束縛應(yīng)激實驗動物模型研究進(jìn)展

精品文檔-下載后可編輯束縛應(yīng)激實驗動物模型研究進(jìn)展【摘要】應(yīng)激是機(jī)體在生存環(huán)境不利因素的適應(yīng)過程中，實際與認(rèn)識上的要求與適應(yīng)和應(yīng)對能力之間的不平衡導(dǎo)致的身心緊張狀態(tài)及其反應(yīng)。本文通過大量的試驗和觀察，闡述了心理應(yīng)激對雌性動物周期和排卵的影響、對雄性動物激素水平和繁殖性能的影響，分析了妊娠期間心理應(yīng)激和1F代仔鼠焦慮行為水平，以供參考。

【關(guān)鍵詞】心理應(yīng)激；束縛應(yīng)激；動物模型

近年來，隨著社會的發(fā)展和生活節(jié)奏的不斷加快，人們面臨的壓力（應(yīng)激）也越來越大，其中主要有生活、工作和職業(yè)、心理3個方面的壓力，對人類的身心健康造成了傷害。1936年加拿大病理生理學(xué)家Selye第一次提出應(yīng)激（Stress）一詞，此后，這個詞便在世界范圍內(nèi)被廣泛采用。Selye將應(yīng)激描述為機(jī)體對外界或內(nèi)部各種非常刺激所產(chǎn)生的非特異性應(yīng)答反應(yīng)的總和。在典型情況下，應(yīng)激的發(fā)展可分為3個階段，即驚恐反應(yīng)或動員階段（stageofmobilizationoralarmreaction）、抵御或適應(yīng)階段（stageofadaptationorresistance）、衰竭階段（stageofexhaustion）。心理應(yīng)激是有機(jī)體在某種環(huán)境刺激作用下由于客觀要求和應(yīng)付能力不平衡所產(chǎn)生的一種適應(yīng)環(huán)境的緊張反應(yīng)狀態(tài)，包括面對刺激時的情緒以及知覺反應(yīng)。心理應(yīng)激的產(chǎn)生可提高人的警覺水平，應(yīng)付各種環(huán)境變化的挑戰(zhàn)，但長時間的應(yīng)激則會損害人的身心健康。

隨著對應(yīng)激和應(yīng)激性疾病機(jī)制研究的深入，應(yīng)激動物模型也應(yīng)運(yùn)而生，在眾多動物模型中，束縛應(yīng)激作為一種非損傷性刺激，與人類身心性疾病的過程有相似性，因而日益引起人們的關(guān)注，逐漸成為應(yīng)激研究領(lǐng)域中的熱點之一。有研究證明，女性更容易受應(yīng)激相關(guān)的心理疾病影響，其發(fā)生率是男性的2倍，束縛應(yīng)激對雌性生殖功能的影響大部分都集中在妊娠期間，主要研究束縛應(yīng)激對母體以及后代的影響。雌性動物慢性暴露在應(yīng)激條件下，更能模擬日常生活中女性所受的應(yīng)激方式，因此有必要進(jìn)行詳細(xì)的研究。目前，BALB/c小鼠和C57BL/6J小鼠被廣泛地應(yīng)用于行為和遺傳學(xué)研究[7]。此次研究擬以8周齡BALB/c小鼠和C57BL/6J小鼠為研究對象，以急性（24h）以及慢性（8h/d，60d）束縛應(yīng)激為心理應(yīng)激模型，分別研究急性和慢性心理應(yīng)激對兩品系近交系小鼠的未經(jīng)產(chǎn)雌鼠的生理指標(biāo)、繁殖性能以及其后代焦慮行為的影響。

