小柴胡湯對肺炎鏈球菌感染模型動物的治療作用

小柴胡湯對肺炎鏈球菌感染模型動物的治療作用

發(fā)燒是臨床上常見的癥狀。引起發(fā)燒的原因很多，治療方法也很復雜。小柴胡湯源于張仲景所創(chuàng),療效肯定,應用廣泛,被歷代奉為經(jīng)典,目前仍是臨床使用概率最高的方劑之一。文獻記載,小柴胡湯主治病癥中,以發(fā)熱最多。有作者調(diào)查了1984-2002年間關于小柴胡湯治療發(fā)熱的報道,顯示小柴胡湯所治療的發(fā)熱以高熱居多,適合疾病種類廣泛,其中感染性發(fā)熱較多,同時對非感染性發(fā)熱(包括癌性發(fā)熱、免疫系統(tǒng)等引起的發(fā)熱)和不明原因發(fā)熱亦有效。為進一步了解小柴胡湯抗感染、解熱作用及其可能的機理,筆者復制動物感染及發(fā)熱模型,觀察其對細菌感染及內(nèi)毒素誘導發(fā)熱實驗動物的影響。1材料和方法1.1動物、藥品和試劑實驗動物健康昆明小鼠45只,體重18~22g,雌雄各半;健康SD大鼠30只,體重220~250g,雌雄各半,我院動物中心提供。在室溫(20±2)℃環(huán)境下飼養(yǎng),光照12h。1.1.2藥品和試劑小柴胡湯(柴胡12g,黃芩9g,半夏9g,生姜9g,人參9g,甘草6g,大棗9g),由我院中藥房提供。肺炎鏈球菌、大腸埃希菌內(nèi)毒素,均購自中國藥品生物制品檢定所。1.2實驗方法1.2.1中藥生藥試驗小柴胡湯及板藍根按常規(guī)由本院中藥制劑室協(xié)助配制,制成水溶液,經(jīng)55.16kPa高壓蒸汽滅菌后備用,試驗時稀釋濃度為每毫升含中藥生藥1g。1.2.2分組及研究方法小鼠在實驗前適應環(huán)境飼養(yǎng)3d后,隨機分為小柴胡湯組、板藍根組、模型對照組,每組各15只。各組小鼠腹腔注射最小致死劑量的肺炎鏈球菌菌液(15×109CFU/ml),小柴胡湯及板藍根組分別灌胃中藥(用量相當于成人臨床有效劑量的10倍),模型對照組灌胃等量蒸餾水,連續(xù)給藥7d,1次/d,記錄動物死亡數(shù)。1.2.3基礎體溫測定大鼠適應環(huán)境飼養(yǎng)3d后,合格大鼠(1d內(nèi)間隔1h連續(xù)兩次測得肛溫變化≤0.3℃,連續(xù)3d)隨機分為小柴胡湯組、板藍根組、模型對照組,每組各10只。實驗前10h開始禁食,排空直腸后測肛溫兩次,每次間隔1h,取平均值作為基礎體溫。各組大鼠實驗當天均腹腔注射大腸埃希菌內(nèi)毒素溶液10EU/kg,小柴胡湯及板藍根組分別灌胃中藥(劑量同前),模型對照組灌胃等量蒸餾水,分別于給藥后1、2、3、4、6、8h測肛溫,比較各測點大鼠體溫變化情況,計算各組大鼠體溫最高溫差ΔT(發(fā)熱時體溫與基礎體溫的差值)。1.2.4統(tǒng)計方法計量資料采用t檢驗,記數(shù)資料采用χ2檢驗,統(tǒng)計資料由SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行分析。2小柴胡湯對小鼠致病性的影響2.1小柴胡湯對肺炎鏈球菌感染小鼠的保護作用小柴胡湯和板藍根沖劑對肺炎鏈球菌所致小鼠感染均有一定的保護作用,可顯著降低感染小鼠的死亡率(P<0.05);小柴胡湯組死亡數(shù)少于板藍根組,但中藥組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表1。