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文檔簡介

基因工程的酶學(xué)基礎(chǔ)1基因工程常用酶有哪些種類?2.何謂限制與修飾現(xiàn)象?3.限制性內(nèi)切酶分為幾種類型?哪一類為最常用?它有什么特點(diǎn)?定義:生物技術(shù)中能用于DNA和RNA分子的切、連接、聚合、反轉(zhuǎn)錄等有關(guān)操作各種酶糸統(tǒng)。常用的工具酶工具酶名稱限制性內(nèi)切核酸酶在DNA分子內(nèi)部的特異性的堿基序列內(nèi)部進(jìn)行切割restrictionendonucleasesDNA連接酶將兩條以上的線性DNA分子或片段催化形成磷酸二酯鍵連接成一個整體·DNA聚合酶I通過向3'端逐一增加核苷酸以填補(bǔ)雙鏈DNA分子上的單鏈裂DNApolymeras口,即5”→3DNA聚合酶活性與3→5及5→3外切酶活性多核苷酸激酶催化將把一個磷酸分子加到多核苷酸鏈的5”O(jiān)H末端上DNApolymerasekinease反轉(zhuǎn)錄酶以RNA或DNA鏈為模板合成互補(bǔ)的cDNA鏈DNA末端轉(zhuǎn)移酶將同聚物尾巴加到了線性雙鏈DNAterminalDeoxynuc或單鏈DNA分子的3OH末端或DNA的3末端標(biāo)dNTPleatidytransferase接下表格)常用的工具酶(續(xù)上表格)工具酶名稱主要功堿性磷酸酶去除DNA,RNA,dNTP的5'磷酸基團(tuán)BAPorCIP核酸外切酶II降解DNA3-OI末端的核苷酸殘基exonucleaseIll降解酶S1降解單鏈DNA或RNA,產(chǎn)生帶5'磷酸的單核苷酸或寡聚核苷酸,同時也可切割雙鏈核酸分子的單鏈區(qū)核酸酶Bal31降解雙鏈DNA,RNA的5”及3末端nucleaseBal31高專一性單鏈核苷酸TaqdNa聚合酶能在高溫(72℃)下的單鏈DNA為模板TaqdNapolymerase從5’→3方向合成新生的互補(bǔ)鏈

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