關(guān)木通中兩個(gè)苯丙素類化合物

關(guān)木通中兩個(gè)苯丙素類化合物

關(guān)木通系馬手柑科東北馬手柑科的干燥木質(zhì)藤本植物主要產(chǎn)于中國(guó)東北。這是一種常用的中藥。它具有凈化心臟、方便、平滑大便、經(jīng)絡(luò)和提取乳液的功效。這項(xiàng)工作是對(duì)馬手柑酸化合物的提取、分離和識(shí)別。其中三個(gè)是新天然產(chǎn)物。根據(jù)fenton反應(yīng)和esr譜檢測(cè)，化合物3.7具有去除羥基自由基的能力。此外，化合物4也具有一定的脫離性能力，能夠識(shí)別dpph自由基。1結(jié)果與討論1.1abx-4-3,4-三取代苯環(huán)化合物1,3,4-5-氧-4-甲基苯環(huán),5,9,9,10,7,7,7,8位苯磺酸鹽1,3,4-3,4-3,4-8-羥基前環(huán)2,3,4-5,7,4-3,4-3,4-3,4-3,4-5,7,4-5,7,4-5,7,4-3,4-3,4-5,7,4-5,7,4-3,4-8,3,4-5,7,4-5,7,4-3,4-3,4-3,4-5,7,4-3,4-3,4-5,7,4-3,4-3,4-5,3,4-5,3,4-3,4-5,3,4-8-10,3,4-5,7,4-10,3,4-10,3,4-10,7,4-10,7,4-10,7,4-10,7,4-10,3,4-5,7,4-10,3,4-5,7位立體化學(xué)成像10.化合物1為無色油狀物.EIMS顯示分子離子峰[M+]為376,主要碎片峰為196和179.結(jié)合1HNMR和13CNMR譜確定其分子式為C20H24O7.IR光譜顯示分子內(nèi)含有羥基(3392cm-1),雙鍵(1648cm-1),苯環(huán)(1601,1507,1461cm-1)以及C-O-C鍵(1266,1030cm-1).1HNMR譜顯示存在兩個(gè)甲氧基:W3.84(6H,s),一個(gè)反式丙烯醇側(cè)鏈:W6.55(1H,d,J=16.0Hz,H-7′),W6.28(1H,dt,J=16.0,5.5Hz,H-8′),W4.23(2H,dd,J=5.5,1.5Hz,H-9′)和兩組ABX系芳環(huán)質(zhì)子:W7.06(1H,d,J=1.5Hz,H-2),W6.76(1H,d,J=8.0Hz,H-5),W6.87(1H,dd,J=8.0,1.5Hz,H-6),W6.91(1H,d,J=1.0Hz,H-2′),W6.80(1H,d,J=8.0Hz,H-5′),W7.04(1H,dd,J=8.0,1.0Hz,H-6′),表明分子中含兩個(gè)1,3,4-三取代苯環(huán).根據(jù)以上信息推斷化合物1為8-O-4′新木脂素.1HNMR譜中的W4.87(1H,d,J=5.5Hz,H-7)和W4.40(1H,m,H-8)以及13CNMR中的W74.4(C-7)和W86.5(C-8)是8-O-4′新木脂素的7位和8位的特征信號(hào).7位和8位的立體化學(xué)根據(jù)1HNMR和13CNMR譜數(shù)據(jù)可進(jìn)一步確定如下.在7位取代的8-O-4′新木脂素中,可以有赤式(erythro)和蘇式(threo)兩種構(gòu)象,可根據(jù)H-7和H-8的化學(xué)位移及偶合常數(shù)來區(qū)別.由于7位羥基(OH)和8位氧原子(O)形成氫鍵,當(dāng)H-7和H-8二面角為60°時(shí),J7,8為小偶合(約4.0Hz),H-7和H-8的化學(xué)位移在相對(duì)低場(chǎng)(WH-74.83,WH-84.33),為erythro型;當(dāng)二面角為180°時(shí),J7,8為大偶合(約8.0Hz),H-7和H-8的化學(xué)位移在相對(duì)高場(chǎng)(WH-74.65,WH-84.03),為threo型.