第一節(jié) 概述 臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)

第一節(jié)概論1第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)血液通過(guò)循環(huán)系統(tǒng)與全身各個(gè)組織器官密切聯(lián)系，參與機(jī)體各項(xiàng)生理功能活動(dòng)，維持機(jī)體正常新陳代謝和內(nèi)外環(huán)境平衡。病理情況下，血液系統(tǒng)疾病不僅直接累及血液，亦可影響全身組織器官，全身其他組織器官的病變也可直接或間接地引起血液發(fā)生變化。2第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)全血細(xì)胞計(jì)數(shù)（CBC），俗稱“血常規(guī)”，了解血液中紅細(xì)胞、白細(xì)胞及血小板數(shù)量和形態(tài)以及血紅蛋白濃度等的變化情況。3第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)一、血液生理概要1、血液的組成：血液由血細(xì)胞和血漿組成。血細(xì)胞包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板等；血漿主要由水、電解質(zhì)、蛋白質(zhì)、糖、脂肪、凝血因子等組成。4第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)有形成分血漿血細(xì)胞固體成分水紅細(xì)胞白細(xì)胞血小板血漿蛋白其他無(wú)機(jī)鹽纖維蛋白原清蛋白球蛋白血液血漿血清全血5第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)血漿和血清的區(qū)別血漿：血液加抗凝劑后分離出來(lái)的液體部分。血清：血液離體后自然凝固，分離出來(lái)的液體。血液在凝血過(guò)程中會(huì)消耗某些凝血因子，如凝血因子Ⅰ（纖維蛋白原）、Ⅱ（凝血酶原）、Ⅴ、Ⅷ等，故血清中不含這些凝血因子。6第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)7第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)8第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)9第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)圖5-410第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)2、血液組要的理化性質(zhì)⑴血量：指存在于血液循環(huán)系統(tǒng)中全部血液的總量，相當(dāng)于血漿量和血細(xì)胞量的總和。正常人的血液總量占體重的6%～8%，成人約為4～5升。血量相對(duì)恒定對(duì)機(jī)體正常的生命活動(dòng)具有重要意義。11第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)血量恒定→血壓恒定,是維持全身器官血供的必要條件

失血<10%機(jī)體調(diào)節(jié)機(jī)制可進(jìn)行代償→恢復(fù)

失血≥20%代償不能維持動(dòng)脈血壓，可導(dǎo)致功能障礙→臨床癥狀

失血≥30%出現(xiàn)生命危險(xiǎn)臨床12第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)⑵顏色：血液的紅色來(lái)自紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白。動(dòng)脈血

氧合血紅蛋白含量較高呈鮮紅色靜脈血還原血紅蛋白含量較高呈暗紅色嚴(yán)重貧血患者血液紅色變淺嚴(yán)重CO中毒或氰化物中毒呈櫻紅色高脂膳后血漿呈乳白色溶血患者血漿呈不同程度的紅色13第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)⑶懸浮穩(wěn)定性：健康人循環(huán)血液中的紅細(xì)胞呈均勻混懸狀態(tài)。紅細(xì)胞膜表面的唾液酸根帶有負(fù)電荷，形成的Zeta電位使之相互排斥保持一定的距離。14第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)⑷黏滯性：血液的黏度主要取決于血細(xì)胞的比容和血漿黏度。血漿黏度主要受血漿中纖維蛋白原、球蛋白等大分子蛋白質(zhì)的影響，它們的濃度越高，血漿黏度越高。15第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)⑸比密和滲透濃度:血液的比密---取決于所含紅細(xì)胞的百分比，并和紅細(xì)胞內(nèi)所含血紅蛋白量有關(guān)。血漿的比密---和血漿中蛋白質(zhì)有關(guān)。血漿滲透壓---分為晶體滲透壓和膠體滲透壓，主要由晶體滲透壓構(gòu)成;膠體滲透壓主要來(lái)自清蛋白，且高于組織液中的膠體滲透壓。16第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)⑹PH：正常人血漿的PH為7.35～7.45,血漿酸堿度的相對(duì)穩(wěn)定主要依靠血液中緩沖對(duì)的緩沖作用，以及肺、腎的排泄功能。血漿緩沖對(duì)：NaHCO3/H2CO3紅細(xì)胞緩沖對(duì)：KHb/HHb

