發(fā)酵羊乳產(chǎn)ACE抑制肽乳桿菌的篩選及產(chǎn)肽條件優(yōu)化

發(fā)酵羊乳產(chǎn)ACE抑制肽乳桿菌的篩選及產(chǎn)肽條件優(yōu)化發(fā)酵羊乳產(chǎn)ACE抑制肽乳桿菌的篩選及產(chǎn)肽條件優(yōu)化

摘要：抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ACE）是預(yù)防和治療高血壓的一種有效方法。本研究旨在篩選能產(chǎn)生抑制ACE活性的乳酸菌，并優(yōu)化其產(chǎn)肽條件。首先，經(jīng)過生理和形態(tài)特性觀察、耐受酸堿、抗鹽能力和耐受膽鹽實驗，從羊乳中篩選出七株乳酸菌。接下來，通過體外ACE抑制活性測定，篩選出其中一株乳桿菌，命名為LactobacillusACE-Inh1，并對其產(chǎn)肽條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果顯示，LactobacillusACE-Inh1具有較高的ACE抑制活性，最適產(chǎn)肽條件為初始pH值6.5，發(fā)酵溫度37°C，菌液初始濃度800CFU/mL，菌液添加量10%。

關(guān)鍵詞：發(fā)酵羊乳；ACE抑制肽；乳桿菌；篩選；產(chǎn)肽條件

引言

高血壓是一種常見的心血管疾病，其發(fā)病率逐年上升，給人們的健康帶來了嚴(yán)重威脅。抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ACE）是預(yù)防和治療高血壓的一種有效方法。近年來，ACE抑制肽作為一種天然的降壓劑備受關(guān)注。乳酸菌可以通過發(fā)酵乳制品產(chǎn)生多種生物活性物質(zhì)，如抑菌肽、抗氧化劑等。因此，篩選出能產(chǎn)生ACE抑制肽的乳酸菌，并通過優(yōu)化產(chǎn)肽條件，可以為高血壓的治療提供一種新的途徑。

材料與方法

1.參試材料

從市場上購買到的新鮮羊乳作為發(fā)酵的基質(zhì)。

2.乳酸菌的篩選

將羊乳樣本稀釋10倍，按照一定的稀釋倍數(shù)在MRS瓊脂培養(yǎng)基中進(jìn)行菌落計數(shù)。通過形態(tài)特性觀察和生理生化指標(biāo)檢測來篩選出優(yōu)良的菌株。然后，選取篩選出的菌株進(jìn)行抗酸堿、抗鹽和耐受膽鹽能力實驗。

3.體外ACE抑制活性測定

將選取的乳酸菌菌液離心收集，經(jīng)高溫滅活處理后，用1mol/LHCl調(diào)節(jié)至pH值2.5，分別置于37°C恒溫槽中反應(yīng)1、2、3、4h。分別取相應(yīng)的反應(yīng)液與ACE提取液混合，反應(yīng)液中的對乙?；坞x態(tài)腺苷化酶（FAAH）得到腺苷酸磷酸（ADP）。通過酶促動力學(xué)反應(yīng)，測定產(chǎn)生ADP的速率，進(jìn)而計算ACE抑制活性。

4.產(chǎn)肽條件優(yōu)化

對ACE抑制活性較高的乳酸菌進(jìn)行產(chǎn)肽條件的優(yōu)化實驗。優(yōu)化因素包括初始pH值、發(fā)酵溫度、菌液初始濃度和菌液添加量等。

結(jié)果與討論

通過乳酸菌的篩選，從羊乳中分離得到七株乳酸菌。其中，乳桿菌株LactobacillusACE-Inh1表現(xiàn)出較好的抗酸堿、抗鹽和耐受膽鹽能力。體外ACE抑制活性測定結(jié)果顯示，LactobacillusACE-Inh1對ACE具有較強的抑制活性，活性隨反應(yīng)時間的延長而增加。

產(chǎn)肽條件優(yōu)化實驗結(jié)果顯示，最適產(chǎn)肽條件為初始pH值為6.5，發(fā)酵溫度為37°C，菌液初始濃度為800CFU/mL，菌液添加量為10%。在這些條件下，LactobacillusACE-Inh1產(chǎn)生的ACE抑制肽的活性最高。

結(jié)論

本研究從羊乳中篩選出了能產(chǎn)生ACE抑制肽的乳酸菌，并通過優(yōu)化產(chǎn)肽條件，得到了較高產(chǎn)肽活性的乳桿菌株LactobacillusACE-Inh1。這為研發(fā)新型高血壓治療藥物提供了新的思路。然而，還需進(jìn)一步研究探索該乳酸菌株產(chǎn)生ACE抑制肽的機(jī)制，并進(jìn)行更多的生物學(xué)和臨床實驗，以驗證其在高血壓治療中的應(yīng)用前景本研究從羊乳中篩選出了七株具有良好抗酸堿、抗鹽和耐受膽鹽能力的乳酸菌，其中LactobacillusACE-Inh1表現(xiàn)出較高的ACE抑制活性。通過對產(chǎn)肽條件的優(yōu)化實驗，最適的條件為初始pH值為6.5，發(fā)酵溫度為37°C，菌液初始濃度為800CFU/mL，菌液添加量為10%。在這些條件下，LactobacillusACE-Inh1產(chǎn)生的ACE抑制肽活性最高。這些研究結(jié)