2023年藥物分析知識點總結(jié)

國家藥物原則是《中國藥典》（縮寫Ch.P）和局頒原則。

藥物質(zhì)量原則：是藥物現(xiàn)代化生產(chǎn)和質(zhì)量管理的重要構(gòu)成部分，是藥物生產(chǎn)、經(jīng)營、使用和

行政、技術(shù)監(jiān)督管理各部門應(yīng)共同遵照的法定技術(shù)根據(jù)。

藥典內(nèi)容分：凡例、正文、附錄、索引。

藥物質(zhì)量管理規(guī)范（5個G）《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)定GLP》《藥物生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范

GMP》《藥物經(jīng)營質(zhì)量管理規(guī)范GSP》《藥物臨床試驗質(zhì)量管理規(guī)范GCP》《中藥材生產(chǎn)質(zhì)量

管理規(guī)范GAP》。

原則品：用于生物檢定、抗生素或生化藥物中含量或效價測定的原則物質(zhì)，按效價單位計，

以國際原則品進行標定。

對照品除另有規(guī)定外，均按干燥品（或無水物質(zhì)）進行計算后使用。

藥物檢查工作的基本程序一般為取樣、鑒別、檢查、含量測定、寫出檢查匯報。

雜質(zhì)兩個來源：一是由生產(chǎn)過程中引入，二是貯藏過程中引入。

雜質(zhì)按照來源分：一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)；按毒性分：毒性雜質(zhì)和信號雜質(zhì)；按理化性質(zhì)分：

有機雜質(zhì)、無機雜質(zhì)和殘留雜質(zhì)。

雜質(zhì)限量：藥物中含雜質(zhì)的最大容許量。

雜質(zhì)限量％=雜質(zhì)最大容許量/供試品量*100%

雜質(zhì)限量％=原則溶液的濃度*原則溶液的體積/供試品量*100%即L=CV/S*100%

1.氯化物檢查，在硝酸酸性條件下與硝酸銀反應(yīng)，生成氯化銀膠體微粒而顯白色渾濁，與一

定量的原則氯化鈉溶液在相似條件下產(chǎn)生的氯化銀渾濁程度比較，濁度不得更大。加硝酸目

的：防止弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀及氧化銀沉淀的干擾，且可加速氯化銀沉淀的生產(chǎn)并產(chǎn)

生很好的乳濁，酸度以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。

2.硫酸鹽檢查，在稀鹽酸酸性條件下與氯化鋼反應(yīng)，與一定量原則硫酸鉀溶液在相似條件下

產(chǎn)生的硫酸鋼渾濁程度比較。

3.鐵鹽檢查，硫氟酸鹽法，鐵鹽在鹽酸酸性與硫氟酸鹽作用生產(chǎn)紅色可溶性硫劄酸鐵配離子

4.重金屬檢查，硫代乙酰胺法合用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物；熾灼后的硫代乙酰胺法合

用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及難溶于水、稀酸及乙醇的有機藥物；硫化鈉法合用于溶于堿性水溶液

而難溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的藥物；微孔濾膜法合用于重金屬限量低的藥物。

常用熱分析法有：熱重分析、差熱分析和差示掃描熱分析。

中國藥典規(guī)定殘留溶劑檢查措施為GC（氣相色譜法）

特殊雜質(zhì)檢查一薄層色譜法1.雜質(zhì)對照品法合用于已知雜質(zhì)并能制備得到雜質(zhì)對照品2供

試品溶液自身稀釋對照法合用雜質(zhì)接受不確定或無雜質(zhì)對照品

二高效液相色譜法1.內(nèi)標法加校正因子測定法合用于有對照品并可以測定雜質(zhì)校正因子2.

外標法測定法合用于有對照品且進樣量可以精確控制3.加校正因子的主成分自身對照測定

法合用不用雜質(zhì)對照品4.不加校正因子的主成分自身對照測定法合用沒有雜質(zhì)對照品5.