1心理應(yīng)激對雌性動物周期、排卵的影響

應(yīng)激可以引起人類、靈長類以及大鼠生殖功能發(fā)生改變。心理性應(yīng)激[8]、外部環(huán)境變化等條件[9]以及高強(qiáng)度運(yùn)動[10]都會導(dǎo)致人的經(jīng)期發(fā)生紊亂。對于大鼠，長期暴露在生理應(yīng)激條件下（強(qiáng)迫游泳、限制進(jìn)食、溫度應(yīng)激）會導(dǎo)致情期改變。束縛應(yīng)激是公認(rèn)的心理應(yīng)激模型。CMS（chronicmildstress）引起雌性大鼠情期紊亂，主要表現(xiàn)為周期延長，前期以及情期對大鼠進(jìn)行束縛應(yīng)激，周期紊亂持續(xù)時間最長，但是在性活動較弱期間或者后期應(yīng)激，大鼠可對應(yīng)激表現(xiàn)出一定的抵抗能力，而且周期紊亂持續(xù)的時間也較短。束縛應(yīng)激可破壞大鼠周期。Donadio研究了在前期當(dāng)天的不同時間處理對卵母細(xì)胞以及的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)早上10：00處理（束縛10min、1h或者乙醚處理1min），顯著降低了大鼠排卵數(shù)，但是對脊柱前凸商數(shù)（lordosisquotient：判斷雌性的指標(biāo)，用于大鼠指標(biāo)的研究）沒有影響，同時也降低了當(dāng)天晚些時候（18：00）的LH、孕酮以及催乳素水平。下午16：00處理對排卵數(shù)沒有影響，但是應(yīng)激1h顯著降低了脊柱前凸商數(shù)。

2心理應(yīng)激對雄性動物激素水平以及繁殖性能的影響

許多形式的應(yīng)激，包括心理應(yīng)激，都會影響雄性的繁殖力和生殖。自主神經(jīng)系統(tǒng)以及腎上腺激素參與經(jīng)典的應(yīng)激反應(yīng)，可以影響生殖系統(tǒng)。試驗證明，中度以及劇烈的情緒應(yīng)激會抑制睪酮水平，甚至還可能干擾男性發(fā)生。在動物的社會應(yīng)激中，外科手術(shù)以及制動應(yīng)激會影響體重、睪酮水平以及行為，對形態(tài)也產(chǎn)生可變的影響。給予妊娠大鼠應(yīng)激會影響雄性后代的發(fā)育和。對大鼠給予急性（16h）和慢性（16h*7d）束縛應(yīng)激，檢測血液中LH、FSH、睪酮、睪酮抑制素水平變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，應(yīng)激后LH水平顯著下降，慢性應(yīng)激后血液中睪酮含量下降的更顯著，但是，血液中FSH以及睪酮抑制素水平則不受影響。

3妊娠期間心理應(yīng)激

大多數(shù)關(guān)于應(yīng)激對生殖健康的研究都集中在妊娠期間，研究不同的應(yīng)激方案對妊娠結(jié)局以及后代的影響。婦女在妊娠期間受到應(yīng)激后，短期容易引起流產(chǎn)、產(chǎn)科并發(fā)癥、較低的胎兒初生重、嬰兒死亡率增加、生長發(fā)生異常以及性別比例失調(diào)，慢性則會導(dǎo)致后代情緒與認(rèn)知能力受到損傷。

