分析報告格式

1關(guān)于微生物產(chǎn)品可行性分析報告論文格式：全文字數(shù)不少于3500字(此為畢業(yè)論文開題報告字數(shù)要求，故此數(shù)值)，插入頁碼。全文〔包括參考文獻局部〕字體統(tǒng)一為5號宋體，但不同標題字號有所不同，具體看下面模板的批注局部。參考文獻須在文中具體引用處標示出，引用方法如，[1]。參考文獻局部格式15技術(shù)路線局部最好以簡潔的框架形式列出，這樣外人一看可以一目了然。關(guān)于報告局部上交時間為17周的上課時間，可交電子稿至本人郵箱，也可打印稿，但也須交電子稿一份。PPT辯論時間為16周的周一，每組一名代表即可。6.最終感謝黃豐成同學的建議，使得大家可以拿到統(tǒng)一格式的報告模板。包括我本人格外感謝有同學提出這么好的建議，是我考慮不周的失誤，也歡送其他同學對微生物學及試驗課方式、方法等提出建議或意見,可以直言，也可以發(fā)郵“mailto:ljzhang96@163“件至本人郵箱:ljzhang96@163(學校郵箱容量太小，論文和建議都可發(fā)至此郵箱，感謝)。酸性淀粉酶產(chǎn)生菌株的分別、鑒定1,2,3,4(浙江大學寧波理工學院，08產(chǎn)品爭論的背景和意義20世紀60萄糖生產(chǎn)果葡糖漿的大規(guī)模工業(yè)化，淀粉酶的需要量幾乎占了整個酶制劑總產(chǎn)量的50%以上業(yè)所承受的淀粉酶和糖化酶作用pH值有差異，生產(chǎn)過程中不但增加了生產(chǎn)本錢，而且影響粉酶，簡化液化、糖化過程，降低淀粉深加工生產(chǎn)本錢具有現(xiàn)實意義。要特別的淀粉酶種類來滿足生產(chǎn)淀粉酶和糖化酶的最適pH不同，因此在生產(chǎn)工藝的操作中需要進展pH調(diào)整。這不但要消耗大量酸、堿，最終還需要對產(chǎn)品進展脫鹽，這些步驟大大提高了我們的生產(chǎn)本錢淀粉酶的作用pH4.0-6.0pH相近，就可以使淀粉液化和糖化在同一條件下進展。這樣既避開pH的調(diào)整帶來的麻煩，同時也削減了大量試劑的消耗，簡了淀粉的深加工過程。因此開發(fā)型的酸性淀粉酶制劑的工作顯得愈發(fā)迫切。國內(nèi)外爭論現(xiàn)狀和爭論趨勢床化學分析工業(yè)副產(chǎn)品的加工以及工業(yè)生產(chǎn)廢品的利用和處理等領(lǐng)域不同，主要的淀粉酶可以分為四類：α-淀粉酶、β-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶和異淀粉酶。α-淀粉酶是以糖原或淀粉為底物，從分子內(nèi)部切開α-1，4-糖苷鍵而使淀粉水解；β-淀粉酶是從底物淀粉的非復原性末端順次水解每相隔一個的α-1，4-糖苷鍵而使淀粉水解成麥芽糖；葡萄糖淀粉酶是從底物淀粉的非復原性末端順次水解α-1，4-糖苷鍵和分枝的α-1，6-糖α-1，6-糖苷鍵，并切下整個側(cè)枝[1]1915年法國的Boiden等開頭由枯草桿菌生產(chǎn)細菌淀粉酶，并在工業(yè)上用于紡織品退漿；1963年日本YasujiMinoda等人[2]覺察黑曲霉可以產(chǎn)酸性α-淀粉酶；此后，美國、韓國、中國以及歐洲國家的一些爭論者都對酸性α-淀粉酶進展了爭論，如芬蘭的爭論者制備了用于高麥芽糖漿生產(chǎn)的酸性α-其最適pH為5.0；日本的爭論者[3]用白曲霉生產(chǎn)一種酸性α-pH為3.5，適用于清酒制備中淀粉原料的加工；1987年任天明等[4]完成了嗜熱脂肪芽孢桿菌的高α淀粉酶基因在大腸桿菌種的克隆和表達1990[5從酒曲中分別得到生產(chǎn)高溫α-淀粉酶的菌種；2023年，張強等從西藏溫泉土壤中篩選到一株地衣芽胞桿菌活菌，酶活力到達7.4U/ml[6]1979282023500。目前國內(nèi)外市場上兩類常用的是中溫型淀粉酶的和高溫型淀粉酶，它們的最適pH范圍在7左右，在酸性環(huán)境中酶活明顯降低，不能滿足一些酸性環(huán)境淀粉原料的加工，因此酸性淀粉酶的開發(fā)勢在必行。產(chǎn)品目標和爭論內(nèi)容總體爭論目標從富含淀粉的土壤中分別篩選得到一株產(chǎn)生酸性淀粉酶的微生物菌株的鑒定，獲得的該微生物菌株可用于酸性淀粉酶的生產(chǎn)。