【智慧測(cè)評(píng)】2015高考生物(人教版)總復(fù)習(xí)課件:選修3-第1講-基因工程_第1頁
【智慧測(cè)評(píng)】2015高考生物(人教版)總復(fù)習(xí)課件:選修3-第1講-基因工程_第2頁
【智慧測(cè)評(píng)】2015高考生物(人教版)總復(fù)習(xí)課件:選修3-第1講-基因工程_第3頁
【智慧測(cè)評(píng)】2015高考生物(人教版)總復(fù)習(xí)課件:選修3-第1講-基因工程_第4頁
【智慧測(cè)評(píng)】2015高考生物(人教版)總復(fù)習(xí)課件:選修3-第1講-基因工程_第5頁
已閱讀5頁,還剩41頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

選修③現(xiàn)代生物科技專題

第一講基因工程課前自主學(xué)習(xí)拓展:質(zhì)粒載體質(zhì)粒是細(xì)菌擬核DNA外的環(huán)狀DNA小分子,可在細(xì)菌間轉(zhuǎn)移。質(zhì)粒是常用的轉(zhuǎn)基因載體。病毒載體病毒很適合用于基因治療。病毒的蛋白質(zhì)外殼內(nèi)能容納多達(dá)7500個(gè)堿基的DNA片段。當(dāng)病毒侵染宿主細(xì)胞并在細(xì)胞內(nèi)增殖時(shí),也將重組DNA帶入到細(xì)胞中。病毒已經(jīng)用于多次基因治療的臨床實(shí)驗(yàn)。這種方法存在的問題是宿主對(duì)病毒的免疫反應(yīng)。拓展:顯微注射,DNA可以通過顯微注射轉(zhuǎn)入動(dòng)物細(xì)胞中。下圖所示的是目的基因的多份拷貝正通過玻璃微型吸管注射到受精卵中。轉(zhuǎn)基因小鼠和家畜都是利用這種方法產(chǎn)生的,但是成功率很低;只有2%~3%的受精卵發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,在這些動(dòng)物中只有一小部分表達(dá)了轉(zhuǎn)入的基因。

基因槍法,這種方法是利用壓縮氣體產(chǎn)生的動(dòng)力將包裹在金屬顆粒表面的外源DNA打入生物組織中。常用的金屬顆粒有金粉粒子或鎢粉粒子。一些細(xì)胞能像表達(dá)自身基因一樣表達(dá)導(dǎo)入的外源DNA。課堂互動(dòng)探究1.“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶),(1)存在:主要存在于原核生物中。(2)特性:一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列,并且能在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子?;蚬こ痰幕静僮鞴ぞ?4)切割后末端的種類:DNA分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式——黏性末端和平末端(如圖所示)。當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時(shí),產(chǎn)生的是黏性末端,而當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中軸線處切開時(shí),產(chǎn)生的則是平末端。2.“分子縫合針”——DNA連接酶種類E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶來源大腸桿菌T4噬菌體功能特性只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來縫合兩種末端,但連接平末端的效率較低相同點(diǎn)都縫合磷酸二酯鍵,如圖3.“分子運(yùn)輸車”——載體(1)載體具備的條件:①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切點(diǎn),供外源DNA片段插入。③具有標(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌擬核之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(3)其他載體:λ噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。[特別提醒]

①獲取目的基因和切割載體時(shí)使用同一種限制酶,目的是產(chǎn)生相同的黏性末端。②獲取一個(gè)目的基因需限制酶剪切兩次,共產(chǎn)生4個(gè)黏性末端或平末端。③限制酶切割位點(diǎn)的選擇必須保證標(biāo)記基因的完整性,以便于檢測(cè)。1.據(jù)圖表回答問題:幾種限制酶識(shí)別序列及切割位點(diǎn)表(1)假設(shè)所用的限制酶均能將所識(shí)別的位點(diǎn)完全切開,采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切含有目的基因的DNA,能得到________種DNA片段。如果將質(zhì)粒載體和含目的基因的DNA片段只用EcoRⅠ酶切,酶切產(chǎn)物再加入DNA連接酶,其中由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有________、________、________。限制酶SmaⅠEcoRⅠPstⅠ切割位點(diǎn)CCC↓GGGGGG↑CCCG↓AATTCCTTAA↑GCTGCA↓GG↑ACGTC(2)為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體酶切后的末端任意連接,酶切時(shí)應(yīng)該選用的酶是________、________。解析:(1)含目的基因的DNA分子上含有2個(gè)EcoRⅠ和1個(gè)PstⅠ的酶切位點(diǎn),三個(gè)切點(diǎn)全部切開,則形成4種DNA片段。質(zhì)粒與含目的基因的DNA片段都用EcoRⅠ切割,目的基因兩端和質(zhì)粒的切口處的黏性末端相同,只考慮兩個(gè)DNA片段相連,則會(huì)形成三種連接產(chǎn)物,即質(zhì)粒與質(zhì)粒相連、質(zhì)粒與目的基因相連、目的基因與目的基因相連。為了防止自連,可選用EcoRⅠ和SmaⅠ兩種酶同時(shí)切割。答案:(1)4質(zhì)粒載體—質(zhì)粒載體連接物目的基因—目的基因連接物質(zhì)粒載體—目的基因連接物(2)EcoRⅠ

