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文檔簡介

實驗三

大豆制品中脲酶活性的測定2010.10.30一、實驗?zāi)康?、掌握大豆制品中脲酶活性的測定原理2、熟悉掌握用PH增值法測定大豆制品中脲酶活性二、

測定原理

將粉碎的大豆制品與中性尿素緩沖溶液混合，在30℃保持30分鐘，尿素酶催化尿素水解產(chǎn)生氨，由于尿素水解釋放的氨是堿性的，可使溶液PH值升高，試樣溶液與空白溶液的PH值之差，即可間接表示出氨量的多少。

NH2CONH2+

尿素酶

2NH3↑+CO2三、儀器及試劑1、儀器分析天平、樣品粉碎機、樣品分析篩、恒溫水浴、酸度計、稱量瓶、移液管、角匙等0.05mol/L磷酸鹽緩沖液、尿素緩沖溶液等2、試劑四、試樣的選取和制備

選取具有代表性的試樣，粉碎至40目，用“四分法”縮減至200～300g，密閉保存，以防試樣組分變化或變質(zhì)。五、測定步驟1、樣品試驗：準(zhǔn)確稱取0.200±0.001g樣品于稱量瓶中，加入10ml尿素緩沖溶液，加塞混合，然后置于30℃水浴中，在混合操作時稱量瓶切勿倒置。2、空白試驗：準(zhǔn)確稱取0.200±0.001g樣品于稱量瓶中，加入10ml0.05mol/L磷酸鹽緩沖溶液，加塞混合，置于30℃水浴中。3、樣品試驗與空白試驗的制備應(yīng)相隔5分鐘，并且每隔5分鐘攪拌內(nèi)容物一次。4、30分鐘后，相隔5分鐘將樣品與空白試驗的稱量瓶從水浴中取出，將上層液體移入5ml燒杯中，在從水浴中取出剛達(dá)5分鐘時，分別測定此種上層液體的PH值。

1、計算公式：六、結(jié)果的計算

樣品試驗的PH值與空白試驗的PH值兩者之間的差異，則為脲酶活性的指數(shù)，即：脲酶活性=試樣的PH測定值-空白的PH測定值

每個樣品應(yīng)取兩個平行樣測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。

2、重復(fù)性：七、注意事項1、關(guān)于酸度計的使用BACK2、稱量瓶應(yīng)塞緊3、關(guān)于固定質(zhì)量稱量法4、通常：

0.02<△PH≤0.3加工適度

△

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