臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)：10-彎曲菌屬和螺桿菌屬

彎曲菌屬和螺桿菌屬CampylobacterandHelicobacter第一節(jié)彎曲菌屬分類：至少30個種和亞種，對人致病的種類多，但大多數(shù)少見；是一類微需氧、不分解糖類，菌體彎曲、有動力的革蘭陰性菌，主要致病菌為空腸彎曲菌和胎兒彎曲菌胎兒亞種，前者引起腹瀉，后者引起敗血癥等。一、空腸彎曲菌（C.jejuni）

的生物學(xué)性狀（一）形態(tài)與染色：為G-無芽胞彎曲短桿菌，菌體彎曲呈S狀或海歐展翅狀等。有端鞭毛，運(yùn)動活潑，暗視野鏡下呈“投鏢樣”運(yùn)動。（二）培養(yǎng)特性：微需氧（5﹪O2、10﹪CO2、85﹪N2），適溫通常為42℃~43℃，營養(yǎng)要求高，在普通培養(yǎng)基上不長，一般采用改良Campy-BAP選擇平板或Skirrow血平板進(jìn)行分離培養(yǎng)。（三）生化反應(yīng)：不分解糖類，馬尿酸水解＋、醋酸吲哚水解試驗(yàn)+、對萘啶酸敏感，而胎兒彎曲菌正好相反。（四）抵抗力：不強(qiáng)，對各種理化因素敏感。二、致病性（一）致病因素：侵襲力、腸毒素、細(xì)胞毒素和內(nèi)毒素等。（二）所致疾病：為常見腹瀉的病原菌之一，也可引起腸道外感染：格林巴利綜合癥。經(jīng)糞-口途徑傳播。三、微生物學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本采集和運(yùn)送：標(biāo)本－糞便要求－新鮮，及時送檢或用運(yùn)送培養(yǎng)基。（二）檢驗(yàn)程序：

（三）檢驗(yàn)方法：

1、直接鏡檢：

2、分離培養(yǎng)：培養(yǎng)基－Campy－BAP等培養(yǎng)方法－微需氧培養(yǎng)。方法有：混合氣體培養(yǎng)法、燭缸法、氣袋法

3、鑒定：（1）形態(tài)學(xué)鑒定：革蘭染色，形態(tài)，排列動力及培養(yǎng)條件（2）生化鑒定：馬尿酸水解試驗(yàn)。注意空腸彎曲菌和胎兒彎曲菌的鑒別：生長溫度（42℃、37℃）、生化試驗(yàn)（馬尿酸水解、醋酸吲哚水解、前者+，后者-）。藥敏（萘啶酸敏感試驗(yàn)，前者敏感，后者耐藥）。

幽門螺桿菌的歸屬和致病性：本屬菌1893年有人從哺乳動物胃內(nèi)發(fā)現(xiàn)，未引起重視。1983年澳大利亞學(xué)者M(jìn)arshall和Warren從慢性胃炎胃竇粘膜活檢組織中分離出彎曲樣桿菌，并提出可能是人類慢性胃炎的病原菌，劃歸彎曲菌屬，從而引起各國學(xué)者的重視和研究。2005年獲醫(yī)學(xué)諾貝爾獎。第二節(jié)幽門螺桿菌

（H.pylori，HP）目前該屬已鑒定的有19種菌，其中與人類疾病相關(guān)的研究最多的最常見的是幽門螺桿菌?，F(xiàn)認(rèn)為它與消化性潰湯、萎縮性胃炎、胃腺癌和胃粘膜淋巴組織瘤密切相關(guān)。1、形態(tài)與染色：與彎曲菌相似，菌體一端或兩端有鞭毛。一、生物學(xué)性狀

