獨(dú)一顆粒劑鎮(zhèn)痛抗炎止血作用的研究

獨(dú)一顆粒劑鎮(zhèn)痛抗炎止血作用的研究

單粒細(xì)粒是在原配方奶粉的基礎(chǔ)上改進(jìn)的一種新型制劑，具有活血、鎮(zhèn)痛、止血于血郁止血的功效。該藥膠囊劑用于術(shù)后的刀口疼痛、出血、筋骨扭傷、風(fēng)濕痹痛及崩漏、牙齦腫痛及出血等癥。本文對(duì)獨(dú)一味顆粒劑主要進(jìn)行了鎮(zhèn)痛、抗炎和止血方面的藥理作用研究,結(jié)果如下:1材料表面1.1獨(dú)味膠囊、云南白藥、獨(dú)一事膠囊獨(dú)一味顆粒劑:棕色粉末,每克藥粉約含3.3g生藥,由山西泰盛制藥有限公司提供,批號(hào):20020921,試驗(yàn)前用蒸餾水配成所需濃度混懸液備用。獨(dú)一味膠囊:1g生藥/粒,甘肅獨(dú)一味生物制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn),批號(hào):0205271126,批準(zhǔn)文號(hào):(97)衛(wèi)藥準(zhǔn)字Z-89號(hào)。云南白藥:4g藥粉/瓶,云南白藥集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn),批號(hào):20020522,批準(zhǔn)文號(hào):ZZ-5347滇衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1995)第000380號(hào)。酚磺乙胺注射液:0.5g/支,天津金耀氨基酸有限公司,批號(hào):0206051,批準(zhǔn)文號(hào):津衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1981)001067號(hào)。1.2清潔級(jí)大鼠sd大鼠昆明種SPF小鼠,體重19～22g或25～28g;清潔級(jí)SD大鼠,體重190～220g或230～260g。均由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。合格證號(hào)SCXK(京)2002-0003。1.3設(shè)備制造出設(shè)備BS-634血小板聚集儀,北京生化儀器廠生產(chǎn)。SYSMEXCA-500凝血測(cè)定儀SYSMEXCORPORATIONKOBE,JAPAN。2方法和結(jié)果2.1獨(dú)味顆粒劑對(duì)小鼠扭體次數(shù)的影響小鼠60只,雌雄各半,隨機(jī)分6組。均連續(xù)灌胃給藥2天,每天1次,消炎痛(10mg/kg)試驗(yàn)當(dāng)日灌胃給藥1次。于末次給藥后1小時(shí),以0.6%醋酸溶液0.4ml/20g體重腹腔注射,5分鐘后開(kāi)始觀察各組小鼠10分鐘內(nèi)的扭體次數(shù)。結(jié)果獨(dú)一味顆粒劑的高、中、低劑量組對(duì)小鼠扭體次數(shù)均有明顯抑制作用。獨(dú)一味顆粒劑5.0g生藥/kg與同等劑量的獨(dú)一味膠囊作用相等,見(jiàn)表1。2.2足水腫度測(cè)定大鼠60只,雄性,隨機(jī)分6組。均連續(xù)灌胃給藥5天,每天1次,消炎痛(10mg/kg)試驗(yàn)當(dāng)日灌胃給藥1次。于末次給藥后即在每只大鼠右足跖皮下注射1%角叉菜膠溶液0.1ml/只。于注射前及注射后1、2、4、6、8和24小時(shí)的各時(shí)間點(diǎn)測(cè)定足圍長(zhǎng)度,以致炎前后足圍長(zhǎng)度的差值作為足腫脹度。結(jié)果獨(dú)一味顆粒劑高、中、低三個(gè)劑量組在致炎后1～8小時(shí)均能明顯抑制大鼠足腫脹,高、中劑量在致炎后24小時(shí)仍有明顯的抑制作用。該藥5.0g生藥/kg較同等劑量獨(dú)一味膠囊抗炎活性強(qiáng)且持久,見(jiàn)表2。2.3小鼠牙炎試驗(yàn)小鼠60只,雄性,隨機(jī)分6組。每個(gè)鼠籠置1只小鼠。試驗(yàn)前連續(xù)記錄3天每只小鼠每日的攝料量(g/10gbw),算出致炎前每只小鼠每日平均攝料量。致炎當(dāng)日,將小鼠置廣口瓶中乙醚淺麻醉,以2.5%甲醛溶液0.08ml/只于小鼠的上門齒兩側(cè)牙齦黏膜下注射每側(cè)0.04ml。致炎后隨即開(kāi)始連續(xù)灌胃給藥5天,阿司匹林100mg/kg連續(xù)給藥4天,每天一次。