根據(jù)化合物1的J7,8=5.5Hz(小偶合),WH-74.87,WH-84.40(相對(duì)低場(chǎng)推斷為赤式異構(gòu)體1.2化合物2位的確定化合物2為無色油狀物.FAB-MS顯示分子離子峰為406,結(jié)合1HNMR和13CNMR確定分子式為C21H26O8.IR光譜顯示分子內(nèi)含有羥基(3428cm-1),雙鍵(1664cm-1),苯環(huán)(1581,1509,1459cm-1)和C-O-C鍵(1272,1123,1031cm-1),與化合物1非常相似,比較二者的1HNMR和13CNMR譜(表1,表2),差別在于化合物2比1多一個(gè)甲氧基,少一個(gè)芳香質(zhì)子,且此甲氧基在芳環(huán)上的位置使芳環(huán)形成一個(gè)對(duì)稱取代結(jié)構(gòu).進(jìn)一步比較確定此甲氧基連在帶有丙烯醇側(cè)鏈的苯環(huán)上,即苯氧基的5′位.同樣的,根據(jù)J7,8=5.5Hz(小偶合),WH-74.96,WH-84.26(相對(duì)低場(chǎng)),推斷化合物2為赤式異構(gòu)體.綜上所述并與文獻(xiàn)對(duì)照,確定化合物2為1-(4-羥基-3-甲氧基-苯基)-2-{2,6-二甲氧基-4-[1-(E)-丙烯-3-醇]-苯氧基}-丙烷-1,3-二醇(赤式).1.3目標(biāo)化合物13cnmr的結(jié)構(gòu)表征化合物3～7在紫外燈下觀察都有深藍(lán)色熒光,H2SO4試劑顯色為黃色或黃褐色,Molish反應(yīng)和FeCl3試驗(yàn)均顯陽性,表明分子中存在糖基和酚羥基.IR均顯示有羥基(3330～3382cm-1),共軛?；?1690,1260cm-1),雙鍵和苯環(huán)骨架(1603,1516,1442cm-1).UV光譜也較為相似,在210,230,310nm左右有吸收峰.1HNMR在W6.7～7.6范圍內(nèi)出現(xiàn)兩對(duì)磁等價(jià)芳香質(zhì)子信號(hào)(除化合物4為ABX系統(tǒng),即1,3,4-三取代苯環(huán)),表明結(jié)構(gòu)中存在1,4-二取代苯環(huán);W6.4～7.6范圍內(nèi)有一對(duì)偶合雙峰(J=16.0Hz),為反式雙鍵;在W4.2～5.2之間出現(xiàn)糖端基質(zhì)子信號(hào).綜上所述,推斷3～7(除4外)的結(jié)構(gòu)中存在對(duì)位取代的桂皮?；吞?(1HNMR,13CNMR數(shù)據(jù)見表3,表4).化合物3為白色無定形粉末,FAB-MS(neg.)給出[M-H]-峰為325,結(jié)合1HNMR,13CNMR和APT推斷分子式為C15H18O8.1HNMR顯示兩個(gè)糖的端基質(zhì)子信號(hào):W5.03(1H,,J=4.0,-1T)和W4.17(1,,J=8.5,-1U),13譜中的糖信號(hào)也是成對(duì)出現(xiàn),表明糖的1位羥基是游離的,存在T和U兩種構(gòu)型.根據(jù)糖片斷的C-6向低場(chǎng)位移約W3而C-5向高場(chǎng)位移約W2,推斷?；B在糖的6位.經(jīng)與文獻(xiàn)對(duì)照,確定3的結(jié)構(gòu)為6-氧-(E)-對(duì)羥基桂皮酰葡萄糖(T,U).化合物4為白色顆粒固體,FAB-MS(neg.)給出[M-H]-為355,結(jié)合1HNMR,13CNMR和DEPT推斷分子式為C16H20O9.通過比較化合物4與3的波譜數(shù)據(jù),推斷4是以阿魏?；〈?中的對(duì)羥基桂皮?；?根據(jù)糖的C-6和H-6的化學(xué)位移均向低場(chǎng)移動(dòng),確定阿魏?；B接在糖的6位上.經(jīng)與文獻(xiàn)對(duì)照,確定4的結(jié)構(gòu)為6-氧-(E)-阿魏酰葡萄糖(T,U).化合物5和6為白色無定形固體,FAB-MS(neg.)給出[M-H]-為353(基峰).結(jié)合1HNMR,13CNMR和DEPT推斷分子式為C17H22O8.1HNMR和13CNMR譜顯示5和6的結(jié)構(gòu)極為相似,信號(hào)均成對(duì)出現(xiàn).1HNMR顯示二者的差別在于對(duì)羥基桂皮?；?位和8位烯鍵質(zhì)子的化學(xué)位移和偶合常數(shù)不同.