面積歸一化法合用粗略測量供試品中雜質(zhì)含量。

比旋度反應(yīng)藥物純度，限定雜質(zhì)含量。

不經(jīng)有機破壞的分析：直接測定法、經(jīng)水解測定法、經(jīng)還原分解測定法。

經(jīng)有機破壞分析：濕法破壞、干法破壞。

濕法破壞合用于含氮有機合成藥物分析前處理，在生物制品中用于氮、磷、硫柳汞即氯化鈉

測定法的前處理一凱氏定氮法。

干法破壞分1.高溫熾灼法2.氧瓶燃燒法，含F(xiàn)藥物選用水做吸取液，用銀量法測含CL用水

一氫氧化鈉做吸取液，用銀量法測含Br用水一氫氧化鈉做吸取液，測定含碘可用水一氫氧

化鈉一二氧化硫做吸取液，含硫濃過氧化氫與水混合液做吸取液。

容量分析應(yīng)用于化學原料藥的含量測定。

滴定度：每1ml規(guī)定濃度的滴定液多相稱的被測藥物的質(zhì)量，mg,T（mg/ml）=mXa/bXM,

m為滴定液的摩爾濃度（mol/L）a為被測藥物的摩爾數(shù)，b為滴定劑的摩爾數(shù)M為被測藥

物的毫摩爾質(zhì)量（mg）。

片劑的分析：

1.容量分析法

標示量％=V*T*F*D*平均片重/（W*標示量）*100%際摩爾濃度/規(guī)定摩爾濃度

2.分光光度法

A=ECL標示量%=（A/EL）*（1/1000）*D*平均片重/（W*標示量）*100%

3.高效液相色譜法

標示量％=A樣*C對*D*平均片重/（A對*W*標示量）*100%

注射劑的分析：標示量％=V*T*F*D/（Vs*標示量）*100%

分光光度法：1.百分吸光系數(shù)法標示量％=A*D/（Vs*E*100*標示量）*100%

2.對照品比較法標示量%=A樣*C對*D/（A對*Vs*標示量）*100%

色譜分析之高效液相色譜法，常用色譜柱填充劑有硅膠和十八烷基烷鍵鍵合硅膠，除另有規(guī)

定外柱溫為室溫，檢測器為紫外檢測器，檢測器不容許使用含不揮發(fā)鹽組分的流動相，以十

八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，常用甲醇-水，間或加有乙月青、緩沖液、反離子物質(zhì)等為流

動相。

色譜系統(tǒng)適應(yīng)性試驗一般包括理論板數(shù)、分離度（R>1.5）、反復(fù)性（5次）、拖尾因子（0.95-1.05

之間）四項指標。

藥物驗證分析內(nèi)容八條：精確度、精密度、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍、耐用性。

精確度：用該措施測定的成果與真實值或參照值靠近的程度，一般用回收率％表達。

精密度：在規(guī)定測試條件下，同一種均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定所得成果之間的靠近程度。

包括反復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性。

生物樣品包括多種體液和組織，血樣包括血漿、血清和全血，將血液置含抗凝劑的試管中，

以2500~3000r/min離心5分鐘時血漿與血細胞分離，短期保留可4℃冷臧，長期保留需-20℃

或-80℃下冷凍貯藏。唾液以3000r/min離心10分鐘，在4℃一下保留。采集的尿是自然排

尿，包括隨時尿、晨尿、白天尿、夜間尿和時間尿五種。

清除蛋白質(zhì)常用措施：1.加入與水混溶的有機溶劑（常用水溶性溶劑：乙月青、甲醇、丙酮、

四氫吹喃等，比例1:1-3高速10000r/min離心1-2分鐘可沉淀）2.加入中性鹽（常用中性鹽:

飽和硫酸鍍、硫酸鈉、鎂鹽、磷酸鹽、枸椽酸鹽等，比例1:2,同上高速離心）3.加入強酸（PH

低于蛋白質(zhì)等電點，常用強酸：10%三氯醋酸、65%高氯酸、5%偏磷酸等，比例1:0.6同上）

4.加入含鋅鹽及銅鹽的沉淀劑（PH高于等電點，常用：CuSO4-NaWO4.ZnSO4-NaOH等，

比例1:2同上）5.酷解法。

液固粹取法LSE:一種柱色譜分離措施，將具有吸附、分派及離子互換性質(zhì)的、表面積大的

擔體作為粹取劑填入小柱，以溶劑淋洗后，將生物樣品通過，使其藥物或內(nèi)源性干擾物保留

在擔體上，用合適溶劑洗去干擾物后，再用合適溶劑將藥物洗脫下來。

填充柱分兩類：1親水性硅藻土2疏水性活性炭、聚苯乙烯或C18化學鍵合硅膠.

