豬瘟的診斷與防治

豬瘟的診斷與防治

豬瘟疫（hc）也被稱為經(jīng)典豬瘟疫（csf），是由豬充血病毒（csfv）引起的高度接觸性熱性傳染病。以出血和發(fā)熱為主要特征,并引起妊娠母豬流產(chǎn)、胎兒畸變、慢性營(yíng)養(yǎng)性消耗、淋巴細(xì)胞和血小板減少等免疫系統(tǒng)受損、繼發(fā)或并發(fā)細(xì)菌或其他病毒感染等臨床表現(xiàn),呈急性或慢性經(jīng)過(guò),是一種對(duì)豬危害性極大的傳染病,1984年被國(guó)際獸疫局(OIE)列為A類動(dòng)物傳染病。盡管每年我國(guó)都投入大量的人力、物力進(jìn)行豬瘟疫病的防疫和科研工作,使該病得到了較大程度的控制,但由于種種原因,近年來(lái)仍有豬瘟發(fā)生。因此,如何提高豬瘟免疫效果,是當(dāng)前獸醫(yī)工作者需要解決的重點(diǎn)課題。本文就豬瘟疫苗免疫程序研究進(jìn)展作簡(jiǎn)要概述,以期為豬瘟的最終控制和消滅提供理論依據(jù)。1免豬合并重免疫后抗體檢測(cè)結(jié)果目前國(guó)內(nèi)還沒(méi)有統(tǒng)一的CSF免疫程序。多數(shù)豬場(chǎng)采用,仔豬育肥豬20～28日齡首免和60～70日齡二免,種豬每年2次免疫的免疫程序(母豬的免疫應(yīng)避開(kāi)配種和妊娠期,以免引起胎盤(pán)感染)。林毅等采用DotELISA檢測(cè)豬瘟母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律和4種豬瘟免疫程序。1)超前一次免疫組:新生仔豬在吃初乳前接種2頭份豬瘟單價(jià)疫苗,注苗后1h讓其吃初乳。2)超前二次免疫組:按超前一次免疫后,45日齡用2頭份三聯(lián)苗加強(qiáng)免疫。3)20日齡首免2頭份豬瘟單價(jià)苗,60日齡二免2頭份三聯(lián)苗組。4)28日齡首免豬瘟單價(jià)苗,70日齡二免三聯(lián)苗,分為1和2頭份免疫組)的免疫效果。結(jié)果,在7、14、21、28和35日齡時(shí),豬瘟母源抗體陽(yáng)性率分別為80.0%、60.0%、33.3%、13.4%和6.7%,其抗體效價(jià)幾何平均值(GMT)分別為1∶88、1∶69、1∶59、1∶40和1∶35。4種免疫程序的豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果為,超前一次免疫和超前二次免疫2倍量豬瘟單價(jià)苗,在6月齡時(shí),其抗體陽(yáng)性率分別為85%和80%,GMT分別為1∶105和1∶85。20日齡首免2倍量豬瘟單價(jià)苗后,60日齡二免2倍量豬瘟豬肺疫豬丹毒三聯(lián)苗,在60日齡和6月齡時(shí),抗體陽(yáng)性率分別為90.0%和87.0%,GMT分別為1∶135和1∶103.28日齡首免豬瘟單價(jià)苗,70日齡加免三聯(lián)苗,免疫1和2頭份組在65日齡時(shí),陽(yáng)性率分別為78.0%和92.0%,6月齡時(shí)分別為73.0%和86.0%。結(jié)果表明,免疫2頭份比1頭份的效果好,4種免疫程序的效果都較理想。吳楚泓在廣東廣三保養(yǎng)豬公司的試驗(yàn)結(jié)果表明,在無(wú)豬瘟流行的地區(qū),仔豬在65日齡時(shí)進(jìn)行一次性大劑量(5頭份)免疫,抗體有效效價(jià)高于2次免疫豬(35日齡首免3頭份;65日齡二免5頭份),與2次免疫相比,既節(jié)省免疫費(fèi)用,又可獲得較好的免疫保護(hù)力。蔡葵蒸等試驗(yàn)指出,在豬瘟威脅區(qū),免疫母豬所產(chǎn)仔豬以28日齡首免4頭份疫苗,55日齡二免2頭份疫苗的免疫程序效果較為可靠。