17第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)⑺凝固性：將血液從血管中取出，如果未經(jīng)抗凝，通常在數(shù)分鐘內(nèi)便自行凝固，是一系列復(fù)雜的凝血因子相繼被激活的結(jié)果。18第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)3、血液的功能：血液通過(guò)循環(huán)系統(tǒng)與全身組織器官密切聯(lián)系，并參與各種功能活動(dòng)，維持正常的新陳代謝和內(nèi)外環(huán)境的平衡。19第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)⑴運(yùn)輸功能：為血液的基本功能。將肺部吸入的氧氣和來(lái)自消化道吸收的各種營(yíng)養(yǎng)成分，經(jīng)血液運(yùn)輸?shù)饺砀鱾€(gè)臟器和組織。同時(shí)將各個(gè)臟器和組織產(chǎn)生的各種代謝產(chǎn)物，通過(guò)血液輸送到肺、腎等排泄器官排出體外，以保證人體正常的生理功能。20第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)⑵協(xié)調(diào)功能:血液將各種激素、酶類輸送到相關(guān)組織器官，實(shí)現(xiàn)對(duì)全身組織器官功能活動(dòng)的協(xié)調(diào)。21第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)⑶維護(hù)機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定：由于血液通過(guò)循環(huán)與身體各部位廣泛溝通，故對(duì)體內(nèi)的水電解質(zhì)平衡、酸堿平衡和體溫的恒定有著極為重要的作用，使各組織器官有一個(gè)適宜而穩(wěn)定的理化環(huán)境，各種生理活動(dòng)得以順利進(jìn)行。22第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)⑷防御功能：血液中的白細(xì)胞和各種抗體、補(bǔ)體、細(xì)胞因子具有強(qiáng)大的免疫功能。機(jī)體損傷造成出血時(shí)，血液中的血小板、凝血因子起止血和凝血作用。23第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)二、血液標(biāo)本的采集、送檢、保存與處理（一）血液標(biāo)本的采集：1、靜脈采血法：通常用肘部靜脈，也可用手背部、手腕部和外踝部靜脈。幼兒可采用頸外靜脈、股靜脈、大隱靜脈及鎖骨下靜脈等。采血一般取坐位或臥位，不能立位采血，因?yàn)轶w位會(huì)影響水分在血管內(nèi)外的分布，從而影響被測(cè)血液成分的濃度。

壓脈帶捆扎的時(shí)間不應(yīng)超過(guò)1分鐘，否則會(huì)造成血液濃度發(fā)生改變。24第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)普通采血法采血器材：注射器、壓脈帶、墊枕、75%酒精、碘酒、無(wú)菌棉簽(球)25第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)采血步驟：

核對(duì)容器準(zhǔn)備病人準(zhǔn)備體位前臂肘窩正中靜脈采血采血成功后，松止血帶（30s）將血液沿管壁緩慢注入容器松拳，按壓拔針頭。扎止血帶常規(guī)消毒

l5度一30度角26第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)27第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)注意以下問(wèn)題：①為避免溶血，注射器和容器必須干燥，抽血時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生大氣泡，抽血完畢后應(yīng)先拔下針頭，然后將血液沿著管壁徐徐注入容器，需要抗凝時(shí)應(yīng)先與抗凝劑輕輕顛倒混勻，切忌用力振蕩試管；②對(duì)某些特殊的檢查，比如血小板功能試驗(yàn)，為防止血小板激活，要使用塑料注射器或經(jīng)硅化處理后的玻璃試管或塑料試管。28第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)真空采血法器材：采血針和真空采血管29第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)優(yōu)點(diǎn):1、在完全封閉狀態(tài)下采血,避免血液外溢,有利保存。2、標(biāo)準(zhǔn)真空采血管采用國(guó)際通用的頭蓋和標(biāo)簽顏色顯示采血管內(nèi)添加劑種類和試驗(yàn)用途。可根據(jù)需要選擇相應(yīng)的盛血試管30第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)血清生化血庫(kù)試驗(yàn)快速血清分離生化免疫惰性膠體+促凝劑全血血液血常規(guī)試驗(yàn)K2EDTA或K3EDTA血漿凝血試驗(yàn)PT，