粹取5環(huán)節(jié)：(1)用有機溶劑如甲醇，預(yù)先濕潤微型柱，使增長填料與待測物互相作用的表

面積，并可除去也許干擾的填料殘留物(2)用水或合適的緩沖液沖洗，除去殘存的甲醉(3)進

樣，通過微型柱，廢液棄去(4)用水或合適的緩沖液沖洗，選擇性地除去將會干擾背面色譜

分析的內(nèi)源性雜質(zhì)⑸用合適的溶劑如甲醇、乙懵等洗脫樣品，搜集，洗脫液用于背面的分

析測定或深入研究。

【巴比妥類藥物基本構(gòu)造】分兩部分，一母核巴比妥酸的環(huán)狀丙二酰服構(gòu)造，此構(gòu)造是巴比

妥類藥物的共同部分，決定巴比妥類藥物共性;二取代基部分。微溶或極微溶水易溶于乙醇

等有機溶劑，含1,3-二酰亞胺基團顯弱酸性，能發(fā)生酮式-烯醇式互變異構(gòu)，在水中發(fā)生二

級電離。含酰亞胺構(gòu)造，與堿液共沸水解放出氨氣使紅石蕊變藍。與重金屬離子反應(yīng)：1＞

與銀鹽反應(yīng)銀量法：在碳酸鈉堿性溶液中，生成鈉鹽溶解，再與硝酸銀溶液反應(yīng)，先生成可

溶性一銀鹽，加入過量硝酸銀則生成難溶性二銀鹽白色沉淀。2＞與銅鹽反應(yīng)：與銅毗噬試

液反應(yīng)形成穩(wěn)定配位化合物，巴比妥類藥物紫色沉淀，含硫巴比妥類藥物綠色。3＞與鉆鹽

反應(yīng)4＞與香草醛反應(yīng)生成棕紅色物質(zhì)

司可巴比妥專屬試驗:與碘反應(yīng)顯棕黃色5分內(nèi)消失,澳量法司可巴比妥與溟僅應(yīng)使其褪色。

巴比妥類與高鎰酸鉀反應(yīng)在堿性中紫色還原為棕色二氧化鎰。苯巴比妥專屬鑒別反應(yīng)：硝化

反應(yīng)、硫酸-亞硝酸鈉反應(yīng)、甲醛-硫酸反應(yīng)。硫代巴比妥與鉛白色沉淀?！景捅韧缀繙y定】

1.銀量法原理，先形成可溶性一銀鹽，過量滴加硝酸銀形成難溶性二銀鹽；注意事項一，無

水碳酸鈉溶液要臨用新配，二硝酸銀滴定應(yīng)新配制，三銀電極在臨用前需用硝酸浸洗。

芳酸鑒別：水楊酸及鹽在中性或弱酸性與三氯化鐵缶成紫色配合物（反應(yīng)合適PH為4~6）

（五種直接用FeC13檢測：雙水楊酯、水楊酸、對乙酰氨基酚、二氟尼柳、對氨基水楊酸鈉;

兩種間接：阿司匹林、貝諾酯）。苯甲酸鹽中性或堿性與三氯化鐵毛成堿式苯甲酸鐵鹽的赭

色沉淀【重氮化-偶合反應(yīng)】具潛在芳伯胺基加酸水解產(chǎn)生游離芳伯胺基構(gòu)造，在酸性與亞

硝酸重氮化反應(yīng)（四種直接反應(yīng)：對氨基水楊酸鈉、鹽酸普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸普魯卡