2免疫工程的科學(xué)研究2.1豬模型免疫的研究乳前免疫也稱零時(shí)免疫、超前免疫(簡(jiǎn)稱“超免”),即仔豬出生后去除體表黏液,頸側(cè)消毒后肌肉注射豬瘟兔化弱毒苗,與母豬隔離一段時(shí)間后再吃初乳的免疫方法。這種免疫方法最早是法國(guó)學(xué)者Coitheier于1979年提出的。他認(rèn)為初生仔豬在吮乳前注射豬瘟兔化弱毒苗可以產(chǎn)生主動(dòng)免疫。原因有三:1)豬的免疫系統(tǒng)發(fā)育早,仔豬出生時(shí)免疫系統(tǒng)已相當(dāng)成熟。2)對(duì)仔豬吮乳后得到的母源抗體水平進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)吃乳后3h,仔豬血液中已可檢出母源抗體,6～12h母源抗體的含量達(dá)到高峰。所以在血液中母源抗體達(dá)到峰值前進(jìn)行免疫,可使疫苗毒在仔豬體內(nèi)有足夠的時(shí)間增殖而不被血液中的母源抗體中和。3)豬瘟兔化弱毒株對(duì)仔豬安全、無(wú)殘毒。同期法國(guó)及中國(guó)臺(tái)灣的實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了Coitheier的上述觀點(diǎn)。乳前免疫的一般做法是仔豬出生后肌肉注射豬瘟疫苗1頭份、2～4h后吃初乳。關(guān)于乳前免疫的主要爭(zhēng)論在于注射疫苗后吃初乳的時(shí)間問(wèn)題。衣翠玲試驗(yàn)結(jié)果表明,初生仔豬接種疫苗后間隔60～120min吸吮初乳的免疫效果最好。羅才文等將仔豬出生后立即與母豬隔開(kāi),肌肉注射豬瘟疫苗1頭份,注苗后2h哺初乳;對(duì)照組注射1mL生理鹽水。超前免疫組仔豬,發(fā)生豬瘟的68頭,發(fā)病率為6.48%,死亡仔豬44頭,死亡率為4.20%。對(duì)照組仔豬,發(fā)生豬瘟87頭,發(fā)病率為78.37%,死亡仔豬69頭,死亡率為62.16%。超前免疫組發(fā)病率比對(duì)照組下降71.89個(gè)百分點(diǎn);仔豬死亡率比對(duì)照組下降57.96個(gè)百分點(diǎn)。超前免疫組仔豬育成率為95.80%,對(duì)照組仔豬育成率為37.84%,育成率免疫組比對(duì)照組高出57.96個(gè)百分點(diǎn)。仔豬斷乳平均體重,免疫組比對(duì)照組高出1.4kg。張銀河等奶前60min接種豬瘟疫苗的仔豬20日齡時(shí)其抗體陽(yáng)性檢出率最高(91.6%);其次是奶前30min接種豬瘟疫苗的仔豬陽(yáng)性率為55.5%;而90min接種豬瘟疫苗的仔豬陽(yáng)性率最低。認(rèn)為新生仔豬進(jìn)行豬瘟超前免疫時(shí),應(yīng)選擇在接種后60min吃初乳為最佳時(shí)間。顧春海等認(rèn)為仔豬超免豬瘟疫苗1頭份、0.5h之后吃初乳的效果好;于泰等進(jìn)行的超免研究發(fā)現(xiàn):仔豬注射豬瘟兔化弱毒苗1頭份、3h后吃初乳的免疫方法,對(duì)仔豬豬瘟的保護(hù)長(zhǎng)達(dá)1年。早期的超免研究多認(rèn)為一次超免即可提供對(duì)豬瘟的終生保護(hù)。林毅等在超前免疫后180d,檢測(cè)豬瘟抗體的陽(yáng)性率為85%,據(jù)此他認(rèn)為一次超免可保證絕大多數(shù)豬出欄。但許多學(xué)者認(rèn)為這種做法是危險(xiǎn)的。因?yàn)橐坏┴i群中存在豬瘟強(qiáng)毒,將會(huì)迅速增殖蔓延,造成惡果。近年來(lái)的實(shí)踐越來(lái)越支持加大超免劑量和進(jìn)行加強(qiáng)免疫的免疫方法。何存利等進(jìn)行了仔豬豬瘟免疫程序的研究。他們建立在乳前免疫方法是:初生仔豬注苗2頭份,2h后放回母豬身邊吃乳。