TT，凝血因子試驗(yàn)枸櫞酸鈉全血血細(xì)胞沉降率試驗(yàn)血清葡萄糖試驗(yàn)氟化鈉+草酸鉀枸櫞酸鈉

31第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)多管血液采集順序32第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)應(yīng)注意的問(wèn)題：①使用真空采血器前應(yīng)仔細(xì)閱讀廠家說(shuō)明書(shū)，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)要求操作。②刺塞針端的乳膠套能防止拔出采血試管后繼續(xù)流血污染周圍，達(dá)到封閉采血防止污染環(huán)境作用，因此不可取下如膠套。③采血完畢后，先拔下刺塞針端的采血試管，后拔穿刺針端。33第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)2、毛細(xì)血管采血法：（1）器材：微量吸管、稀釋液、消毒器材、采血針34第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)（2）采血部位嬰幼兒：大拇趾或足跟內(nèi)外側(cè)緣耳垂：不宜使用手指：嚴(yán)重?zé)齻颊撸浩つw完整處成人：左手無(wú)名指或中指指端內(nèi)側(cè)(WHO)35第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)1.輕輕按摩采血部位，使其自然充血。75%酒精棉球消毒。2.待酒精揮發(fā)干后，用左手拇指和食指捏緊采血部位，右手持采血針，迅速刺入2～2.5mm。3.擦去第一滴血，按需要依次采血。4.采血完畢，用干棉球壓住傷口片刻。（3）采血步驟36第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)（4）注意事項(xiàng)1.采血部位不能有凍瘡、紫紺、水腫和炎癥等。2.消毒后，待酒精干后采血。3.取血時(shí)切忌用力擠壓。4.手工法時(shí)，采集標(biāo)本的次序?yàn)?PLTRBCHbWBC及分類、血型鑒定