SmaⅠ基因工程的操作程序及與蛋白質(zhì)工程的比較1.基因工程的操作程序分析(1)目的基因的獲取途徑①?gòu)淖匀唤缰幸延械奈锓N中分離出來,如從基因組文庫(kù)或cDNA文庫(kù)中獲取。②人工合成目的基因常用的方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。③利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因通過PCR技術(shù)可對(duì)已獲取的目的基因進(jìn)行擴(kuò)增,以獲取大量的目的基因。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建拓展:①插入的目的基因的表達(dá)需要調(diào)控序列,因而用作載體的質(zhì)粒的插入基因部位之前需有啟動(dòng)子,之后需有終止子。②兩次使用的限制酶為同一種酶,這樣形成的黏性末端堿基之間互補(bǔ),便于連接。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(轉(zhuǎn)化)生物種類植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射技術(shù)Ca2+處理法受體細(xì)胞體細(xì)胞受精卵原核細(xì)胞轉(zhuǎn)化過程將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上→農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→整合到受體細(xì)胞的DNA上→表達(dá)將含有目的基因的表達(dá)載體提純→取卵(受精卵)→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動(dòng)物Ca2+處理細(xì)胞→感受態(tài)細(xì)胞→重組表達(dá)載體DNA分子與感受態(tài)細(xì)胞混合→感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定類型檢測(cè)內(nèi)容方法結(jié)果顯示分子檢測(cè)導(dǎo)入檢測(cè)目的基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞DNA分子雜交(DNA和DNA之間)雜交帶轉(zhuǎn)錄檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA分子雜交(DNA和mRNA之間)雜交帶翻譯檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原—抗體雜交雜交帶個(gè)體水平檢測(cè)包括做抗蟲、抗病的接種實(shí)驗(yàn),以確定是否有抗性以及抗性的程度;對(duì)基因工程產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能進(jìn)行活性比較,以確定功能活性是否相同2.基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較項(xiàng)目區(qū)別與聯(lián)系蛋白質(zhì)工程基因工程區(qū)別過程預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列獲取目的基因→構(gòu)建基因表達(dá)載體→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定實(shí)質(zhì)定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性,以獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品結(jié)果可生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)只能生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系(1)蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上,延伸出來的第二代基因工程(2)基因工程中所利用的某些酶需要通過蛋白質(zhì)工程進(jìn)行修飾、改造2.(2011·山東高考)人類疾病的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型常用于致病機(jī)理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如下圖所示。(1)卵母細(xì)胞除從活體輸卵管中采集外,還可從已處死的雌鼠________中獲取。(2)圖中的高血壓相關(guān)基因作為__________,質(zhì)粒作為________,二者需用________切割后連接成重組載體,該過程與質(zhì)粒上含有________有關(guān)。(3)子代大鼠如果________和________,即可分別在分子水平和個(gè)體水平上說明高血壓相關(guān)基因已成功表達(dá),然后可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型。(4)在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過程中,所用到的主要胚胎工程技術(shù)是________、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。解析:本題主要考查基因工程、胚胎工程的相關(guān)知識(shí),意在考查理解能力與綜合運(yùn)用能力。(1)卵母細(xì)胞可以從活體的輸卵管中采集,也可以從處死的雌鼠的卵巢中獲取。(2)根據(jù)題圖可以判斷高血壓相關(guān)基因?yàn)槟康幕?,質(zhì)粒是載體,二者需用同種限制酶切割后連接成重組載體,該過程需要目的基因和質(zhì)粒上有限制酶能識(shí)別的切割位點(diǎn)。(3)檢測(cè)高血壓相關(guān)基因是否表達(dá),在分子水平上可檢測(cè)對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì)是否合成,在個(gè)體水平上可觀察其是否表現(xiàn)出相應(yīng)的性狀。(4)從題圖中可以看出,所用到的胚胎工程技術(shù)主要有體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。答案:(1)卵巢(2)目的基因載體同種限制性核酸內(nèi)切酶(或:同種限制酶)限制酶切割位點(diǎn)(3)檢測(cè)到體內(nèi)有相關(guān)蛋白出現(xiàn)高血壓(4)體外受精1.如圖所示為部分雙鏈DNA片段,下列有關(guān)基因工程中工具酶功能的敘述錯(cuò)誤的是(

