用逐漸由垂直懸掛轉(zhuǎn)為水平方向懸掛。

(3)垂直轉(zhuǎn)頭。是專為密度梯度離心設(shè)計(jì)的轉(zhuǎn)頭，要緊用于等密度區(qū)帶離心。垂直轉(zhuǎn)頭的離心管與轉(zhuǎn)頭旋轉(zhuǎn)軸平行，而與離心力方向垂直。離心管在使用時(shí)應(yīng)與相應(yīng)的離心轉(zhuǎn)頭相配套。大部分離心管是塑料制作的。不銹鋼離心管可用于有機(jī)試劑及酸堿腐蝕性溶液的離心。低速離心的離心管一般不帶管帽，高速離心時(shí)為增強(qiáng)離心管在離心時(shí)的強(qiáng)度要求加上管帽。

3．離心機(jī)的使用注意事項(xiàng)

(1)離心機(jī)裝入的離心管個(gè)數(shù)應(yīng)為偶數(shù)，裝有樣品的離心管，應(yīng)先在天平上兩兩互相配平，再將重量相一致的兩個(gè)離心管裝在相互對(duì)稱的管槽中。裝入離心機(jī)的所有離心管的重量應(yīng)差不多一致，以保證離心機(jī)工作時(shí)的平衡。

(2)離心管的規(guī)格應(yīng)與離心槽匹配。離心管過(guò)小時(shí)，離心過(guò)程中易引起管的破裂。

(3)使用時(shí)不得使轉(zhuǎn)頭在超過(guò)最大同意速度下運(yùn)轉(zhuǎn)。

(4)離心機(jī)應(yīng)安放在平坦堅(jiān)實(shí)的平臺(tái)上，以免運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生不必要的苦惱。

(5)儀器在高速旋轉(zhuǎn)時(shí)切不可隨意打開(kāi)蓋門，以免發(fā)生事故。

(6)儀器不用時(shí)，應(yīng)將電線與外電網(wǎng)相連的一端拔下。

(7)使用前必須經(jīng)常檢查離心管是否有裂紋、老化等現(xiàn)象，如有應(yīng)及時(shí)更換。

(8)使用完畢后，將轉(zhuǎn)頭和儀器擦潔凈，以防樣品液沾污而產(chǎn)生腐蝕。

(四)烘箱和恒溫箱

烘箱又叫干燥箱，常用的是電熱鼓風(fēng)干燥箱。用于物品的干燥和干熱滅菌，工作溫度為50～250℃。恒溫箱又叫培養(yǎng)箱，在植物病理實(shí)驗(yàn)室要緊用于真菌、細(xì)菌等恒溫培養(yǎng)，工作溫度在室溫至60℃。新式的恒溫箱能夠制冷，其工作溫度(通常為10—60℃)，能夠依照需要而設(shè)定。這兩種儀器的工作原理、結(jié)構(gòu)和使用方法相似。在植物病理實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備多個(gè)恒溫箱，以便滿足不同病原菌培養(yǎng)時(shí)的不同溫度需要。

(1)檢查溫度計(jì)是否插入座內(nèi)。溫度計(jì)應(yīng)插在放氣調(diào)節(jié)器中部的小孔內(nèi)。

(2)將電源插頭插好，打開(kāi)開(kāi)關(guān)。

(3)將自動(dòng)恒溫操縱旋鈕沿順時(shí)針的方向旋轉(zhuǎn)，指示燈紅燈亮表示電熱絲開(kāi)始加熱。

(4)在加熱的過(guò)程中，注意觀看溫度計(jì)所指示的恒溫箱內(nèi)實(shí)際溫度，當(dāng)溫度達(dá)到所設(shè)定溫度時(shí)，應(yīng)該紅色指示燈滅，而綠色指示燈亮?，F(xiàn)在，恒溫箱處于保溫狀態(tài)。

(五)酸度計(jì)

酸度計(jì)是測(cè)定溶液pH的重要儀器。實(shí)驗(yàn)室常用的是國(guó)產(chǎn)雷磁25型酸度計(jì)，它是直讀型pH計(jì)，可用于pH測(cè)定和電動(dòng)勢(shì)測(cè)定。

1．使用方法

(1)安裝電極。儀器配備221型玻璃電極和222型甘汞電極。把玻璃電極的塑料帽夾在電極夾的夾子上，插頭插在插孔內(nèi)。把甘汞電極的金屬帽夾在電極夾的另一夾子上，由于它具有金屬的帽子，可直接與儀器內(nèi)部形成回路。二個(gè)電極的高度，可利用電極夾上的支頭螺絲調(diào)節(jié)。

