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真菌學(xué)總論重點(diǎn)與難點(diǎn)1.真菌及其分類2.真菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)3.真菌的培養(yǎng)特點(diǎn)4.真菌的致病性真菌(fungus):真核細(xì)胞型微生物組成:核膜和核仁(細(xì)胞核)完整的細(xì)胞器(胞漿)單細(xì)胞(少數(shù))或多細(xì)胞(多數(shù))生存方式:腐生或寄生繁殖方式:有性或無性
概述分布廣泛、種類繁多多數(shù)有益少數(shù)有害:醫(yī)學(xué)(病原)真菌400種
常見的有50~100種目前真菌病呈明顯上升趨勢(shì):抗生素、抗腫瘤藥物、免疫抑制劑等的濫用器官移植、介入性治療等新型技術(shù)的開展艾滋病、糖尿病、惡性腫瘤等疾病造成宿主免疫功能低下傳統(tǒng)分類最新分類第一節(jié)
真菌的生物學(xué)性狀形態(tài):多種多樣
有典型的核結(jié)構(gòu)和細(xì)胞器按形態(tài)、結(jié)構(gòu)分為兩類:?jiǎn)渭?xì)胞真菌多細(xì)胞真菌形態(tài)與結(jié)構(gòu)圓形或橢圓形包括:酵母型真菌:無菌絲,母細(xì)胞以芽生方式繁殖,菌落與細(xì)菌的菌落相似。類酵母型真菌:母細(xì)胞以芽生方式繁殖,出芽產(chǎn)生的芽生孢子持續(xù)延長(zhǎng),但不斷裂、不與母細(xì)胞脫離,產(chǎn)生相互連接成藕節(jié)狀較長(zhǎng)的細(xì)胞鏈,可伸入培養(yǎng)基內(nèi),稱假菌絲(pseudohypha)。單細(xì)胞真菌基本結(jié)構(gòu):菌絲和孢子菌絲(hypha):孢子生出嫩芽,稱為芽管管逐漸延長(zhǎng)呈絲狀,稱為菌絲。
孢子(spore):真菌的生殖結(jié)構(gòu),由生殖菌絲產(chǎn)生。多細(xì)胞真菌菌絲體(mycelium):菌絲交織成團(tuán)根據(jù)功能不同分為:
營(yíng)養(yǎng)菌絲(vegetativemycelium)
氣生菌絲(aerialmycelium)
生殖菌絲(reproductivemycelium)菌絲
真菌的有隔、無隔菌絲(400×)根據(jù)隔膜的消長(zhǎng)分為:有隔菌絲(大部分病原性絲狀菌)無隔菌絲根據(jù)形態(tài)不同分為:?jiǎn)渭兙z球拍狀菌絲破梳狀菌絲螺旋狀菌絲結(jié)節(jié)狀菌絲鹿角狀菌絲等鑒別和分類的依據(jù)
真菌的各種菌絲
生殖結(jié)構(gòu),由生殖菌絲產(chǎn)生,是鑒定和分類的主要依據(jù)。無性孢子
不經(jīng)兩性細(xì)胞配合而產(chǎn)生的孢子。病原性真菌大多數(shù)產(chǎn)生無性孢子。有性孢子
細(xì)胞間配合(質(zhì)配和核配)后產(chǎn)生,絕大多數(shù)為非致病性真菌所具有。孢子接合孢子
子囊孢子
擔(dān)(子)孢子有性孢子葉狀孢子(thallospore)
芽生孢子(blastospore)
關(guān)節(jié)孢子(arthrospore)
厚膜孢子(chlamydospore)分生孢子(conidia)
大分生孢子(macroconidia)
小分生孢子(microconidia)孢子囊孢子(sporangiospore)無性孢子
真菌的葉狀孢子
真菌的大分生孢子真菌的小分生孢子
真菌的子囊及子囊孢子依靠孢子及菌絲進(jìn)行繁殖繁殖方式:
無性繁殖——真菌的主要繁殖方式
有性繁殖真菌的繁殖與培養(yǎng)無性繁殖主要包括:芽生
母細(xì)胞發(fā)芽產(chǎn)生。常見于酵母型和類酵母型真菌。裂殖母細(xì)胞二分裂產(chǎn)生。如裂殖酵母。芽管萌發(fā)芽管,伸延形成菌絲。隔殖
分生孢子梗形成一隔膜,原生質(zhì)濃縮形成新孢子。培養(yǎng)特性培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)要求不高,常用沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)、馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)、察氏培養(yǎng)基(Czapek-DoxAgar)、腦心浸膏瓊脂培養(yǎng)基(BHI)
溫度:37℃(酵母型和類酵母型真菌)25~28℃(絲狀真菌)
最適pH:4.0~6.0
生長(zhǎng)速度:多數(shù)病原性真菌生長(zhǎng)緩慢SDA培養(yǎng)基上,可形成3種類型菌落:1.酵母型菌落(yeasttypecolony)
芽生孢子,無菌絲。如新生隱球菌2.類酵母型菌落(酵母樣菌落)(yeast-liketypecolony)
呈藕節(jié)狀細(xì)胞鏈的假菌絲。如白假絲酵母3.絲狀型菌落(filamentoustypecolony)
菌落形態(tài)和顏色可作為鑒定、分類的參考依據(jù)。見于大多數(shù)絲狀真菌變異性
形態(tài)、結(jié)構(gòu)、及生理性狀(毒力)等。抵抗力對(duì)熱抵抗性不強(qiáng)(孢子60℃經(jīng)1