)A.切斷a處的酶為限制酶B.連接a處的酶為DNA連接酶C.切斷b處的酶為解旋酶D.連接b處的酶為RNA聚合酶解析:限制酶能識(shí)別特定的核苷酸序列,并且能在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子,通常形成黏性末端,即能切割DNA鏈外側(cè)的磷酸二酯鍵(圖中的a處),內(nèi)側(cè)堿基對(duì)之間的氫鍵(b處)可通過解旋酶解開。DNA連接酶將切斷的磷酸二酯鍵進(jìn)行連接,即圖中的a處。RNA聚合酶的作用是催化DNA的轉(zhuǎn)錄。答案:D2.(2013·南京聯(lián)考)某科學(xué)家從細(xì)菌中分離出耐高溫淀粉酶(Amy)基因a,通過基因工程的方法,將a轉(zhuǎn)到馬鈴薯植株中,經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)Amy在成熟塊莖細(xì)胞中存在,下列說法正確的是(

)A.基因a只有導(dǎo)入到馬鈴薯受精卵中才能表達(dá)B.目的基因來自細(xì)菌,可以不需要載體直接導(dǎo)入受體細(xì)胞C.基因a導(dǎo)入成功后,將抑制細(xì)胞原有的新陳代謝,開辟新的代謝途徑D.目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,可隨著馬鈴薯的DNA分子的復(fù)制而復(fù)制,傳給子代細(xì)胞并表達(dá)解析:培育轉(zhuǎn)基因植株可以以體細(xì)胞或受精卵作為受體細(xì)胞;目的基因必須借助載體才能導(dǎo)入受體細(xì)胞;目的基因?qū)氤晒螅灰种萍?xì)胞原有的代謝途徑。答案:D3.研究人員將魚的抗凍基因?qū)敕洋w內(nèi),獲得抗凍能力明顯提高的番茄新品種。下列操作合理的是(

)A.設(shè)計(jì)相應(yīng)DNA單鏈片段作為引物,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因B.利用限制酶和DNA聚合酶構(gòu)建基因表達(dá)載體C.將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄細(xì)胞之前需用Ca2+處理細(xì)胞D.運(yùn)用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)抗凍基因是否在番茄細(xì)胞中表達(dá)解析:利用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶構(gòu)建基因表達(dá)載體;將基因表達(dá)載體導(dǎo)入原核細(xì)胞之前需用Ca2+處理,番茄細(xì)胞為真核細(xì)胞;運(yùn)用抗原——抗體雜交技術(shù)可檢測(cè)抗凍基因是否在番茄細(xì)胞中表達(dá)。答案:A4.(2012·福建高考)肺細(xì)胞中的let-7基因表達(dá)減弱,癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng),會(huì)引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將let-7基因?qū)敕伟┘?xì)胞實(shí)現(xiàn)表達(dá),發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖甲。請(qǐng)回答:(1)進(jìn)行過程①時(shí),需用________酶切開載體以插入let-7基因。載體應(yīng)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,以驅(qū)動(dòng)let-7基因轉(zhuǎn)錄,該部位稱為________。(2)進(jìn)行過程②時(shí),需用________酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞,以利于傳代培養(yǎng)。(3)研究發(fā)現(xiàn),let-7基因能影響癌基因RAS的表達(dá),其影響機(jī)理如圖乙。據(jù)圖分析,可從細(xì)胞中提取______進(jìn)行分子雜交,以直接檢測(cè)let-7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細(xì)胞增殖受到抑制,可能是由于細(xì)胞中________(填“RASmRNA”或“RAS蛋白”)含量減少引起的。解析:(1)過程①為重組載體的構(gòu)建過程,需要限制性核酸內(nèi)切酶切開載

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論