小薊中黃酮類成分的分離與鑒定

小薊中黃酮類成分的分離與鑒定

小鯊魚是薔薇科植物科的一個(gè)種類，通常被稱為刺頂芽和刺兒菜。它通常被用作中國人民的蔬菜，并深受人們喜愛。作為藥食兩用的野生植物資源,小薊分布于我國大部分地區(qū),在東亞和歐洲等地區(qū)亦有廣泛分布1儀器、試藥和儀器Waters600-2487高效液相色譜儀;NICOLET5700傅立葉紅外光譜儀;UV/Vis916紫外-可見分光光度計(jì);GC9790氣相色譜儀;400兆Bruker核磁共振儀;ThermoTraceDSQⅡ氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀等重要儀器。SephadexLH-20(Pharmacia公司生產(chǎn));柱色譜硅膠(160~200目,200~300目)和薄層色譜硅膠GF小薊藥材于2013年10月采自河南省西峽縣,其原植物經(jīng)南陽師范學(xué)院柳文敏教授鑒定為菊科植物小薊C.setosum。樣品標(biāo)本(No.NNU-201310)保存于南陽師范學(xué)院化學(xué)與制藥工程學(xué)院藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室。2降血糖活性的測(cè)定取干燥小薊全草13.0kg,用95%乙醇回流提取3次,每次2h,合并濾液,減壓濃縮得稠膏1.2kg?？偝砀嘤蒙倭克鞈液?依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,分別得到石油醚萃取物104.5g,乙酸乙酯萃取物188.4g,正丁醇萃取物268.2g。運(yùn)用PTP1B抑制劑高通量篩選模型對(duì)上述萃取物進(jìn)行篩選,結(jié)果表明乙酸乙酯萃取部位具有較好的降血糖活性,其IC取乙酸乙酯萃取物(188.4g)與同量的正相硅膠(200~300目)拌勻,進(jìn)行柱色譜分離,采用石油醚-丙酮(10∶1,6∶1,3∶1,1∶1,1∶5)洗脫。分別得到流分Ⅰ(16.63g),Ⅱ(28.50g),Ⅲ(45.78g),Ⅳ(37.40g),Ⅴ(12.33g)。將流分Ⅱ繼續(xù)用正相硅膠柱色譜(160~200目)進(jìn)行分離,用石油醚-丙酮(8∶1~5∶1)進(jìn)行洗脫,得到單體化合物3(10.24mg),4(11.02mg),6(9.20mg),8(11.89mg)。反復(fù)采用硅膠和SephadexLH-20柱色譜對(duì)流分Ⅲ進(jìn)行分離,得到單體化合物1(8.35mg),2(10.45mg),5(13.21mg),7(8.78mg),10(9.25mg),11(11.54mg)。同樣方法,從流分Ⅳ中分離得到單體化合物9(8.35mg),12(10.45mg),13(13.21mg),14(11.35mg),15(8.69mg)。3結(jié)構(gòu)評(píng)價(jià)黃色晶體,mp233.6~234.5℃,ESI-MSm/z323.1[M+Na]4蛋白質(zhì)酪氨酸酶ptp1b的抑制作用將分離得到的15個(gè)黃酮類化合物分別溶解于DMSO(二甲基亞砜)中,加入PBS(磷酸鹽緩沖溶液),使其濃度為20μmol·L化合物1黃色晶體,mp254.1~256.0℃,ESI-MSm/z337.2[M+Na]2化合物2淺黃色固體,mp267.5~268.6℃,ESI-MSm/z485.3[M+Na]3-化合物3淺黃色固體,mp229.4~230.8℃,ESI-MSm/z455.4[M+Na]4-化合物4黃色固體,mp274.6~275.8℃,ESI-MSm/z309.2[M+Na]5化合物黃色固體,mp258.1~259.4℃,ESI-MSm/z643.2[M+Na]化合物6淡黃色固體,mp257.0~258.6℃,ESI-MSm/z341.3[M+Na]esi-msm/z33.1.1.3淡黃色固體,mp298.3~299.5℃,ESI-MSm/z503.4[M+Na]黃色固體,mp233.5~235.8℃,ESI-MSm/z337.3[M+Na]黃色固體,mp232.6~234.5℃,ESI-MSm/z353.1[M+Na]黃色固體,mp278.2~279.6℃,ESI-MSm/z339.2[M+Na]黃色固體,mp207.6~209.1℃,ESI-MSm/z351.1[M+Na]黃色固體,mp233.2~235.0℃,ESI-MSm/z351.3[M+Na]黃色固體,mp236.8~237.6℃,ESI-MSm/z