2、培養(yǎng)特性：微需氧，最適溫度37℃，25和42℃生長不良，濕度98%為宜。把含5%的羊血布氏瓊脂或含7%馬血心腦浸液作為非選擇培養(yǎng)基，用改良的Skirrow瓊脂作為選擇培養(yǎng)基，在微需O2環(huán)境中，37℃培養(yǎng)3~5天，長出細(xì)小、灰白、半透明、不溶血的菌落。3、生化反應(yīng)：與彎曲菌相似，尿素酶快速強(qiáng)陽性是幽門螺桿菌的顯著特征。4、抵抗力：較弱，對多種理化因素敏感。二、致病性1、致病物質(zhì)：尿素酶、蛋白酶及毒素2、所致疾病：慢性胃炎、消化性潰瘍，是胃癌的危險因子。三、微生物學(xué)檢驗(yàn)1、標(biāo)本采集：胃粘膜活檢標(biāo)本2、檢驗(yàn)程序：3、檢驗(yàn)方法：（1）直接鏡檢：（2）分離培養(yǎng)：（同前）（3）快速診斷：尿素酶快速強(qiáng)陽性、核素標(biāo)記試驗(yàn)，PCR、抗原檢測（現(xiàn)有商品ELISA試劑盒檢測HP菌體Ag)。幽門螺桿菌小史后來……還是不行后來，終于成功了，不過……Marshall開始到處寫信求助。這一撼動傳統(tǒng)藥物公司治療方式的提議沒有意外地遭到了大多數(shù)藥物公司的無視或者嘲笑。最終，他倆得到了一家小藥物公司贊助，開始做一些小型的臨床試驗(yàn)。用抗菌素治療后的患者療效顯著，與之前的抑酸劑不可同日而語。1983年，Marshall拿著他的結(jié)果來到了布魯塞爾的國際微生物學(xué)會發(fā)表。參會的微生物學(xué)家們被深深震撼了?；貋砗螅麄z再次給柳葉刀寫了一篇完整的論文。不出意外，被斷然拒絕了。之后，苦悶的Marshall到處參加學(xué)會，演講自己的發(fā)現(xiàn)和觀點(diǎn)。然而，抑酸劑當(dāng)時是一個30億美元的龐大市場。他所到之處，滿是嘲諷和拒絕。他倆于是試圖在動物身上再現(xiàn)感染造成的胃炎模型?？上?，又是屢試屢敗。1984年，Marshall和Warren在柳葉刀發(fā)表了那篇石破天驚的論文“胃炎和消化性潰瘍患者胃部發(fā)現(xiàn)的不明彎曲桿菌”。同年，Marshall又一次參加學(xué)會，發(fā)表幽門螺桿菌學(xué)說。午餐時間，他聽到周圍一群各國消化科醫(yī)生均嘲笑諷刺，說一個澳大利亞醫(yī)生荒謬的認(rèn)為有細(xì)菌可以在胃液存活且導(dǎo)致胃潰瘍，真可笑。Marshall一怒之下，回到澳洲，拿起一大杯含大量幽螺菌的培養(yǎng)液就喝。幾天后，他開始腹痛嘔吐。5天后，他清晨被痛醒。10天后胃鏡證實(shí)了胃炎和大量幽門螺桿菌的存在。他此時才告訴他被嚇壞了的妻子，他在自己身上做了實(shí)驗(yàn)。

1985年，他倆將這一勇敢行為發(fā)表在澳大利亞醫(yī)學(xué)雜志上。不可思議的是，仍然沒有得到應(yīng)得的重視。這篇文章沉默了近10年。在這沉默的十年間，Marshall于1986年移民到了美國。美國媒體，如讀者文摘，開始以“豚鼠醫(yī)生用自己做實(shí)驗(yàn)，治愈了潰瘍“做題目開始報道。Marshall的知名度開始上升，受到越來越多的關(guān)注。1989年，這個細(xì)菌被正式命名為幽門螺桿菌。終于，NIH和美國FDA開始接受并宣傳這種新的觀點(diǎn)。到了1993至1996年間，全美的醫(yī)學(xué)界開始轉(zhuǎn)變觀念。Marshall和Warren的名字開始見諸世界媒體。1994年，美國NIH發(fā)表了新的指南，承認(rèn)大多數(shù)再發(fā)性消化性潰瘍可能因幽門螺桿菌所致，建議使用抗菌素治療。2005年，Marshall和Warren因?yàn)檫@一發(fā)現(xiàn)獲得了諾貝爾醫(yī)學(xué)獎。Marshall