化合物5的7位和8位質(zhì)子信號(hào)出現(xiàn)在低場(chǎng)且偶合常數(shù)大:W7.55,6.41(d,J=16.0Hz),為反式烯鍵,化合物6的7位和8位質(zhì)子信號(hào)出現(xiàn)在高場(chǎng)且偶合常數(shù)小:W6.85,5.77(d,J=13.0Hz),為順式烯鍵.通過與化合物3對(duì)比,確定對(duì)羥基桂皮?；B在糖的6位上.13CNMR譜中,除了?；瑪嗪吞瞧瑪嘈盘?hào)外,還有一個(gè)甲基信號(hào)和一個(gè)連氧亞甲基信號(hào):W15.3(CH3)和W63.7(CH2),1HNMR譜中有一對(duì)很相似的乙氧基信號(hào):W1.11(t,J=7.0Hz,CH3),W1.09(t,J=7.0Hz,CH3)和W3.72(m,OCH2),表明糖上還連有一個(gè)乙基.根據(jù)13CNMR中糖的C-1信號(hào)向低場(chǎng)位移到W102.7,可以確定此乙基連接在糖的1位上,且受到6位的對(duì)羥基桂皮?；捻樂串悩?gòu)的影響而出現(xiàn)成對(duì)信號(hào).進(jìn)而,根據(jù)1HNMR中糖的端基質(zhì)子信號(hào):W4.17(1H,d,J=7.5Hz)確定糖的構(gòu)型為U.則確定5和6為6-O-對(duì)羥基桂皮?；咸烟且一暗捻樂串悩?gòu)體(混合物).5為6-氧-(E)-對(duì)羥基桂皮酰-1-U-乙基-葡萄糖甙,6為6-氧-(Z)-對(duì)羥基桂皮酰-1U-乙基-葡萄糖甙.根據(jù)1HNMR譜中的積分面積,確定化合物5和6的比例約為5∶2,它們是新的天然產(chǎn)物.化合物7為淡褐色無定形粉末,FAB-MS(neg.)給出[M-H]-峰為325(基峰),結(jié)合1,13推斷分子式為15188.與化合物3對(duì)照,數(shù)據(jù)很相似,差別在于酰基與葡萄糖的連接位置不同,根據(jù)糖片斷的C-3向低場(chǎng)位移約W2,C-2和C-4均向高場(chǎng)位移約W2,確定對(duì)羥基桂皮?；B接在糖的3位上.于是,確定7的結(jié)構(gòu)為3-氧-(E)-對(duì)羥基桂皮酰葡萄糖(T,U),本文首次報(bào)道了它的13CNMR數(shù)據(jù).1.4dpph自由基的篩選利用順磁共振方法對(duì)化合物3～7進(jìn)行了清除羥自由基活性研究,發(fā)現(xiàn)它們普遍具有清除羥基自由基的能力,其中5和6的清除能力最強(qiáng),IC50為0.35mmol/L,化合物7次之,IC50為1.0mmol/L.DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)自由基也是常用的自由基清除劑篩選模型,測(cè)試發(fā)現(xiàn)化合物4有一定的清除DPPH自由基能力,但小于天然抗氧化劑咖啡酸和維生素E.2實(shí)驗(yàn)部分2.1光譜、紫外及核磁共振測(cè)定熔點(diǎn)用Kofler顯微熔點(diǎn)儀測(cè)定(溫度計(jì)未校正);紅外用PE-983G紅外光譜儀測(cè)定;紫外用DMS-200紫外光譜儀測(cè)定;核磁用INOVA-500核磁共振儀測(cè)定;質(zhì)譜用AEIMS-50SD90(EIMS)和VGZabspecE質(zhì)譜儀(HRMS)測(cè)定.薄層層析和柱層析硅膠使用青島海洋化工廠產(chǎn)品.2.2n-苯基雙環(huán)芳烴3-5-信-2-mehs的合成關(guān)木通飲片(5.0kg,1996年8月購(gòu)自北京海淀區(qū)藥材批發(fā)站,由北京醫(yī)科大學(xué)生藥教研室李勝華教授鑒定)粉碎后用石油醚熱提4次(每次4h,t<50℃)除蠟脫脂,再用乙酸乙酯熱提4次(每次4h,t<50℃),減壓濃縮得乙酸乙酯提取物47g.乙酸乙酯提取物經(jīng)硅膠柱層析V(CH2Cl2)∶V(MeOH)=(25∶1)～(1∶1)梯度洗脫得化合物3(22mg)和4(25mg),再經(jīng)硅膠柱層析V(石油醚)∶V(丙酮)=1∶1和反相硅膠柱層析V(甲醇)∶V(水)=6∶4得化合物1(12mg)和2(10mg).