實(shí)驗(yàn)表明,150日齡時(shí)超免仔豬血清陽(yáng)性率僅73.68%,已不能對(duì)豬群提供全保護(hù)。在豬瘟疫區(qū)和受威脅區(qū),采取乳前免疫和常規(guī)免疫相結(jié)合的方式,才能確保豬群免遭豬瘟侵襲。他們還發(fā)現(xiàn),通過(guò)加大免疫劑量來(lái)中和殘余母抗的方法,常規(guī)免疫就能起到很好的效果;張曹民也認(rèn)為只要解決好母源抗體干擾的問(wèn)題,不必在所有的豬場(chǎng)都施行超前免疫;朱建國(guó)等的實(shí)驗(yàn)也支持超前免疫后進(jìn)行加強(qiáng)免疫的做法,他們認(rèn)為首免為超免、二免在30～35日齡的豬瘟免疫程序在豬瘟流行區(qū)切實(shí)可行;王紅寧等在四川南充、內(nèi)江和成都等地規(guī)?；i場(chǎng)的實(shí)驗(yàn)表明,超前免疫預(yù)防豬瘟的效果良好,他們推薦的免疫程序?yàn)?超前免疫2頭份,6月份加強(qiáng)免疫1次。此外,胡薛英、郭金海、王世權(quán)等均有超前免疫后需做2次免疫的報(bào)道。2.2血清學(xué)和免疫豬近年來(lái),豬瘟兔化弱毒口服免疫的研究日趨增多?？诜庖呖梢詷O大地減少豬瘟免疫的工作強(qiáng)度,使用簡(jiǎn)便。Chenut等等利用C株口服免疫家豬、野豬、綿羊、家兔及野兔,結(jié)果家豬免后4d扁、脾、淋巴結(jié)、胸腺、糞及尿中分離不到病毒,3周血清學(xué)陽(yáng)轉(zhuǎn),免疫后6周攻毒,能完全保護(hù)強(qiáng)毒攻擊;7/8野豬免后血清抗體陽(yáng)性,扁和脾分離不到病毒;綿羊接種后不表現(xiàn)臨床癥狀,血清抗體陰性;家兔接種后表現(xiàn)輕度熱反應(yīng);野兔則無(wú)癥狀;家兔和野兔二者有少數(shù)表現(xiàn)血清學(xué)抗體陽(yáng)性。Kaden等以C株對(duì)斷奶仔豬進(jìn)行口服免疫,結(jié)果進(jìn)行大劑量Koslov強(qiáng)毒株攻擊的免疫豬死亡;3/5進(jìn)行小劑量Alfort187強(qiáng)毒株攻擊的免疫豬存活,血清抗體陽(yáng)性,但從鼻腔排毒,其中4只豬表現(xiàn)瞬時(shí)病毒血癥;而所有進(jìn)行MV140/Riems低毒力毒株的免疫豬均存活,表現(xiàn)短時(shí)病毒血癥,均有抗體,但所有存活豬體內(nèi)均無(wú)CSFV或CSFVRNA。同年Soos等報(bào)道以C株在分娩前167～217d口服免疫母豬,結(jié)果所有3周齡及80%6周齡仔豬中和抗體滴度為1∶40、25%、10周齡仔豬中和抗體滴度達(dá)到1∶20,所有仔豬ELISA抗體檢測(cè)均為陽(yáng)性。2.3豬私免疫試驗(yàn)結(jié)果除了免疫時(shí)間以外,免疫劑量也是影響免疫效果的一個(gè)重要因素。近年來(lái),按照常規(guī)劑量免疫,抗體效價(jià)低,維持時(shí)間短,有些地方和豬場(chǎng)采用2頭份、4頭份,甚至6頭份劑量免疫,以達(dá)到較好的免疫。采用大劑量豬瘟疫苗接種可以在最短的時(shí)間內(nèi)激發(fā)機(jī)體的免疫防御系統(tǒng),從而對(duì)抗病原的進(jìn)一步侵入。丁國(guó)華等在室內(nèi)、室外分別對(duì)豬接種不同劑量的豬瘟弱毒疫苗和牛睪丸細(xì)胞苗,免疫期106～130d攻擊石門(mén)系豬瘟強(qiáng)毒,室內(nèi)接種組攻毒結(jié)果為:豬瘟乳兔苗頭劑量0.5mL150個(gè)免疫量,保護(hù)率100%(5/5);頭劑量1.0mL150個(gè)免疫量,保護(hù)率100%(5/5);頭劑量1.0mL300個(gè)免疫量,保護(hù)率100%(4/4);牛睪丸細(xì)胞苗頭劑量0.5mL300個(gè)免疫量,保護(hù)率100%(4/4);室外接種組攻毒結(jié)果為:豬瘟乳兔苗頭劑量0.5mL150個(gè)免疫量,保護(hù)率25%(1/5);頭劑量1.0mL150個(gè)免疫量,保護(hù)率80%(4/5);攻毒對(duì)照豬發(fā)病4/4,死亡3/4。