爭論的根本內(nèi)容目的菌株的分別，具體內(nèi)容有：采集土壤樣品，實行合理的培育方法進展培育通過測量淀粉水解透亮圈比值，對目的菌株進展初步篩選通過淀粉酶活力測定的方法，對目的菌株進展復篩目的菌株的鑒定，具體內(nèi)容有：參考《伯杰細菌鑒定手冊〔第八版》內(nèi)容，對菌株進展生理生化鑒定提取目的菌株的16SrDNA片段，通過進展測序比對進展鑒定爭論的方法與技術(shù)路線爭論方法土樣的采集選擇多個富含淀粉的土壤樣品地點，比方面粉廠、芋艿地、番薯地等地的土壤，取離地面5-15cm處的土壤，裝袋，并作記錄。增殖〔富集〕培育同種類微生物的生長生殖對環(huán)境和養(yǎng)分的要求不同，主要通過調(diào)整培育基的pH值，使目生長，滿足試驗需要。菌株初篩是否有水解透亮圈。同時測量菌落的淀粉水解透亮圈直徑(D)和菌落的直徑(d)，通過兩者的比值大小，初步篩出產(chǎn)酶力氣相對較高〔即D/d值較大〕的菌種進展斜面保藏，用于進一步的復篩。復篩為確定初篩得到菌種的穩(wěn)定性，利用菌株產(chǎn)生的淀粉酶的活力大小對菌種進展進一步的篩選。將保藏的菌種培育在液體培育基中，培育一段時間后，離心取上清液，得到粗酶液，然粉酶的提取及酶活力的測定：取初步篩選出的菌種，接種到液體培育基中，進展發(fā)酵培育。培育到確定時期后，取發(fā)酵液離心，取上清液〔即粗酶液，參與固體硫酸銨使得溶液飽和度到達80%，對蛋白質(zhì)進展低溫鹽析，靜置24h后離心溶液，收集蛋白沉淀。然后用適宜1.0%的可溶性淀粉底物溶液10mL放入試管中，在適宜溫度的水浴鍋中預熱10min1.0mL，混勻，準確保10min0.5mL反響液，加到盛有10mL0.1mol/LHCl的試管中終止反響。取終止反響后的溶液0.5mL，加到盛有10mL碘液的試管中搖勻。用分光光度計〔試驗前先開啟預熱30min左右〕在600nm下測定吸光值，計算出酶活力。酶活力〔U/mL〕=(D0－D)/D0×100×稀釋倍數(shù)式中DD100為系數(shù)。10min使1%1%所需酶量為一個酶活力單位U。菌種的鑒定傳統(tǒng)的方法有菌種的生理生化鑒定，現(xiàn)代的方法有16SrDNA序列鑒定等。生理生化鑒定：參考《伯杰細菌鑒定手冊〔第八版》對菌種進展生理生化鑒定，內(nèi)容包括菌種形態(tài)的觀看，革蘭氏染色、芽孢染色、接觸酶試驗等。16SrDNA序列鑒定：16SrDNA是原核生物染色體上編碼核糖體小亞基RNA的基因，在長期的進化過程中分子功能幾乎保持恒定具有保守性，又具有高變性。保守性能反映誕生物物種的親緣關(guān)系, 為系統(tǒng)發(fā)育重建供給線索；高變性則能提示誕生物物種的特征核酸序列，是屬種鑒定的分子根底。把待測菌種的16SrDNA序列測定出來，然后與數(shù)據(jù)庫中的菌種序列進展比較即可確定供試菌種的分類地位提取復篩得到的產(chǎn)淀粉酶菌株的基因組DNA，對16SrDNA片段進展PCR擴增PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)電泳檢測完整后承受瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒割膠回收16SrDNA片段。依據(jù)T-A克隆載體連接試劑盒的說明書，將16SrDNA片段與質(zhì)粒載體連接；連接后轉(zhuǎn)化已制備好的大腸桿菌感受態(tài)細胞，37℃培育箱中過夜培育。挑取能在含有標記基因的LB培育基上生長的單菌落，接種，37℃過夜培育后提取質(zhì)粒，進展PCR和酶切檢測。質(zhì)粒提取操作按質(zhì)粒提取試劑盒的說明書進展電泳檢測完整后送至測序公司進展基因測序?qū)y序結(jié)果輸入美國國立生物技術(shù)信息中心數(shù)據(jù)〔NationalCenterforBiotechnologyInformation，NCBI〕進展BLASTn比對，依據(jù)目的菌序列與數(shù)據(jù)庫中的核苷酸序列的相像度來確定分別所得到的菌株的種類。