剩余部分繼續(xù)用LH-20(MeOH),V(CH2Cl2)∶V(MeOH)=20∶1及反相硅膠柱層析V(甲醇)∶V(水)=(6∶4)～(9∶1)得化合物7(18mg)以及混合物5和6(20mg).2.3化合物34-羥基-3-甲基-4-e-丙氧基-2-3-氧-2-e-3-基-2-3-3-氧合2e-2,3-四氫-3-3-氧氫氧基-2,3-四氫-3-3-氧氫氧基-2,3-四氫-3-3-氧氫氧基-2,3-四氫-3-3-氧-2-3-氧-2-3-氧-2-3-氧-2,3-氧-2,3-o-3-3-氧-2,3-o-3-3-氧-2,3-o-3-3-氧甲基甲基-3,3-四氫-3-3-氧-2,3-o-3-3-氧-2,3-硫基甲基-3,3-5e,3--3,3-四氫-3-3--3,3--3,3-四氫-3-3--3,3--3,3-3-3--3-3-3--3-3--3-,3--3-,3-5-3--3-,3--3-,3-5-3--3-5-3--3-,3--3,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-5e,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,3-,化合物1,2的1HNMR和13CNMR數(shù)據(jù)見表1,表2.3～7的1HNMR和13CNMR數(shù)據(jù)見表3,表4.化合物11-(4-羥基-3-甲氧基-苯基)-2-{2-甲氧基-4-[1-(E)-丙烯-3-醇]-苯氧基}-丙烷-1,3-二醇(赤式),無色油狀物,[T]D23+6.3°(MeOHc0.1),IRνmax(NaCl涂片)cm-1:3392(OH),2917,2848(C-H),1648,1601,1507,1461(Ar,C-C),1266,1030(C-O-C),1156,1126,858,734.UVλmaxMeOHnm(logX):208(4.37),281(3.84).EIMS(m/z):376[M+],358,340,328,206,196,179,137,124,91,77.化合物21-(4-羥基-3-甲氧基-苯基)-2-{2,6-二甲氧基-4-[1-(E)-丙烯-3-醇]-苯氧基}-丙烷-1,3-二醇(赤式),無色油狀物,[T]D23+12.3o(MeOHc0.1),IRνmax(NaCl涂片)cm-1:3428(OH),2917,2848(C-H),1664,1581,1509,1459(Ar,CC),1272,1123,1031(C-O-C).UVλmaxMeOHnm(logX):226(4.25),276(3.81).FABMS(m/z):429[M+Na]+,406[M]+.化合物36-O-(E)-對(duì)羥基桂皮?；?葡萄糖,白色顆粒固體,Molish反應(yīng)顯陽性,mp.190～195℃.[T]D20+26.1(MeOHc0.1).IRνmaxKBrcm-1:3330(OH),1693(C=O),1607,1516,1442(Ar),1334,1307,1276,1255～1026,819.UVλmaxMeOHnm(logε):212(4.06),228(4.05),312(4.31).FABMS(Neg,m/z):325[M-H]-.1HNMRLarixleptolepis1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-{2-methoxy-4-[1-(E)-propen-3-ol]-phenoxy}-propan-1,3-diol(erythro),[T]D22-6.7(MeOH,c0.53),但它們旋光相反,化合物1為[T]D23+6.3(MeOH,c0.1),表明二者互為旋光異構(gòu)體.化合物1為新的天然產(chǎn)物,命名為1-(4-羥基-3-甲氧基-苯基)-2-{2-甲氧基-4-[1-(E)-丙烯-3-醇]-苯氧基}-丙烷-1,3-二醇(赤式).化合物46-O-(E)-阿魏?；?葡萄糖,白色顆粒固體,Molish反應(yīng)顯陽性,mp.163～169℃.[T