試驗(yàn)證明室外接種0.5mL150個(gè)免疫量,保護(hù)率極低。張須莊等通過(guò)不同劑量豬瘟疫苗抗體檢測(cè)試驗(yàn)研究認(rèn)為強(qiáng)化母豬豬瘟免疫,于配種前7～15d肌注4～5頭份豬瘟細(xì)胞苗,才能保護(hù)仔豬在哺乳期的安全。仔豬應(yīng)在20～25日齡防疫注射3～4頭份量豬瘟細(xì)胞苗,必要時(shí)2月后再加強(qiáng)免疫一次。蔣冬福等用70日齡未免豬,無(wú)母源抗體干擾且免疫系統(tǒng)已近成熟,然而用生理鹽水稀釋組免疫后3周豬瘟抗體幾何平均值僅為1∶8,抗體滴度之低,遠(yuǎn)未達(dá)到抵抗強(qiáng)毒攻擊的最低保護(hù)線(1∶32)。說(shuō)明生產(chǎn)中如按1頭份常規(guī)劑量免疫,仍存在很大的安全隱患。建議各地根據(jù)豬群母抗的水平,適當(dāng)加大免疫劑量,母抗高的豬群可用到每豬4頭份,反之則用2頭份。張?zhí)K強(qiáng)報(bào)道,采用母豬免疫宜在哺乳后期和斷乳時(shí),避開(kāi)配種和懷孕期,免疫劑量為4頭份/頭。種公豬,每年3、9月份各接種一次。4頭份/頭。新生仔豬未吃初乳時(shí),首免:2頭份/頭(注苗2h后吃初乳)70日齡二免,4頭份/頭的免疫程序;發(fā)現(xiàn)疫情后實(shí)行超劑量免疫,立即對(duì)全場(chǎng)所有豬實(shí)行豬瘟兔化弱毒疫苗超劑量緊急接種8頭份/頭的緊急免疫措施可以有效控制豬瘟的發(fā)生和流行。譚海等使用豬瘟弱毒疫苗,每頭仔豬在初乳前、25日齡、60日齡進(jìn)行3次免疫,初乳前接種1頭份、25日齡接種2頭份、60日齡接種3頭份;全群種豬進(jìn)行緊急免疫,每頭接種4頭份,以后每年的3月、9月各接種4頭份可以有效控制豬瘟的發(fā)生和流行。黃鑒明在母豬配種前2～3周接種4頭份豬瘟疫苗有效防止了繁殖障礙型豬瘟的發(fā)生。隆先覺(jué)按體重計(jì)算用苗頭份,10～30kg體重的豬瘟發(fā)病組首次接種5～15頭份、次日再接種5～15頭份可以有效治療豬瘟,初發(fā)病病豬康復(fù)率高達(dá)86.1%,對(duì)假定健康豬接種5頭份,保護(hù)率達(dá)100%。但也有試驗(yàn)證明無(wú)需增加疫苗劑量,金柏新等試驗(yàn)證明仔豬30日齡每頭注射豬瘟疫苗1頭份劑量,30日齡第二次加強(qiáng)免疫注射1頭份劑量的情況下,至180日齡時(shí)仍具有保護(hù)力。在30和60日齡同樣進(jìn)行二次免疫,而每次增加疫苗頭份量,未見(jiàn)有增加抗體效價(jià)的作用,1頭份與2頭份、4頭份間無(wú)顯著性差異,因而認(rèn)為在豬瘟免疫中,沒(méi)有必要增加劑量。2.4豬模型抗體水平,其造成的免疫抑制作用發(fā)揮得顯由于種種原因,在臨床上豬瘟仍難以很好地控制,近年來(lái)仍有豬瘟發(fā)生。在生產(chǎn)中采取乳前免疫或加大免疫劑量的免疫方法,仍然有抗體水平未達(dá)到最低保護(hù)線(1∶32,IHA法)的豬只存在。為此通過(guò)使用免疫增強(qiáng)劑的途徑來(lái)提高動(dòng)物免疫力,提高豬瘟的免疫效果的研究成為豬瘟防制的熱點(diǎn)之一。駱延波等以免疫活性因子作為豬瘟疫苗稀釋液給豬接種1頭份,疫苗接種后10d、100d的豬瘟抗體水平較對(duì)照組(生理鹽水稀釋液)顯著提高(P<0.05),疫苗接種后10d、40d,外周血中T淋巴細(xì)胞的百分率比對(duì)照組顯著提高(P<0.05),表明在接種豬瘟疫苗時(shí),使用免疫活性因子可以促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的增殖,增強(qiáng)其免疫力,有效提高豬瘟疫苗的免疫效果。