一輪：基因工程

《基因工程》復(fù)習(xí)1、博耶(H.Boyer)和科恩(s.Cohen)將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中進(jìn)行了表達(dá)。該研究除證明了質(zhì)粒可以作為載體外,還證明了（答出兩點(diǎn)即可)2、體外重組的質(zhì)?？赏ㄟ^Ca2+參與的方法導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞；而體外重組的噬菌體DNA通常需與組裝成完整噬菌體后,才能通過侵染的方法將重組的噬菌體DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞,在細(xì)菌、心肌細(xì)胞、葉肉細(xì)胞中,可作為重組噬菌體宿主細(xì)胞的是。（3)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí),表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會被降解,為防止蛋白質(zhì)被降解,實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加的抑制劑。體外重組質(zhì)?？蛇M(jìn)入受體細(xì)胞；真核生物基因可在原核細(xì)胞中成功表達(dá)轉(zhuǎn)化

外殼蛋白（或噬菌體蛋白、蛋白質(zhì)外殼）細(xì)菌蛋白酶缺陷型蛋白酶2018全國卷1理論基礎(chǔ)DNA是遺傳物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的確立遺傳信息傳遞方式(中心法則)的認(rèn)定技術(shù)保障基因工程工具的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用

限制性核酸內(nèi)切酶

DNA連接酶基因載體(如質(zhì)粒)基因工程技術(shù)的依據(jù)2017全國卷1真核生物基因中通常有內(nèi)含子，而原核生物基因中沒有，原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對應(yīng)的RNA序列的機(jī)制。已知在人體中基因A（有內(nèi)含子）可以表達(dá)出某種特定蛋白（簡稱蛋白A）?；卮鹣铝袉栴}：1、某同學(xué)從人基因組文庫中獲得了基因A，以大腸桿菌作為受體細(xì)胞卻未得到蛋白A，原因是：2、若用家蠶作為表達(dá)基因A的載體，在噬菌體和昆蟲病毒兩種載體中，不選用____________作為載體，原因是：3、若要高效地獲得蛋白A，可選用大腸桿菌作為受體，因?yàn)榕c家蠶相比，大腸桿菌具有______________________________________（答出兩點(diǎn)即可）等優(yōu)點(diǎn)。4、若要檢測基因A是否翻譯出蛋白A，可用的檢測物質(zhì)是___________________（填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗體”）。5、艾弗里等人的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)為證明DNA是遺傳物質(zhì)做出了重要貢獻(xiàn)，也可以說是基因工程的先導(dǎo)，如果說他們的工作為基因工程理論的建立提供了啟示，那么，這一啟示是：基因A的編碼區(qū)中有內(nèi)含子和外顯子，在真核生物細(xì)胞內(nèi)把內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄來的RNA切除，而原核生物細(xì)胞內(nèi)基因轉(zhuǎn)錄后不切除，直接表達(dá)噬菌體噬菌體是細(xì)菌病毒，專門寄生在細(xì)菌體內(nèi)，而家蠶是真核生物，家蠶是病毒，昆蟲病毒易感染昆蟲繁殖快、易培養(yǎng)、產(chǎn)物含量高、產(chǎn)物易分離等蛋白A的抗體不僅證明了生物的遺傳物質(zhì)是DNA，還證明了DNA可以從一種生物轉(zhuǎn)移到另一種生物個(gè)體2017全國卷2幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：（1）在進(jìn)行基因工程操作時(shí)，若要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，常選用嫩葉而不選用老葉作為實(shí)驗(yàn)材料，原因是______________________________。提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是__________________________。（2）以mRNA為材料可以獲得cDNA，原理是：（3）若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要通過質(zhì)粒載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，原因是__________________________________（答出兩點(diǎn)即可）（4）當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是__________________________。（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是____________________。嫩葉組織細(xì)胞易破碎抑制RNA被水解在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下，以mRNA為模板按照堿基互補(bǔ)配對的原則可以合成cDNA目的基因缺少相應(yīng)的啟動子和終止子，缺少復(fù)制原點(diǎn)磷酸二酯鍵轉(zhuǎn)錄和翻譯過程受影響1理主干?自成體系磷酸二酯鍵平末端磷酸二酯鍵黏性末端平末端質(zhì)粒動植物病毒限制酶切割位點(diǎn)標(biāo)記基因基因文庫PCR啟動子標(biāo)記基因農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化顯微注射DNA分子雜交抗原—抗體雜交基因合成新的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)脫氧核苷酸序列載體質(zhì)粒上抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇,不是抗生素合成基因DNA復(fù)制目的基因的轉(zhuǎn)錄Taq酶轉(zhuǎn)錄2抓考點(diǎn)?要點(diǎn)突破環(huán)狀DNA能夠自我復(fù)制具有遺傳特性CGCGT－A－DNA連接酶標(biāo)記基因供重組DNA的鑒定和選擇C

AD逆轉(zhuǎn)錄DNA聚合酶氨基酸脫氧核苷酸引物模板DNA重組DNA使其成為感受態(tài)細(xì)胞，有利于吸收重組DNA分子氨基酸序列PP1DNA和RN