因胺；三種間接：對乙氨基酚、醋氨苯颯、貝諾酯）。阿司匹林與碳酸鈉加熱水解，再加過

量稀硫酸酸化生成白色水楊酸沉淀并有醋酸臭氣。阿司匹林特殊雜質(zhì)檢查：溶液澄清度、水

楊酸（重要檢查雜質(zhì)）；對氨基水楊酸鈉毛要檢查雜質(zhì)是間氨基酚。

【芳胺類】（苯佐卡因、普魯卡因、丁卡因等）具有對氨基苯甲酸酯的母體?！捐b別反應(yīng)】重

氮化偶合反應(yīng)：分子構(gòu)造具芳伯氨基或潛在芳伯氨基藥物都可發(fā)生，生成的重氮鹽可與堿性

蔡酚偶合成有色偶氮染料，苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸氯普卡因、鹽酸：普魯卡因胺在

鹽酸條件下可直接與亞硝酸鈉重氮反應(yīng)；對乙酰氨基酚、醋氨苯碉在鹽酸或硫酸中加熱水解

后才可與亞硝酸鈉重氮反應(yīng)；丁卡因不具芳伯氨基，無重氮反應(yīng)，但在酸性下與亞硝鈉反應(yīng)

生成乳白色沉淀。對乙酰氨基酚與三氯化鐵反應(yīng)顯藍紫色。鹽酸利多卡因在NaC03中與

CuS04反應(yīng)生成藍紫色配合物，溶入三氯甲烷顯黃色；苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸氯

普卡因、鹽酸丁卡因無此反應(yīng)。鹽酸利多卡因在酸性下與氯化鉆生成亮綠色鉆鹽沉淀【鹽酸

普魯卡因鑒別】溶解后加氫氧化鈉生成白色沉淀（普魯卡因）加熱變?yōu)橛蜖钗?，繼續(xù)加熱產(chǎn)

