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細(xì)胞DNA倍體定量分析——能更早發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞
405醫(yī)院病理科陳為國1.細(xì)胞DNA倍體定量分析1.癌癥不可怕,就怕發(fā)現(xiàn)晚!2.癌癥不可怕,就怕發(fā)現(xiàn)晚!2.細(xì)胞學(xué)的發(fā)展活檢、尸檢和細(xì)胞學(xué)是病理學(xué)的三大分支細(xì)胞學(xué)有取材方便,痛苦小或無痛苦的先天優(yōu)勢過去,由于細(xì)胞學(xué)診斷準(zhǔn)確率低,一直不太受重視,后來由于制片技術(shù)不斷改進(jìn),新技術(shù)、新方法的不斷涌現(xiàn),特別是液基細(xì)胞制片技術(shù)的出現(xiàn),細(xì)胞學(xué)近幾年有了翻天覆地的變化。目前除了傳統(tǒng)細(xì)胞學(xué),還出現(xiàn)了流式細(xì)胞學(xué)、穿刺細(xì)胞學(xué)、細(xì)胞免疫組織化學(xué)、細(xì)胞DNA倍體定量分析等新的診斷技術(shù)。3.細(xì)胞學(xué)的發(fā)展活檢、尸檢和細(xì)胞學(xué)是病理學(xué)的三大分支3.4.4.宮頸液基制片5.宮頸液基制片5.什么是細(xì)胞DNA倍體定量分析系統(tǒng)?它是由加拿大BC腫瘤實(shí)驗(yàn)室研發(fā)的能夠準(zhǔn)確測量細(xì)胞核內(nèi)DNA倍體含量的檢測系統(tǒng)。是細(xì)胞學(xué)中一種新的診斷方法。它主要用于篩查早期癌及癌前病變。6.什么是細(xì)胞DNA倍體定量分析系統(tǒng)?它是由加拿大BC腫瘤實(shí)驗(yàn)室DNA倍體定量分析原理雙鏈DNA纏繞成染色體7.DNA倍體定量分析原理雙鏈DNA纏繞成染色體7.正常人細(xì)胞核內(nèi)均有23對染色體,即二倍體。8.正常人細(xì)胞核內(nèi)均有23對染色體,即二倍體。8.細(xì)胞的癌變過程DNA改變在前,細(xì)胞形態(tài)改變在后液基和DNA都-液基-,DNA+液基和DNA都+9.細(xì)胞的癌變過程DNA改變在前,細(xì)胞形態(tài)改變在后液基和DNA都癌變細(xì)胞核內(nèi)染色體數(shù)量發(fā)生異常改變DNA倍體>510.癌變細(xì)胞核內(nèi)染色體數(shù)量發(fā)生異常改變DNA倍體>510.*正常細(xì)胞(即DNA二倍體細(xì)胞,2C細(xì)胞)及腫瘤細(xì)胞在生長增殖時,細(xì)胞核內(nèi)DNA結(jié)構(gòu)及含量都會發(fā)生變化。正常細(xì)胞增殖周期DNA倍體的改變在2C-4C之間。*炎癥也可以引起細(xì)胞DNA含量增加,但一般<5C。*而腫瘤細(xì)胞DNA含量?!?C。*有些腫瘤DNA倍體不發(fā)生變化,仍然是二倍體,比如某些白血病和鼻咽癌,這些腫瘤用DNA倍體分析的方法檢查不出來*我們發(fā)現(xiàn)乳腺小管癌也是陰性。11.*正常細(xì)胞(即DNA二倍體細(xì)胞,2C細(xì)胞)及腫瘤細(xì)胞在生長增自動掃描12.自動掃描12.分析結(jié)果13.分析結(jié)果13.生成報(bào)告14.生成報(bào)告14.15.15.出現(xiàn)細(xì)胞DNA倍體異常情況:
腫瘤:基因改變病毒感染:DNA病毒整合放療和維生素B12缺乏16.出現(xiàn)細(xì)胞DNA倍體異常情況:腫瘤:基因只要>5C就是癌細(xì)胞嗎?顯然不是,因?yàn)檫€有病毒感染,放療等也可以有>5C的細(xì)胞。排除以上干擾因素,只有>5C的細(xì)胞在兩個以上才考慮腫瘤。研究認(rèn)為排除干擾因素,>9C的細(xì)胞,就可以認(rèn)為是癌細(xì)胞17.只要>5C就是癌細(xì)胞嗎?顯然不是,因?yàn)檫€有病毒感染,放療等也小結(jié)少量>5C的細(xì)胞(1~2個),不能肯定是腫瘤,需要觀察,并定期復(fù)查。排除干擾因素,只要有>9C的細(xì)胞,就要考慮癌。陰性不能完全排除癌(有少數(shù)二倍體腫瘤)。18.小結(jié)少量>5C的細(xì)胞(1~2個),不能肯定是腫瘤,需要觀察,常規(guī)細(xì)胞學(xué)與細(xì)胞DNA定量分析敏感性和特異性的比較敏感性:DNA>液基特異性:液基>DNA兩者結(jié)合效果更佳19.常規(guī)細(xì)胞學(xué)與細(xì)胞DNA定量分析敏感性:DNA>液基特異性:液細(xì)胞學(xué)篩查制片技術(shù)診斷敏感性比較20.