技術(shù)路線整個試驗流程及技術(shù)路線如以以下圖：〔五〕預期成果〔包括科研報告、論文、專利、用于實踐的可能等,著重市場開發(fā)的可能〕通過本工程的爭論方案，預期可獲得至少1株產(chǎn)酸性淀粉酶菌株，撰寫科研論文一篇。對該菌株進展微生物育種以及菌株發(fā)酵產(chǎn)生酸性淀粉酶的工藝爭論前全世界只有少數(shù)幾家工廠生產(chǎn)而且價格較高，每公斤50左右，但還是有不少商家購置。國的爭論尚屬國內(nèi)空白。一旦獲得高產(chǎn)酸性淀粉酶菌株，將有重要應(yīng)用前景。參教文獻梅樂和,岑沛霖.現(xiàn)代酶工程[M].北京:化學工業(yè)出版社,2023:200~201.徐穎.高產(chǎn)α-淀粉酶生產(chǎn)均的篩選鑒定及其酶學性質(zhì)爭論[D].四川:四川大學,2023.[3]張樹政.酶制劑工業(yè)[M].北京:科學出版社,1984:18~20.YasujiMinoda.Acid-stableα-AmylaseofBlackAspergilliPartⅡ[J].Agr.Biol.chem,1968,32〔1〕:104~109.黃大肪,林敏.農(nóng)業(yè)微生物基因工程[M].北京:科學出版社,2023.任天明.嗜熱脂肪芽孢桿菌的淀粉酶基因的克隆和表達[J].生物工程學報,1987,3:197.金鳳燮,李瑤,張春枝.α-B.sp-JF1的誘變選育[J].大連輕工業(yè)學院學報,1997,04.朱何東.高溫α-淀粉酶產(chǎn)生菌的篩選及酶學性質(zhì)爭論[D].四川:四川大學,2023.張麗蘋,徐巖.酸性α-淀粉酶的爭論與應(yīng)用[J].釀酒科技,2023,29〔3〕:19.[10]谷軍.α-淀粉酶的生產(chǎn)與應(yīng)用[J].生物技術(shù),1994,4〔3〕:1~5.BartholomewNOkolo,LewisIEzeogu,eta1.ProductionofRawStarchDigestingAmylasebyAspergillusnigerGrownofNativeStarchSources[J].Jsci.FoodAgric,1995〔69〕:109.鈴木浴治,小島巖夫.Newα-AmylaseproducedbyBacillus1ieheniformisisacid-tolerantandthermostable-acid-tolerantandthermostableα-amylaseproduction[J].JpnKokaiTokyoJp,10136979,1996〔7〕:32~35.Kamasaka,H.,Sugimoto,K.,Takata,H.,eta1.BacillusstearothermophilusNeopullulanaseSelectiveHydrolysisofAmylosetoMaltoseinthePresenceofAmylopectin[J].Appliedandenvironmentmicrobiology,2023,68〔4〕.Petrova,S.D.Ilieva,S.Z.,Bakalova,N.G.eta1.Productionandcharacterizationofextracellularα-amylasefromthethermophiliefungusThermomyceslanuginosus〔wildandmutantstrains〕[J].BiotechnologyLetter,2023〔22〕:1619~1624.阮森林.酸性α-淀粉酶產(chǎn)生菌的篩選及其酶學性質(zhì)爭論[D].河南:河南農(nóng)業(yè)大學,2023.[16]李勃.微生物發(fā)酵生產(chǎn)耐酸性α-淀粉酶的爭論[D].陜西:西北大學,2023.[17]謝慧玲,阮森林,劉亮偉.[J].食品工業(yè)科技,2023,29〔10〕:85~87.[18]R.E.布坎南,N.E.吉本斯.伯杰細菌鑒定手冊〔第八版〕.北京:科學出版社,1984.[19]黃秀梨,辛明秀.微生物學試驗指導〔2版〕[M].北京:高等教育出版社,202