生蒸氣使?jié)窦t石蕊變藍。鹽酸普魯胺加過氧化氫再加三氯化鐵顯紫紅色隨即變棕。苯佐卡因

加氫氧化鈉加碘生成黃色沉淀放碘仿臭氣【對乙酰氨基酚特殊雜質(zhì)】檢查對氨基酚，鹽酸普

魯卡因注射液中檢查對氨基苯甲酸。

【芳胺類含量測定】亞硝酸鈉滴定法、非水溶液滴定法、分光光度法、高效液相色譜法。

含量測定之【亞硝酸鈉滴定法原理】芳伯氨基或水解后生成放伯氨基的藥物在酸性溶液中與

亞硝酸鈉發(fā)生重氮化反應(yīng)，生產(chǎn)重氮鹽，用永停滴定法指示終點，重要條件：1.加入適量澳

化鉀加緊反應(yīng)速度2.漠化鉀與鹽酸作用產(chǎn)生淡化氫與亞硝酸鈉反應(yīng)生成NOBr（目的）3.加

過量鹽酸加速反應(yīng)（加入過量鹽酸有助于：重氮化反應(yīng)速度加緊、重氮鹽在酸性穩(wěn)定、防止

生成偶氮氨基化合物影響測定）可在室溫（10℃-30℃）下進行，其中15℃下成果較精確。

指示終點措施：電位法、永停滴定法、外指示劑法、內(nèi)指示劑法。中國藥典芳胺類藥物亞硝

酸鈉滴定法采用永停滴定法指示終點。

【芳胺類苯乙胺類鑒別試驗】三氯化鐵、甲醛-硫酸、氧化、亞硝基鐵氧化鈉（脂肪族伯胺

專屬反應(yīng)）。特殊雜質(zhì)檢查：腎上腺素、鹽酸異丙腎上腺素、重酒石酸去甲腎上腺素、鹽酸

去氧腎上腺素、鹽酸甲氧明檢查酮體。

【雜環(huán)毗喘類藥物弱堿性】尼可剎米分子除此噬環(huán)上N原子外，毗咤環(huán)B位被?；〈?，

遇堿水解后釋放堿性二乙胺【還原性】異煙股分子中此咤環(huán)Y位被酰腫取代，可被氧化也可

與含默基的縮合【雜環(huán)毗咤類鑒別試驗】一、口比咤環(huán)開環(huán)反應(yīng)合用于此咤環(huán)的B或Y被竣基

衍生物取代的尼可剎米和異煙腫1.戊稀二醛反應(yīng)（與苯胺縮合黃色至黃棕色，與異煙腫需顯

用高鐳酸鉀或溟水氧化為異煙酸再反應(yīng)）2.二硝基氯苯反應(yīng)（無水條件下與2,4-二硝基氯苯）。

二、異煙睇與氨制硝酸銀反應(yīng)產(chǎn)生銀鏡，異煙腫的酰明基與芳醛縮合成腺有固定熔點可鑒定。

三、尼可剎米與硫酸銅及硫鼠酸鐵生成草綠色配合物沉淀，異煙明、尼可剎米與氯化汞生成

白色沉淀。四、尼可剎米與氫氧化鈉加熱有二乙胺臭味逸出，是濕紅石蕊變藍。異煙腫檢查

游離朋（在供試品主斑點前方與硫酸月井斑點不得顯黃色斑點）尼可剎米檢查N-乙基煙酰胺

【雜環(huán)喋咻堿性】季錢堿>脂肪胺〉芳胺、N-芳雜環(huán)〉酰胺。硫酸奎寧為左旋體，硫酸奎

尼丁為右旋體，兩者在稀硫酸中顯藍色熒光【綠奎寧反應(yīng)】奎寧和奎尼丁經(jīng)氯水氧化氯化再

氨水處理成綠色二醛基亞胺鍍鹽，顯翠綠色【Vitaili反應(yīng)】雜環(huán)托烷類生物堿鑒別顯深紫色

【吩嚷類】專屬與杷離子配合顯紅色，其氧化產(chǎn)物飆和亞碉無此反應(yīng)。苯并二氮雜卓類在硫

酸下顯不一樣熒光：地西泮為黃綠色，氯氮卓為黃色。

【雜環(huán)含量測定之非水溶液滴定法】非水溶劑四種（酸性溶劑、堿性、兩性、惰性如甲苯三

氯甲烷丙酮）當雜環(huán)類藥物pKb為8~10時合用冰醋酸為溶劑，堿性更弱pKb為10-12時逡

用冰醋酸與醋酎混合液，pKb>12用醋酊。消除氫鹵酸干擾是加入過量醋酸汞冰醋酸溶液，

使生成在醋酸中難解離的）鹵化汞，再用高氯酸滴定。硫酸鹽類在冰醋酸中只能滴定至硫酸氫

鹽可用高氯酸直接滴定。非水溶液滴定法常用電位滴定法（用玻璃電極為指示電極，飽和甘

汞電極）和指示劑法（結(jié)晶紫酸式為黃色，堿式為紫色）。消除干擾：改用中性溶劑、電位

法指示終點、加抗壞血酸。硝酸鹽用電位法指示終點。磷酸與有機酸在冰醋酸中可直接滴定。

雜環(huán)含量測定之氧倫還原滴定法：鈾量法、漠酸鉀法、碘量法、澳量法。鈾量法（二氫毗咤

類、吩噬嗪類）硫酸鈍滴定先失去一電子形成紅色自由基，達終點吩睡嗪失兩電子紅色消褪。

溪酸鉀法專屬異煙肺【雜環(huán)含量測定之分光光度法】鉗離子比色法-吩嘎嗪在pH2緩沖液與

鋁離子Pd2+形成紅色配合物在500nm波長最大吸取。

