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中文名稱:人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒英文名稱:HumanInterleukin2,IL-2ELISAkit規(guī)格:48T/96T儲存溫度::-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)有效期:6個月產品供應商:上海遠慕生物實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中樣本水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP標記的抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中樣本濃度。ELISA各種樣本收集、處理、保存方法1.血清標本收集、處理、保存方法:用無熱原、無內毒素的試管或離心管采集血液標本,全血標本室溫放置1-2h或4℃過夜,然后4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。2.血漿標本收集、處理、保存方法:根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素鈉或枸緣酸鈉作為抗凝劑,用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標本,室溫混合20min左右,然后4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清即為血漿。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。3.尿液標本收集、處理、保存方法:用干凈容器收集尿液,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。4.唾液標本收集、處理、保存方法:用干凈離心管收集唾液,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。5.細胞標本收集、處理、保存方法:(1)細胞培養(yǎng)上清取細胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。(2)細胞裂解液收集細胞培養(yǎng)液,4℃、3000rpm/min離心20min,棄去上清,用預冷的PBS(0.01M,PH7.4)洗滌三次。加入適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通過反復凍融,使細胞充分裂解。然后4℃、10000rpm/min離心20min,除去細胞碎片,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。6.植物標本收集、處理、保存方法:取適量大小組織塊(一般0.2-0.5g),用預冷的PBS緩沖液(0.01M,PH7.4)漂洗三次,濾紙拭干水分。準確稱重,放入勻漿管中,加入4倍體積的勻漿介質(0.05mol/LTris-HCl,pH7.4PBS緩沖液)于勻漿管中,冰水浴條件下,剪碎組織塊,手工勻漿或機器勻漿,制成勻漿液。4℃、10000rpm/min離心20min,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。7.糞便標本收集、處理、保存方法:采集時用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中,向離心管中加入適量PBS緩沖液(0.01M,PH7.4),攪拌均勻。然后4℃、10000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。8.組織標本收集、處理、保存方法:將組織樣本用PBS緩沖液(0.01M,PH7.4)沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質。將組織塊稱重,記錄后剪碎(碎塊盡量?。?。將組織按一定的比例(通常組織重量:PBS體積=1:9)加入預冷的PBS緩沖液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)中勻漿,勻漿時置于冰上。吸取勻漿液到離心管中,4℃、10000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。注意事項1.ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含
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