h即殺滅)耐受:干燥、紫外線及多種化學(xué)藥物等敏感:1%~3%石炭酸、2.5%碘酊及10%甲醛液變異性與抵抗力第二節(jié)
真菌的致病性與免疫性真菌感染
真菌性超敏反應(yīng)
真菌毒素中毒
致病性真菌?。╩ycoses):
由真菌引起的感染,并表現(xiàn)臨床癥狀原發(fā)性感染:致病性真菌球孢子菌(coccidiodes)
皮炎芽生菌(blastomyoesdermatitidis)
組織胞漿菌(histoplasma)馬爾尼菲青霉(penicilliummarneffei)等繼發(fā)性感染:機(jī)會(huì)致病性真菌機(jī)體免疫功能顯著下降時(shí)發(fā)生真菌感染
按性質(zhì)分類:
感染性超敏反應(yīng):感染,Ⅳ型
接觸性超敏反應(yīng):吸入或食入,Ⅰ~Ⅳ型按部位分類:
皮膚超敏反應(yīng)
呼吸道超敏反應(yīng)
消化道超敏反應(yīng)真菌性超敏反應(yīng)來源:真菌代謝產(chǎn)生毒素,存在于農(nóng)作物、食物或飼料中表現(xiàn):1.肝、腎、神經(jīng)、造血系統(tǒng)等損傷2.致癌(黃曲霉毒素等)真菌毒素中毒非特異性免疫皮膚粘膜屏障作用正常菌群拮抗作用(白假絲酵母菌)吞噬作用特異性免疫
細(xì)胞免疫體液免疫
免疫性第三節(jié)
真菌的微生物學(xué)檢查法淺部:鱗屑、病發(fā)或甲屑深部:痰、膿、血、尿、便、腦脊液、胸水及分泌物等注意:標(biāo)本應(yīng)足量、新鮮嚴(yán)格無菌操作資料應(yīng)齊全標(biāo)本的采集直接鏡檢:標(biāo)本處理(10%KOH)
涂片染色(革蘭染色、墨汁染色)分離培養(yǎng):含抗生素和放線菌酮的SDA、PDA酵母型和類酵母型真菌:
37℃,革蘭染色絲狀真菌:25℃,乳酸酚棉蘭染色形態(tài)學(xué)檢查血清學(xué)檢查檢測(cè):真菌抗原、代謝產(chǎn)物及機(jī)體產(chǎn)生的抗體抗原:1,3-β-D-葡聚糖(G試驗(yàn))甘露聚糖(EIA法或FACE)半乳甘露聚糖(GM試驗(yàn))隱球菌莢膜多糖(乳膠凝聚試驗(yàn))血清學(xué)檢查抗體:甘露聚糖抗體(凝膠對(duì)流電泳)烯醇化酶抗體(凝集試驗(yàn))馬爾尼菲青霉抗體(ELISA法)代謝產(chǎn)物:D-阿拉伯糖醇(酶熒光法)烯醇化酶(斑點(diǎn)印跡法或DFA)核酸G+Cmol%測(cè)定PCR相關(guān)技術(shù):巢氏PCR、復(fù)合PCR、熒光PCR等DNA指紋技術(shù):RFLP、DGGE、SSCP等核酸雜交:原位雜交、RDB、基因芯片技術(shù)等DNA特殊序列分析:ITS、LSU、TEF、線粒體cytb、COⅠ和COⅡ、
-微管蛋白等基因核酸檢測(cè)第四節(jié)
真菌感染的防治原則皮膚癬菌:注意清潔衛(wèi)生,避免接觸局部使用特比萘芬、酮康唑、
咪康唑或克霉唑深部真菌病:去除各種誘因,提高抵抗力常用氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、兩性霉素B、5-氟胞嘧啶、卡泊芬凈、米卡芬凈等真菌性食物中毒:嚴(yán)禁食用發(fā)霉食品思考題1.近年來真菌感染增多的原因有哪些?2.簡(jiǎn)述真菌的基本形態(tài)與結(jié)構(gòu)。3.簡(jiǎn)述真菌的繁殖與培養(yǎng)特性。4.試述真菌的致病性。5.簡(jiǎn)述真菌感染的實(shí)驗(yàn)室檢查方法。中英文關(guān)鍵詞真菌fungus菌絲
hypha
孢子spore假菌絲pseudohypha雙相型真菌dimorphicfungi真菌病mycoses課外閱讀資料專著王端禮.醫(yī)學(xué)真菌學(xué)——實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)指南.北京:人民衛(wèi)生出版社,2005張宏,廖萬清,郭寧如.實(shí)用臨床真菌病學(xué).北京:人民軍醫(yī)出版社,2009邢來君,李明春.普通真菌學(xué).北京:高等教育出版社,2010溫海,李若瑜.醫(yī)學(xué)真菌學(xué).北京:人民衛(wèi)生出版社,2012[1]CasadevallA.Amoebaprovideinsightintotheoriginofvirulenceinpathogenicfungi.AdvExpMedBiol.2012,710:1-10.[2]DavidSH,AndersO,DylanG,etal.ProgressinmolecularandmorphologicaltaxondiscoveryinFungiandoptionsforformalclassificationofenvironmentalsequences.FungalBiologyReviews,2011,25(1),38-47.[3]BalajeeSA,SiglerL,BrandtME.DNAandtheclassicalway:identificationofmedicallyimportantmoldinthe21stcentury.MedMycol.2007,45(6):475-490[4]GalluzziL,MaqnaniM,SaundersN,etal.Currentmolecularte
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