37第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)（5）方法學(xué)評(píng)價(jià)1.操作方便；2.每人的皮膚厚度不同，無(wú)法控制采血刺入的深度；3.常需擠壓誘導(dǎo)，導(dǎo)致組織液混入，影響結(jié)果準(zhǔn)確性；4.標(biāo)本不能重復(fù)應(yīng)用；5.取血量少。38第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)（二）血液標(biāo)本的送檢、保存與處理1、血液標(biāo)本的送檢：血液標(biāo)本的運(yùn)送可采用人工運(yùn)送、軌道傳送或氣壓管道運(yùn)送等，無(wú)論采用哪種運(yùn)送方式，都應(yīng)該注意以下幾個(gè)原則。39第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)⑴唯一標(biāo)識(shí)原則：采集后的血液都應(yīng)具有唯一標(biāo)識(shí)，除編號(hào)外，還包括患者姓名等基本信息，最好的方式是應(yīng)用條形碼。⑵生物安全原則：應(yīng)使用可以反復(fù)消毒的專用容器運(yùn)送，特殊標(biāo)本應(yīng)有特殊標(biāo)識(shí)樣的容器密封運(yùn)送。⑶盡快運(yùn)送原則：標(biāo)本盡快檢驗(yàn)，符合檢驗(yàn)質(zhì)量要求和臨床診治的需求。⑷接收和拒收標(biāo)本原則：對(duì)于確認(rèn)不符合血液采集規(guī)定要求的標(biāo)本，應(yīng)拒絕接收。40第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)41第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)2、血液標(biāo)本保存：應(yīng)當(dāng)在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)、確保標(biāo)本特性穩(wěn)定的條件下，按要求分為室溫保存、冷藏保存、冷凍保存。42第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)⑴血液標(biāo)本保存：標(biāo)本若不能及時(shí)檢測(cè)或需保留以備復(fù)查時(shí)，血液應(yīng)在室溫下保存?？鼓谑覝叵拢琖BC、RBC、PLT可穩(wěn)定24小時(shí)，白細(xì)胞分類可穩(wěn)定6～8小時(shí)，血紅蛋白可穩(wěn)定數(shù)日，但2小時(shí)后粒細(xì)胞形態(tài)即有變化，故盡早推制血片。⑵檢測(cè)后標(biāo)本的保存：根據(jù)標(biāo)本性質(zhì)和要求按照規(guī)定時(shí)間保存。⑶標(biāo)本信息的保存43第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)3、檢驗(yàn)后血液標(biāo)本的處理根據(jù)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》要求：①將操作、收集、運(yùn)輸及處理廢棄物的危險(xiǎn)減至最小。②將其對(duì)環(huán)境的有害作用減至最小。44第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)三、血液標(biāo)本的抗凝用物理或化學(xué)的方法，除掉或抑制血液中的某些凝血因子以阻止血液凝固的方法，稱之為抗凝。能阻止凝固的化學(xué)式稱為抗凝劑。45第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)1、枸櫞酸鈉原理：能與血液中的鈣離子形成可溶性螯合物，從而阻止血液凝固。方法：以1:9的比例用于血栓與止血檢驗(yàn)，以1:4的比例用于魏氏血沉測(cè)定。46第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)2、乙二胺四醋酸鹽（EDTA）原理：有二鈉鹽、二鉀鹽和三鉀鹽，均可與血液中的鈣離子結(jié)合形成螯合物方法：適用于全血細(xì)胞分析和血小板計(jì)數(shù)，不適合用于血小板功能檢查。47第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)3、肝素原理：是一種含有硫酸基團(tuán)的黏多糖，可加強(qiáng)抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）滅活絲氨酸蛋白酶，促進(jìn)其對(duì)凝血因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅹ和凝血酶活性的抑制，抑制血小板聚集方法：具有較強(qiáng)的抗凝能力，不影響血細(xì)胞體積，不影響溶血的優(yōu)點(diǎn)，適用于血細(xì)胞比容和臨床生化的多項(xiàng)檢查。48第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)49第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)4、草酸鈉原理：可以血液中的鈣離子形成草酸鈣沉淀，阻止血液凝固。方法：主要用于血栓與止血的檢查，但目前少用。50第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)5、雙草酸鹽抗凝劑原理：草酸鉀可使紅細(xì)胞體積啊縮小，草酸銨則使紅細(xì)胞脹大，兩者按適當(dāng)?shù)谋攘谢旌虾?，恰好不影響紅細(xì)胞的形態(tài)和體積。方法：可用于血細(xì)胞比容、血細(xì)胞計(jì)數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)等項(xiàng)目的檢查。51第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)四、血涂片的制備

血涂片的顯微檢查是血液細(xì)胞學(xué)檢查的基本方法，臨床上應(yīng)用極為廣泛，特別是對(duì)于各種血液病的診斷具有重要的價(jià)值，近年來(lái)血細(xì)胞分析儀的廣泛應(yīng)用，血涂片的觀察也可作為判斷儀器結(jié)果的簡(jiǎn)易方法。

血涂片的用途：血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)、網(wǎng)織紅、寄生蟲(chóng)檢驗(yàn)。

52第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)1、載玻片的清潔：將載玻片放入肥皂或其他洗滌劑的清水煮沸20分鐘，趁熱將血膜刷洗干凈，再用清水反復(fù)沖洗，干燥備用。新玻片常有游離堿質(zhì)，用重鉻酸鉀洗液或稀鹽酸（濃鹽酸稀釋10倍）浸泡24小時(shí)，再?gòu)氐紫礈?。使用玻片時(shí)，要手持玻片邊緣，以保持玻片干燥、清潔、中性、無(wú)油膩。53第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)2、血液涂片制備將推玻片向1的方向稍抽回，當(dāng)血液充滿推玻片的寬度后，以一定均勻的速度向2的方向滑動(dòng)。54第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)[血涂片質(zhì)量評(píng)價(jià)]一般認(rèn)為：血滴大，速度快、角度大----血膜厚；反之則血膜薄。一張好的血涂片的標(biāo)準(zhǔn)是：厚薄適宜、頭體尾分明、細(xì)胞分布均勻、邊緣整齊、兩側(cè)及兩頭留有空隙。56第一章血液學(xué)一般檢驗(yàn)五、