對胎兒初生重的影響在女性，流行病學(xué)研究證明，妊娠期間應(yīng)激事件很可能引起流產(chǎn)或者難產(chǎn)、較低的胎兒初生重以及增加新生兒病理變化，妊娠期間應(yīng)激可導(dǎo)致胎兒早產(chǎn)和較低的胎兒體重。Lee等分別在妊娠的1～4d、5～8d、9～12d、13～16d對妊娠小鼠進(jìn)行束縛應(yīng)激，每天12h，妊娠第18h進(jìn)行剖腹產(chǎn)，對胎兒稱重和檢查形態(tài)缺陷。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，4d束縛應(yīng)激顯著降低了妊娠母鼠的體重，雖然終止應(yīng)激后體重能慢慢恢復(fù)，但是直到妊娠后期體重也沒有完全恢復(fù)；束縛應(yīng)激引起胎兒生長阻滯，體重顯著降低，增加了胚胎和胎兒的死亡率。1～4d、5～8d束縛對胚胎著床沒有影響，但是9～12d束縛則引起cleftpalate（兔唇），5～8d引起胎兒脊椎異常。大多數(shù)在胎兒器官發(fā)生期間進(jìn)行束縛應(yīng)激的研究發(fā)現(xiàn)，該階段應(yīng)激對胎兒初生重沒有影響。個別研究證明，束縛導(dǎo)致妊娠13d胎兒生長停滯；在妊娠18～20d束縛會降低子宮內(nèi)以及初生后雄性后代的生長性能，在妊娠前后用塑料管進(jìn)行13d束縛會降低每窩的平均初生重；在妊娠晚期進(jìn)行束縛并結(jié)合強(qiáng)光刺激會降低胎兒的初生重，特別是在妊娠晚期進(jìn)行束縛，如果限制采食將更可能影響胎兒的快速生長。

1978年，Barlow分別在大鼠妊娠9～11d、12～14d、15～17d、18～20d進(jìn)行束縛，每天束縛9h，連續(xù)束縛3d。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不論束縛發(fā)生在何時，初生后第1周以及第6周雄性后代體重均低于對照組。在隨后的試驗中，在妊娠18～20d進(jìn)行束縛，不論后代是否由對照母鼠飼養(yǎng)，體重均低于對照。Ward發(fā)現(xiàn)，初生前應(yīng)激的雄性后代雄性特征消失且呈現(xiàn)雌性化。她將妊娠最后1周的大鼠給予光熱束縛應(yīng)激，結(jié)果發(fā)現(xiàn)成年雄性后代行為下降，脊柱前凸能力增加。BeckhardtandWard在大鼠妊娠14～21d時給予光熱應(yīng)激，結(jié)果發(fā)現(xiàn)雌性后代情期、、妊娠、分娩以及幼仔成活、母性都沒有影響，妊娠晚期進(jìn)行束縛聯(lián)合強(qiáng)光應(yīng)激，雌性大鼠后代能正常繁殖。但是，也有報道稱妊娠期束縛會影響雌性后代的繁殖力。在試驗中，對妊娠14～22d的大鼠進(jìn)行每天3次、每次45min的束縛聯(lián)合強(qiáng)光，使得周圍溫度升高至34℃。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，1F代雌鼠繁殖力下降，妊娠周期延長，胎兒初生重下降，初生后存活率下降；睪酮在束縛應(yīng)激中對雌雄生殖力方面也有影響，妊娠后期束縛應(yīng)激會導(dǎo)致大鼠下降時間推遲[32]。妊娠晚期對小鼠束縛應(yīng)激研究較少。對于小鼠，妊娠期束縛聯(lián)合強(qiáng)光應(yīng)激可得到與大鼠一致的結(jié)果，增加雄性后代的脊柱前凸（雌性化），但是對行為沒有影響，對雄性后代繁殖能力影響還未見報道。在大鼠間期直到下個情期前進(jìn)行仰位制動應(yīng)激，每天2h，結(jié)果發(fā)現(xiàn)情期推遲，然而一旦情期到來發(fā)生則繁殖力沒有影響。成年大鼠妊娠前以及妊娠過程中給予慢性束縛應(yīng)激會導(dǎo)致妊娠期延長和較低的胎兒初生重。因此，有必要進(jìn)行詳細(xì)的研究，進(jìn)而確定妊娠前應(yīng)激對雌性生殖以及后代行為的影響。

41F代仔鼠焦慮行為水平

高架十字迷宮試驗就是利用動物對新環(huán)境的探究和對高懸開放臂的恐懼而形成的矛盾沖突狀態(tài)來反映動物的焦慮情緒，所以高架十字迷宮既可以建立非條件反射焦慮動物模型，也可以作為測量動物焦慮反應(yīng)的方法。大、小鼠的焦慮行