微生物的分離和純培養(yǎng)-中圖版課件

微生物的分離和純培養(yǎng)1（實驗11）目的要求學會將混雜的微生物分離成純種，掌握

統(tǒng)計分析樣品中微生物的種類和數(shù)量的方法。學會從菌落及培養(yǎng)形態(tài)特征區(qū)分細菌、放線菌和霉菌。掌握幾種純化微生物的基本操作技術(shù)（制作平板、連續(xù)稀釋、平板劃線）2實

驗

原

理3自然界中不同種類的微生物混雜生活在一起，要研究某種微生物的特性，必須從混雜的微生物類群中分離它，使該微生物處于純培養(yǎng)狀態(tài)這種獲得純培養(yǎng)的方法稱為微生物的分離與純化。純種：是微生物的某一個種或株，培養(yǎng)中的所有細胞有著共同的來源或僅是同一細胞的后代。為了獲得單個菌體，要把待分離的材料進行適當?shù)南♂專雌渖L所需要的條件，使其在平板上，單個菌體繁殖成單個菌落。由于細菌、放線菌和霉菌所要求的營養(yǎng)條件不同，將樣品在不同培養(yǎng)基制成的平板上進行分離，依據(jù)菌落形態(tài)的差異，可以區(qū)分細菌、放線菌和霉菌三大類群，并計算出其數(shù)量。4菌落特征5大小、形狀（圓形，假根狀，不規(guī)則狀）表面特征（光滑，皺縮，顆粒狀，龜裂狀，同心圓狀）隆起形狀（擴展，臺狀，凹面，凸面，乳頭狀）邊緣情況（整齊，波狀，裂葉狀，鋸齒狀）表面光澤（無光澤，金屬光澤，閃光）質(zhì)地（油脂狀，膜狀，粘脆）顏色、透明度（P6

圖2-3）6霉菌菌落酵母菌落青霉曲霉大腸桿菌菌落伊紅美藍培養(yǎng)基7A：諾爾斯氏鏈霉菌

B：皮疽諾卡氏菌

C：酒紅指孢囊菌

D：游動放線菌

E：小單胞菌

F：馬杜拉放線菌8放線菌菌落A：卡特利鏈霉菌

B：弗氏鏈霉菌

C：吸水鏈霉菌金淚亞種

D：卡那霉素鏈霉菌

E：除蟲鏈霉菌

F：生磺酸鏈霉菌9產(chǎn)抗菌素的放線菌實

驗

材

料101

土壤樣品2

培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基高氏1號培養(yǎng)基馬鈴薯培養(yǎng)基（PDA培養(yǎng)基）實驗方法與步驟111.平板的制作：將已滅菌的培養(yǎng)基融化，冷卻到40-50℃，倒平板。2.連續(xù)稀釋法分離土壤中的微生物12計算每克土樣中微生物的數(shù)量13選擇剛好能把菌分開，而稀釋倍數(shù)最低的平板（含菌落數(shù)30～300個）計數(shù)。微生物的細胞個數(shù)（個/g）＝平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)土壤克數(shù)微生物分離基本方法及原則14分離微生物時一般是根據(jù)該微生物對營養(yǎng)，pH，氧氣，溫度等要求的不同，供給它們合適的條件或加入某種抑制劑，形成只利于該菌種生長，不利于其他菌種生長的環(huán)境，從而淘汰不需要

的菌種。(1)分離細菌：取10-7、10-8兩個稀釋度各0.2ml加入培養(yǎng)皿中，涂布牛肉膏蛋白胨平板，37℃倒置培養(yǎng)，24小時。(2)15分離霉菌：取10-5、10-6兩個稀釋度各0.2ml，涂布土豆平板（倒平板前在土豆培養(yǎng)基中加入80%的乳酸5滴），28℃倒置培養(yǎng)，3～4天。分離放線菌：取10-5、10-6兩個稀釋度各0.2ml，（制備菌懸液時，應(yīng)先加入10%酚10滴）涂布淀

粉平板，28℃倒置培養(yǎng)，7～10天。3.平板劃線分離法操作要點(1)接種環(huán)與平板表面約成20~30度角。

(2)用力適當，不要劃破培養(yǎng)基.(3)方法A中，每次劃線都要灼燒接種環(huán)。16教

學

內(nèi)

容17制備固體平板培養(yǎng)基。從土樣中分離細菌、霉菌、放線菌，并觀察其菌落特征。在平板上劃線分離混合菌懸液中金黃色葡萄球菌和大腸桿菌。實驗報告及思考題18計算每克土樣中微生物的數(shù)量。為什么在分離霉菌時要加幾滴80％的乳酸？加在何處？為什么在分離放線菌時要加入10％的酚？加在何處？培養(yǎng)微生物時應(yīng)考慮哪些原則？培養(yǎng)時，為什么要把已接種的培養(yǎng)皿倒置保溫？?

1、許多人企求著生活的完美結(jié)局，殊不知美根本不在結(jié)局，而在于追求的過程。?

2、慢慢的才知道：堅持未必就是勝利，放棄未必就是認輸，。給自己一個迂回的空間，學會思索，學會等待，學會調(diào)整。人生沒有假設(shè)，當下即是全部。背不動的，放下了；傷不起的，看淡了；想不通的，不想了；恨不過的，撫平了。?

3、在比夜更深的地方，一定有比夜更黑的眼睛。?

4、一切偉大的行動和思想，都有一個微不足道的開始。?

5、從來不跌倒不算光彩，每次跌倒后能再站起來，才是最大的榮耀。?

6、這個世界到處充滿著不公平，我們能做的不僅僅是接受，還要試著做一些反抗。?

7、一個最困苦、最卑賤、最為命運所屈辱的人，只要還抱有希望，便無所怨懼。?

8、有些人，因為陪你走的時間長了，你便淡然了，其實是他們給你撐起了生命的天空；有些人，分開了，就忘了吧，殘缺是一種大美。?

9、照自己的意思去理解自己，不要小看自己，被別人的意見引入歧途。?

10、沒人能讓我輸，除非我不想贏！?

11、花開不是為了花落，而是為了開的更加燦爛。?

12、隨隨便便浪費的時間，再也不能贏回來。?

13、不管從什么時候開始，重要的是開始以后不要停止；不管在什么時候結(jié)束，重要的是結(jié)束以后不要后悔。?

14、當你決定堅持一件事情，全世界都會為你讓路。?

15、只有在開水里，茶葉才能展開生命濃郁的香氣。?

16、別想一下造出大海，必須先由小河川開始。?

17、不要讓未來