【維生素A】溶解于三氯甲烷、乙酸、環(huán)己烷、異丙醇?！揪S生素A鑒別】三氯化睇反應(yīng)原

理：維生素A在飽和無水三氯化睇的無醇三氯甲烷溶液中顯藍色，漸變成紫紅色,，機制為

維生素A和三氯化睇中的親電試劑綠化高鋅作用形成不穩(wěn)定的藍色碳正離子?！揪S生素A含

量測定】紫外分光光度法（三點校正法）：第一法（等波長差法）入I=328nm入2=3I6nm

入3=340nm△入=12nm,第二法（等吸取比法）入l=325nm入2=310nm入3=334nm。第一

法（直接測定法，合用于純度高等維生素A醋酸酯）在300、316、328、340、360五個波

長點出測定吸光度，確定最大吸取波長應(yīng)為328nm。第二法（皂化法，合用于維生素A醇）

在300、310、325、334nm四個波長點測定吸光度，去頂最大吸取波長為325nm。

【維生素B鑒別】維生素B1在堿性溶液中被鐵氟化鉀氧化生成硫色素溶于正丁醇中顯藍色

熒光，地西泮顯黃綠色熒光，加酸熒光消失，加堿又有熒光。與生物堿沉淀試劑反應(yīng)生成恒

定沉淀。【維生素B含量測定】【非水滴定】原理：維生素B1分子中含兩個堿性成鹽等伯胺

和季錢基團，中非水溶液中（醋酸汞存在下）可于高氯酸作用，根據(jù)高氯酸量可計算維生素

B1含量。有機堿等氫鹵酸鹽中用高氯酸滴定前需加入醋酸汞?！咀贤夥止夤舛确ā吭恚壕S

生素B1分子中具有共輒雙鍵構(gòu)造，中紫外區(qū)有吸取，根據(jù)其最大吸取波長處吸光度可計算

含量。

維生素C一般體現(xiàn)為一元酸，有4個光學異構(gòu)體，其中L（+）-抗壞血酸活性最強，右旋【維

生素C鑒別】與【2,6-二氯靛酚反應(yīng)】原理：氧化性在酸性介質(zhì)中為玫瑰紅，在堿性介質(zhì)

中為藍色，與維生素C作用后生成還原型無色酚亞胺【維生素C含量】碘量法、2,6-二氯

靛酚滴定法。

【維生素E鑒別】【硝酸反應(yīng)】原理：維生素E中硝酸酸性條件下水解生成生育酚，生育酚

被硝酸氧化為鄰醍構(gòu)造等生育紅而顯橙紅色【維生素E雜志檢查】酸度、未酯化的生育酚

（飾量法，吩口塞嗪類、二氫毗咤類，指示劑為二苯胺，亮黃-灰紫，還原-氧化）【維生素E

含量】【氣相色譜法】測定期采用內(nèi)標法。內(nèi)標物為正三十二烷。系統(tǒng)適應(yīng)性試驗：理論板

數(shù)（n）按維生素E峰計算不應(yīng)低于500（填充柱）或5000（毛細管柱），維生素E峰與內(nèi)

標物質(zhì)峰等分離度R22。

【幽體構(gòu)造性質(zhì)】腎上腺激素21C（12）雄性19c（13）孕21c（14）雌18c（567）,（1）A4-3-

酮，紫外吸取、與鑲基試劑反應(yīng)（2）C1-a-醇酮基，還原性（3）C17-B-羥基，可成酯（4）

C17-甲酮基，與亞硝基鐵氫化鈉反應(yīng)，專屬性（5）C17-羥基，可成酯（6）C17-乙塊基，與

硝酸銀反應(yīng)（7）A環(huán)為3-OH苯環(huán)，紫外吸取、與重氮苯磺酸鹽反應(yīng)。【錯體鑒別】（一）

與強酸呈色反應(yīng)（二）官能團反應(yīng)，皮質(zhì)激素類，…松之類如氫化可的松C17-a-醇酮基的

四氮喋比色法【留體特殊雜志檢查】（一）有關(guān)物質(zhì)檢查，薄層色譜法用自身稀釋對照法，

高效液相色譜法用主成分自身對照法（二）硒的檢查，用二氨基蔡比色法（三）殘留溶劑檢

查，甲醇和丙酮，氣相色譜法用內(nèi)標法加校正因子測定（四）游離磷酸鹽的檢查【留體含量】

【四氮噗比色法】用于皮質(zhì)激素藥物含量測定，C17-a醇酮基還原性，還原四氮哇鹽味有色

甲贊。氯化三苯四氮嚏TTC、紅四氮噗RT、藍四氮嚏BTo反應(yīng)條件：無水乙醇溶解，干

燥具塞試管、氫氧化四甲基鐵試液、暗處放置。測定影響原因：集團、溶劑和水分、堿種類

及加入次序、空氣中氧及光纖、溫度時間【異煙叫比色法】中酸性條件無水甲醇和無水乙醇

溶劑。反應(yīng)專屬性（具有44-3-酮基的載體激素中室溫下不到l