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微生物檢驗實驗室微球菌屬檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1.概述微球菌屬包括藤黃微球菌、玫瑰色微球菌、里拉微球菌、西宮微球菌、卡氏微球菌、活躍微球菌和易變微球菌等9個菌種。藤黃微球菌是微球菌屬中的代表種。2.標(biāo)本類型血液、尿液、痰、腦脊液、穿刺液、膿液等標(biāo)本。3.鑒定3.1形態(tài)與染色:革蘭陽性球菌,菌體比葡萄球菌大,單個、成雙、四聯(lián)排列或立體包裹狀不規(guī)則團(tuán)塊。3.2培養(yǎng)特性:藤黃微球菌在血瓊脂平板上菌落小于葡萄球菌,呈圓形、突起、光滑、不透明、黃色菌落;在營養(yǎng)瓊脂上菌落呈黃色。3.3生化反應(yīng):觸酶、氧化酶試驗陽性,膽汁七葉苷、精氨酸雙水解酶、枸櫞酸鹽和硝酸鹽還原試驗均為陰性。3.4鑒別要點3.4.1革蘭陽性球菌,菌體較大,菌落呈黃色,觸酶試驗陽性。3.4.2微球菌屬各菌種間的鑒別:見表5-323.4.3與葡萄球菌的鑒別:見表5-33表5-32微球菌屬各菌種的生物學(xué)特性生化反應(yīng)藤黃微球菌里拉微球菌易變微球菌玫瑰色微球菌活躍微球菌卡氏微球菌西宮微球菌不動微球菌鹽生微球菌色素黃乳白黃粉紅紅淺橙桔黃乳白無葡萄糖O/F--++-+V-+甘油-----+--+膽汁七葉苷----++---精氨酸-------+-硝酸鹽--++--V--37℃中生長++++-++++65g/L氯化鈉++++-+-++枸櫞酸鹽--+------動力----+----注:“+”為90%以上菌株陽性,“-”為90%以上菌株陰性,“V”為11%~89%菌株陽性。表5-33微球菌屬與葡萄球菌的鑒別方法微球菌葡萄球菌葡萄糖O/F氧化發(fā)酵氧化酶試驗+-桿菌肽試驗+-呋喃唑酮抑制試驗-+注:“+”為90%以上菌株陽性,“-”為90%以上菌株陰性,“V”為11%~89%菌株陽性。4.操作步驟4.1涂片染色觀察菌落特征,在血平板上挑取可以菌落,涂片染色鏡檢。4.2觸酶試驗陽性參見觸酶試驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程4.3鑒定從血平板上挑取純菌落,用微生物鑒定儀或傳統(tǒng)生化反應(yīng)進(jìn)行細(xì)菌4.4藥敏一般不需要做藥物敏感試驗。5.質(zhì)量控制參見《質(zhì)量控制程序》6.檢驗結(jié)果解釋與分析微球菌屬寄生于皮膚、黏膜、口咽部,在臨床標(biāo)本分離培養(yǎng)時注意與葡萄球菌相區(qū)別。7.臨床意義藤黃微球菌主要存在于泥土、水等外界環(huán)境,以及人和動物皮膚表面。一般不致病,但可為條件致病菌,引起傷口等局部組織感染。也能引起嚴(yán)重感染,如心內(nèi)膜炎等疾病。8.鑒定流程菌落觀察:圓形、黃色或白色菌落觀察:圓形、黃色或白色微球菌屬涂片染色:G-球菌,單個、成雙或四聯(lián)排列葡萄糖O/F試驗氧化型,氧化酶試驗+參考文獻(xiàn)[1]中國合格評定國家認(rèn)可委員會.CNAS-CL23:2008醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗領(lǐng)域的應(yīng)用說明.2008[2]周庭銀編著.《臨床微生物學(xué)診斷與圖解》.第二版.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,2007[3]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜主編.全國臨床檢驗操作規(guī)程.第三版.南京:東南大學(xué)出版社,2006[4]MurrayPR.ManualO/FClinicalMircrobilogy.9thed.Washington:ASMPress,2007[5]ISO15189:2007醫(yī)學(xué)實驗室-
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