在每次給藥同時(shí)稱各鼠籠的小鼠體重及料重,記錄小鼠每天的攝料量。將致炎前后的攝料量進(jìn)行自身比較及與模型對(duì)照組同期比較作為小鼠牙齦炎癥緩解的指標(biāo)。結(jié)果獨(dú)一味顆粒劑高、中劑量組在致炎后第4～6天、低劑量在致炎后第5～6天均比模型對(duì)照組的攝料量明顯增加,獨(dú)一味顆粒劑4.0g生藥/kg與同等劑量獨(dú)一味膠囊攝料量基本相近,見(jiàn)表3。2.4小鼠血栓和凝血時(shí)間測(cè)定小鼠60只,雌雄各半,隨機(jī)分6組。均連續(xù)灌胃給藥5天,末次給藥后1小時(shí),小鼠尾部固定在特制的鼠籠外,自然懸垂,用利剪自尾尖部剪掉鼠尾0.5cm,每間隔15秒用潔凈濾紙片輕粘尾尖處,直至濾紙不再粘有血跡為止,記錄小鼠從剪掉尾尖部到無(wú)濾紙血跡的時(shí)間為小鼠止血時(shí)間。在測(cè)定止血時(shí)間的同時(shí),采用玻片法測(cè)定小鼠的凝血時(shí)間。結(jié)果獨(dú)一味顆粒劑高、中劑量組可明顯縮短小鼠止血和凝血時(shí)間。獨(dú)一味顆粒劑4g生藥/kg與同等劑量獨(dú)一味膠囊止血時(shí)間相近,凝血時(shí)間前者較后者縮短,但無(wú)顯著差別,見(jiàn)表4、5。2.5凝血功能檢測(cè)大鼠60只,雌雄各半,隨機(jī)分6組,均連續(xù)灌胃給藥7天。酚磺乙胺1.0g/kg連續(xù)灌胃給藥3天。各組大鼠于試驗(yàn)前一天禁食16小時(shí),不禁水,在末次給藥后2小時(shí),水合氯醛(300mg/kg)腹腔麻醉,自腹主動(dòng)脈采血2.7ml置測(cè)定管中,與管內(nèi)0.3ml(3.2%)枸櫞酸鈉緩沖液混合,采用SYSMEXCA-500凝血功能測(cè)定儀檢測(cè)大鼠凝血酶原時(shí)間(PT)、部分凝血活酶時(shí)間(APTT)及纖維蛋白原含量(FIB)。結(jié)果獨(dú)一味顆粒劑5.0g生藥/kg組可明顯縮短凝血酶原時(shí)間、部分凝血活酶時(shí)間,而同等劑量獨(dú)一味膠囊雖呈現(xiàn)了一定縮短作用,但與對(duì)照組比較差別不顯著,見(jiàn)表6。2.6血小板聚集檢測(cè)大鼠70只,雄性,隨機(jī)分7組。均連續(xù)灌胃給藥5天,每天1次。阿司匹林(200mg/kg)、云南白藥(1g/kg)均連續(xù)灌胃給藥3天。試驗(yàn)前禁食16小時(shí),末次給藥后1小時(shí),戊巴比妥鈉(50mg/kg)腹腔麻醉,自腹主動(dòng)脈采血,按文獻(xiàn)制備富血小板血漿(PRP)和貧血小板血漿(PPP),加入60μMADP溶液20μl,采用BS-634型血小板聚集儀測(cè)定每只大鼠血小板最大聚集率(PAGm,%)、血小板最大聚集時(shí)間(Tm,min)、2分鐘(PAG2,%)、4分鐘(PAG4,%)和6分鐘(PAG6,%)血小板聚集率。結(jié)果獨(dú)一味顆粒劑組血小板最大聚集率、血小板最大聚集時(shí)間均較對(duì)照組明顯延長(zhǎng),在6分鐘時(shí)血小板聚集率仍明顯高于對(duì)照組,提示該藥可增強(qiáng)ADP誘導(dǎo)大鼠血小板聚集功能的活性,使其解聚時(shí)間減慢。與獨(dú)一味膠囊同等劑量比較,其PAG4%和PAG6前者略優(yōu)于后者,PAGm和Tm則相近,見(jiàn)表6。3對(duì)凝血功能的作用,高本文研究結(jié)果表明,獨(dú)一味顆粒劑能明顯減少醋酸致小鼠的扭體次數(shù),提示該藥具有一定的鎮(zhèn)痛作用。抑制大鼠足爪炎癥,增加小鼠牙齦持續(xù)性炎癥后第4～6天的攝料量。表明該藥不但對(duì)急性炎癥有明顯的抑制作用,同時(shí)對(duì)牙齦持續(xù)性炎癥也有一定的緩解作用,但不排除該藥所具有的鎮(zhèn)痛作用。還可縮短小鼠的止血和凝血時(shí)間,高劑量組對(duì)大鼠凝血酶原時(shí)間、部分凝血活酶時(shí)間也呈現(xiàn)一定的縮短作用,說(shuō)明該藥具有促進(jìn)體內(nèi)凝血功能和止血功能的作用,對(duì)內(nèi)源性凝血系統(tǒng)功能也有一定的促進(jìn)作用。另外該藥還能提高血小板最大聚集率,延長(zhǎng)血小板最大聚集時(shí)間,使其解聚速度減慢,說(shuō)明對(duì)血小板聚集功能有明顯的增強(qiáng)作用,故對(duì)該藥的止血和凝血功效起到重要作用。獨(dú)一味顆粒劑與同等劑量獨(dú)一