細(xì)胞學(xué)篩查制片技術(shù)診斷敏感性比較20.DNA定量分析在癌癥普查中的優(yōu)勢21.DNA定量分析在癌癥普查中的優(yōu)勢21.細(xì)胞DNA定量分析應(yīng)用范圍表面刮取標(biāo)本涂片:例如陰道、宮頸、口腔、肛管、鼻咽部、眼結(jié)膜、體表病灶潰瘍面等處。分泌物或排泄物涂片:例如痰液、尿液、前列腺液、肛腸膿血排泄物、腫瘤之漏管分泌物、乳頭溢液等。體表、體部和體腔內(nèi)和液體或腫瘤實(shí)體的針吸穿刺檢查:例如胸腔、腹腔、四肢、軀干、肺、肝脾、腎等器官。內(nèi)鏡直視下的刷片和組織印片:例如食管、胃、支氣管、泌尿道、結(jié)腸、直腸等。22.細(xì)胞DNA定量分析應(yīng)用范圍表面刮取標(biāo)本涂片:例如陰道、宮頸、其他應(yīng)用腫瘤預(yù)后:已經(jīng)確診的惡性腫瘤,可以用DNA倍體分析來判斷腫瘤的預(yù)后。二倍體腫瘤的預(yù)后要好于非整倍體腫瘤。腫瘤惡性程度判斷:非整倍體腫瘤惡性程度高23.其他應(yīng)用腫瘤預(yù)后:已經(jīng)確診的惡性腫瘤,可以用DNA倍體分析來DNA倍體分析系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)總結(jié)電腦全自動掃描,自動對焦,準(zhǔn)確識別每一個細(xì)胞,不容易遺漏。每一個視野、每一個細(xì)胞都有詳細(xì)記錄,每個細(xì)胞都標(biāo)有DNA含量數(shù)值。每個細(xì)胞都能準(zhǔn)確定位,方便進(jìn)行人工復(fù)查。每個細(xì)胞都有78個特征值,全面而精確。比傳統(tǒng)細(xì)胞學(xué)發(fā)現(xiàn)癌或癌前病變更早。24.DNA倍體分析系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)總結(jié)電腦全自動掃描,自動對焦,準(zhǔn)確識DNA倍體分析系統(tǒng)的缺點(diǎn)總結(jié)1、無法觀察整個細(xì)胞的形態(tài),所以不能區(qū)分腫瘤的具體類型。2、無法識別真菌、滴蟲、細(xì)菌、病毒等致病微生物。3、有些二倍體腫瘤檢測不出來,所以陰性不能完全排除腫瘤。4、容易受病毒、放療等干擾。25.DNA倍體分析系統(tǒng)的缺點(diǎn)總結(jié)25.篩查癌細(xì)胞的黃金組合液基細(xì)胞+DNA倍體定量分析26.篩查癌細(xì)胞的黃金組合26.正常27.正常27.我院病例28.我院病例28.————29.————29.30.30.————31.————31.32.32.————33.————33.34.34.————35.————35.36.36.當(dāng)宮頸液基細(xì)胞學(xué)診斷為ASCUS時,DNA倍體分析就能很好的區(qū)分是反應(yīng)性的還是腫瘤性的。從而給臨床醫(yī)生的下一步處理提供了依據(jù)。37.當(dāng)宮頸液基細(xì)胞學(xué)診斷為ASCUS時,DNA倍體分析就能很好的細(xì)胞DNA和HPV病毒DNA檢查前者是檢測人體細(xì)胞核內(nèi)的DNA含量的后者是檢測HPV病毒的細(xì)胞DNA陽性,并且液基發(fā)現(xiàn)Hsil提示腫瘤存在,需要臨床干預(yù)高危型HPVDNA+,也只能說明病毒感染,大部分能自我清除,不發(fā)展成宮頸癌,只有少數(shù)持續(xù)感染者才能發(fā)展成癌所以高危型HPVDNA+,不能盲目處理,要結(jié)合液基細(xì)胞的情況酌情處理。38.細(xì)胞DNA和HPV病毒DNA檢查前者是檢測人體細(xì)胞核內(nèi)的DN——————39.——————39.宮頸管腺癌40.宮頸管腺癌40.————41.————41.42.42.——————43.——————43.44.44.——————45.——————45.46.46.下面是一些網(wǎng)上的病例47.下面是一些網(wǎng)上的病例47.漿膜腔積液
A007
腹水48.漿膜腔積液
A007
腹水48.肺部組織印片
136297
KY015
肺癌49.肺部組織印片
136297
KY015
肺癌49.甲狀腺組織印片
294374
KY016
甲狀腺乳頭狀癌50.甲狀腺組織印片
294374
KY016
甲狀腺乳頭狀癌50乳腺組織印片
362528
KY018乳腺小葉癌51.乳腺組織印片
362528
KY018乳腺小葉癌51.拇指腫物印片
136369KY019
惡黑
52.拇指腫物印片
136369KY019
惡黑
52.刮宮組織
印片
KY051
53.刮宮組織
印片
KY051
5
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