(2)校正。先將“pHnnV'’開(kāi)關(guān)撥到“pH'’位置。然后，打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，指示燈亮后，應(yīng)預(yù)熱5min。將電極浸入已知pH的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液中，應(yīng)使玻璃電極的球狀體和甘汞電極的毛細(xì)孔完全浸人溶液。再輕輕搖動(dòng)試杯，使電極所接觸的溶液均勻。調(diào)節(jié)溫度補(bǔ)償器，使旋鈕指示的溫度與杯內(nèi)溶液(或室溫)的溫度相同。依照標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的pH，將量程選擇開(kāi)關(guān)撥至0--7或7--14?；匦D(zhuǎn)零點(diǎn)調(diào)節(jié)器，使指針指在pH7處。按下讀數(shù)開(kāi)關(guān)，或稍許轉(zhuǎn)動(dòng)。轉(zhuǎn)動(dòng)定位調(diào)節(jié)器，使指針指在標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的pH處。放開(kāi)讀數(shù)開(kāi)關(guān)，指針應(yīng)在pH7處。如有變動(dòng)，則重復(fù)操作至數(shù)值穩(wěn)定為止。為了更好的校準(zhǔn)，可分不采納兩種pH范圍(0～7和7～14)的已知pH的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液進(jìn)行校正。校正完畢，用蒸餾水沖

洗電極與試杯。校正后，切勿再旋動(dòng)定位調(diào)節(jié)器，否則必須重新校正。

(3)測(cè)量。用濾紙輕輕觸及兩個(gè)電極以吸干剩余的溶液，或用待測(cè)液洗電極。然后，將電極浸人盛有待測(cè)液中，并不斷攪動(dòng)溶液。按下讀數(shù)開(kāi)關(guān)，指針?biāo)傅膒H即為待測(cè)液的pH。重復(fù)幾次，直至數(shù)值不變?yōu)橹?。在放開(kāi)讀數(shù)開(kāi)關(guān)后，指針必須指在pH7處，否則，應(yīng)旋轉(zhuǎn)零位調(diào)節(jié)器至pH7處以后，重測(cè)待測(cè)液的pH。若在量程0--7范圍測(cè)量時(shí)，指針讀數(shù)超出刻度范圍，應(yīng)將量程開(kāi)關(guān)撥至7—14的位值再重復(fù)操作。測(cè)量完畢，放開(kāi)讀數(shù)開(kāi)關(guān)，關(guān)閉電源開(kāi)關(guān)。然后沖洗潔凈，玻璃電極可浸泡在蒸餾水中而將甘汞電極離開(kāi)蒸餾水并戴上橡皮帽。

2．注意事項(xiàng)

(1)玻璃電極在初次使用前，必須在蒸餾水中浸泡數(shù)日至一星期，至少浸泡一晝夜。因此，應(yīng)經(jīng)常浸泡在蒸餾水中以備隨時(shí)可用。

(2)玻璃電極不要與強(qiáng)烈吸水的溶劑接觸太久。在強(qiáng)堿溶液中使用應(yīng)盡速操作，用畢立即用水洗凈。

(3)玻璃電極的玻璃膜不要沾上油污。若不慎沾上油泥應(yīng)先用酒精，再用四氯化碳或乙醚，最后用酒精浸洗，再用水洗凈。

(4)玻璃電極上的玻璃膜特不薄，極易損壞，清洗后只能用濾紙輕輕吸干，千萬(wàn)不要揩擦，以免碰碎玻璃膜。

(5)甘汞電極中的氯化鉀溶液應(yīng)無(wú)氣泡，同時(shí)要有少許氯化鉀結(jié)晶存在，以使溶液保持飽和狀態(tài)。

(6)首次使用時(shí)，應(yīng)檢查電源是否與儀器要求相符。儀器的電源必須要有地線，以使指針?lè)€(wěn)定。

(六)分光光度計(jì)

分光光度計(jì)不僅能在可見(jiàn)光區(qū)域內(nèi)測(cè)定有色物質(zhì)的汲取光譜，而且也能在紫外及紅外光區(qū)域測(cè)定無(wú)色物質(zhì)的汲取光譜。多數(shù)情況下，樣品不需要顯色就能進(jìn)行定性和定量分析。在此著重介紹國(guó)產(chǎn)751型分光光度計(jì)的使用。751型分光光度計(jì)是可見(jiàn)光和紫外光分光光度計(jì)，其波長(zhǎng)范圍為200--1000nm。

1．使用方法

(1)在電源電壓與儀器要求的電壓相符時(shí)，插上電源插頭。

(2)儀器裝有兩個(gè)光源燈。鎢燈的波長(zhǎng)范圍為320—1000ml，氫燈為320nm以下。撥動(dòng)光源燈座的把手，將選用的光源燈置于光路中。依照需要能夠在光路中插入濾光片，以減少雜散光，一般情況下無(wú)此必要。

(3)檢查儀