2.2小柴胡湯對LPS致大鼠發(fā)熱的影響小柴胡湯和板藍根沖劑均能抑制LPS所致大鼠體溫的升高,與對照組比較在不同時間點差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),小柴胡湯組降溫效果略優(yōu)于板藍根組,但中藥組間差異無統(tǒng)計學意義,見表2。3小柴胡湯的臨床應用感染性疾病是臨床幾大常見疾病之一,嚴重危害人類的生命和健康?？咕幬锏某霈F(xiàn)與應用在預防和治療感染性疾病方面發(fā)揮了巨大的作用,但同時抗菌藥物的濫用也帶來了嚴重的問題,如越來越多細菌耐藥及抗菌藥物不良反應。中醫(yī)藥是我國傳統(tǒng)醫(yī)學的寶庫,中藥制劑在感染性疾病治療方面有著特殊的優(yōu)勢。許多中藥制劑同時具有抗菌、抗病毒及提高免疫等多重功效,臨床療效好、不良反應小。小柴胡湯出自《傷寒論》,原文記載:“少陽之為病,口苦,咽干,目眩也?！?“傷寒五六日,中風,往來寒熱,胸脅苦滿,嘿嘿不欲飲食,心煩喜嘔,……小柴胡湯主之”;“傷寒中風,有柴胡證,但見一證便是,不必悉具”。明確了小柴胡湯臨床應用的要領,既用于邪入少陽,居于半表半里。方中柴胡為君,宣散透邪,使邪從太陽而解;黃芩為臣,清熱燥濕,瀉火除煩,清半里之邪;二藥合用,既能宣透清解半表半里之邪,又能使氣機升降復常;半夏降逆止嘔;姜、棗調(diào)和營衛(wèi),甘草調(diào)和藥性;邪入少陽,兼有正氣不足,故以人參扶正。通過治療宣透疏泄,使氣機外達,邪從太陽而解;清熱利膽,以絕邪入陽明之路;補脾益氣,升清降濁,防止邪犯太陰,而有氣機壅滯之變。全方寒溫并用,升降協(xié)調(diào),有疏利三焦,調(diào)達上下,宣通內(nèi)外之功。小柴胡湯臨床應用廣泛,涉及到內(nèi)、外、婦、兒各科疾病,其中以發(fā)熱性疾病居多,包括感染性發(fā)熱,也包括非感染性發(fā)熱,對于治療細菌性及病毒性高熱,小柴胡湯療效較好,有報道2d治愈率可約達85%;對不明原因性和疑難性發(fā)熱亦有明顯療效。現(xiàn)代藥理研究也顯示柴胡、黃芩有顯著的抗炎及抗病毒作用,柴胡對感冒病毒、肝炎病毒及牛痘病毒等多種病毒有抑制作用;黃芩能增強白細胞和網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能,對多種細菌有明顯的抑制效果。內(nèi)毒素是革蘭陰性菌細胞壁外膜中的脂多糖(LPS)成分,是效應性很強的細菌致熱原,微量LPS就能引起劑量依賴性發(fā)熱,其發(fā)熱是由血液循環(huán)中內(nèi)生致熱原(EP)所介導的,LPS激活單核巨噬細胞,誘生EP釋放入血,因此在藥效學中常用于觀察發(fā)熱的病機及藥物療效。中醫(yī)對內(nèi)毒素早期臨床表現(xiàn)常辯證為實熱,認為內(nèi)毒素是“熱毒”的物質(zhì)基礎。板藍根為常用的清熱解毒中藥,廣泛用于多種感染性疾病,并被報道有抗內(nèi)毒素作用。為了解小柴胡湯體內(nèi)抗感染及解熱作用,本研究以肺炎鏈球菌為感染源、內(nèi)毒素為發(fā)熱致熱原,板藍根為陽性對照,觀察了小柴胡湯對內(nèi)毒素誘導大鼠發(fā)熱的抑制效果及肺炎鏈球菌感染小鼠的保護作用,發(fā)現(xiàn)小柴胡湯有較好的抗感染及