王川慶等試驗(yàn)表明:將囊素(bursin,是禽類法氏囊組織產(chǎn)生的一種三肽物質(zhì),主要存在于法氏囊組織提取液中)與豬瘟兔化弱毒疫苗同時(shí)接種于被免疫豬,無(wú)不良反應(yīng),安全可靠?？贵w測(cè)定結(jié)果表明囊素與豬瘟兔化弱毒疫苗同時(shí)使用,可明顯提高豬體內(nèi)特異性抗體水平,說(shuō)明囊素對(duì)哺乳動(dòng)物的免疫功能有明顯的促進(jìn)作用。從接種豬瘟疫苗和囊素后不同時(shí)間所測(cè)血清中的豬瘟抗體水平比較可以看出:免疫后2周內(nèi)對(duì)照組抗體水平較免疫前有所下降,而試驗(yàn)組的抗體水平卻有所上升,說(shuō)明試驗(yàn)組抗體被疫苗中和后抗體上升快,空白期短。免疫后4周抗體達(dá)到最高峰時(shí)試驗(yàn)組比對(duì)照組高出近2個(gè)滴度(Log2)。免疫后6周抗體水平有所下降以后,試驗(yàn)組仍比對(duì)照組高出1.4(Log2),說(shuō)明試驗(yàn)組的抗體整體水平和上升幅度均比對(duì)照組高得多,持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),意味著其免疫保護(hù)力更強(qiáng)。差異顯著性檢驗(yàn)(單測(cè)t檢驗(yàn)),表明試驗(yàn)組與對(duì)照組差異顯著。進(jìn)一步研究表明,囊素最佳使用劑量為0.06mL/kg。蔣冬福等試驗(yàn)結(jié)果表明1%健康兔脾淋組織液對(duì)豬瘟兔化弱毒細(xì)胞培養(yǎng)苗有明顯的免疫增強(qiáng)作用,與用生理鹽水稀釋豬瘟細(xì)胞苗相比兩者差異極顯著。試驗(yàn)一在試驗(yàn)豬具有較高抗體水平(1∶45～49),且仔豬的免疫系統(tǒng)尚未完全成熟的條件下進(jìn)行,但A組(兔脾淋組織液稀釋組)的豬瘟幾何平均抗體效價(jià)升至1∶215;B組(生理鹽水稀釋組)的僅升到1∶86。試驗(yàn)二用的是70日齡未免豬,無(wú)母源抗體干擾且免疫系統(tǒng)已近成熟,然而用生理鹽水稀釋組免疫后3周豬瘟抗體幾何平均值僅為1∶8,抗體滴度之低,遠(yuǎn)未達(dá)到抵抗強(qiáng)毒攻擊的最低保護(hù)線(1∶32)。說(shuō)明生產(chǎn)中如按1頭份常規(guī)劑量免疫,仍存在很大的安全隱患。建議各地根據(jù)豬群母抗的水平,適當(dāng)加大免疫劑量,母抗高的豬群可用到每豬4頭份,反之則用2頭份。李敬璽等用亞硒酸鈉(0.1mg/kg體重)作為豬瘟兔化弱毒疫苗的強(qiáng)化劑對(duì)60日齡仔豬進(jìn)行免疫接種,結(jié)果表明,硒可以使動(dòng)物外周血液中B淋巴細(xì)胞增數(shù),血清免疫抗體水平提高,且出現(xiàn)較早,維持時(shí)間較長(zhǎng)而且穩(wěn)定。周旭峰等將豬瘟疫苗用玉米花粉多糖稀釋(肌肉注射)高劑量組,2mL/頭(含2頭份疫苗和90mg多糖)20頭;豬瘟疫苗玉米花粉多糖稀釋(肌肉注射)低劑量組,2mL/頭(含2頭份疫苗和30mg多糖)20頭;豬瘟疫苗用生理鹽水稀釋(肌肉注射)對(duì)照組,2mL/頭(含2頭份疫苗)20頭。20日齡仔豬首免,多糖一次性給予,首免后7d,14d,21d,35d及60日齡二免后10d耳靜脈采血,分離血清,用ELISA測(cè)其抗體水平。結(jié)果表明首免后7d,高劑量組、對(duì)照組與低劑量組之間均有顯著差異(P<0.05)14d時(shí),高劑量組、低劑量組均明顯高于