血液透析內(nèi)毒素檢測(cè)的意義

內(nèi)毒素檢測(cè)的臨床意義

----血液透析中內(nèi)毒素檢測(cè)的重要性1編輯ppt熱原反響熱原反響是血液透析中常見(jiàn)的并發(fā)癥，發(fā)生率約在10％以下。因血液透析涉及環(huán)節(jié)諸多，往往難辨熱原反響的直接發(fā)病因素，使防治措施難具針對(duì)性。熱原反響特點(diǎn):患者于透析開(kāi)始1h左右，出現(xiàn)惡寒、寒顫，或伴惡心、嘔吐，體溫升至38℃左右。靜脈推注地塞米松2．5～5．0mg或肌肉注射非拉更25．0mg，30min后，病癥消失，體溫逐漸降至正常。2編輯ppt熱原反響的相關(guān)因素透析器因素復(fù)用的透析器和血路管透析液和透析用水凈化劑和消毒劑:次氯酸鈉、雙氧水、氫氧化鈉等常用凈化劑，對(duì)透析膜有腐蝕作用，會(huì)增大膜孔徑甚至引起破膜；過(guò)氧乙酸是高效、廣譜、速效的消毒劑，但其化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，消毒效果受配制濃度、儲(chǔ)藏時(shí)間和室溫的影響。透析機(jī)的消毒和使用:在需要連續(xù)工作十幾個(gè)小時(shí)的狀態(tài)下，兩班之間往往人為忽略消毒程序的運(yùn)行，有造成醫(yī)源性交叉感染之嫌?；颊咦陨硪蛩?有些患者潛在感染，血液透析時(shí)血流動(dòng)力學(xué)發(fā)生改變，加之肝素抗凝，容易造成局部感染擴(kuò)散而在透析中出現(xiàn)寒顫、發(fā)熱等病癥。透析患者并發(fā)敗血癥，也表現(xiàn)為透析中高熱、寒顫，而48％～72％的敗血癥是由血管通路感染引起的。3編輯ppt內(nèi)毒素檢測(cè)的重要性因此，保證透析液微生物質(zhì)量是對(duì)現(xiàn)代血液透析的基本要求。血液透析中對(duì)內(nèi)毒素檢測(cè)勢(shì)在必行。使患者產(chǎn)生低血壓，肌肉痙攣，頭痛，發(fā)熱等癥狀，嚴(yán)重的可導(dǎo)致休克。而長(zhǎng)期內(nèi)毒素刺激，會(huì)造成透析的長(zhǎng)期并發(fā)癥如腕管綜合癥和慢性炎癥反應(yīng)等。尤其是內(nèi)毒素，由于其水解后可以穿過(guò)透析膜進(jìn)入到患者的體內(nèi)，導(dǎo)致急性熱源性反應(yīng)。使用被微生物污染的透析用水和透析液可引起患者的多種急、慢性并發(fā)癥，直接影響患者的透析質(zhì)量和生存質(zhì)量，嚴(yán)重的甚至危及生命。4編輯ppt▲2005年8月衛(wèi)生部公布了委托中華醫(yī)學(xué)會(huì)制定的?血液透析器復(fù)用操作標(biāo)準(zhǔn)?中明確規(guī)定：水質(zhì)要求：應(yīng)定期檢測(cè)復(fù)用用水細(xì)菌和內(nèi)毒素的污染程度。內(nèi)毒素含量不得超過(guò)2EU/ml，干預(yù)限度為1EU/ml?！?中華人民共和國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)?YY0572-2005?血液透析和相關(guān)治療用水?〔ISO13959：2002，MOD〕中明確規(guī)定：在水處理裝置的輸出端的細(xì)菌內(nèi)毒素，應(yīng)不得超過(guò)1EU/ml；在血液透析裝置入口的輸送點(diǎn)上的細(xì)菌內(nèi)毒素不應(yīng)得超過(guò)5EU/ml?！?中華人民共和國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)?YY0598-2006?血液透析及相關(guān)治療用濃縮物?〔ISO13958：2002，MOD〕中明確規(guī)定：濃縮物以細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水配成透析液后，透析液細(xì)菌內(nèi)毒素含量應(yīng)小于0.5EU/ml。國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)解讀

5編輯ppt各國(guó)標(biāo)準(zhǔn)美國(guó)醫(yī)療儀器協(xié)會(huì)〔AmericanAssociationofMedicalInstrument，AAMI/CDC〕的標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌生長(zhǎng)數(shù)：透析用水不超過(guò)200CFU/ml，透析液中不超過(guò)100CFU/ml。內(nèi)毒素濃度：透析用水和透析液中不超過(guò)0.25EU/ml。德國(guó)腎病協(xié)會(huì)建議標(biāo)準(zhǔn)：透析用水：細(xì)菌生長(zhǎng)數(shù)和內(nèi)毒素濃度分別不超過(guò)100CFU/ml、0.25EU/ml。透析液：細(xì)菌生長(zhǎng)數(shù)和內(nèi)毒素濃度分別不超過(guò)1000CFU/ml、0.5EU/ml。歐洲藥典用水標(biāo)準(zhǔn)：

細(xì)菌生長(zhǎng)數(shù)不超過(guò)100CFU/ml。內(nèi)毒素濃度不超過(guò)0.25EU/ml。

6編輯ppt內(nèi)毒素的定義什么是內(nèi)毒素？?jī)?nèi)毒素〔Endotoxin,ET〕是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分，其化學(xué)成分為脂多糖〔Lipopolysaccharide，LPS〕，由類(lèi)脂A、核心寡聚糖O及多肽側(cè)鏈組成。7編輯ppt體內(nèi)內(nèi)毒素的來(lái)源菌體死亡或人工裂解革蘭氏陰性桿菌的釋放腸道內(nèi)毒素的吸收敗血癥時(shí)血中細(xì)菌的釋放外源性輸入體內(nèi)內(nèi)毒素的來(lái)源8編輯ppt

內(nèi)毒素的作用機(jī)理LPSLPS-LBP（LPS結(jié)合蛋白）LPS-SCO14（細(xì)胞膜上的受體）信號(hào)傳遞信號(hào)傳遞CD14+細(xì)胞（Mф，PMN，單核核細(xì)胞）CD14－細(xì)胞（上皮細(xì)胞等）吞噬作用殺菌活性一級(jí)介質(zhì)釋放粘附分子表達(dá)→細(xì)胞反應(yīng)9編輯pptTNF、IL-1IL-6、IL-8瀑布樣反響，全身炎性反響綜合癥急性炎癥PG、TXA、LTC、PAG、C5a、O2-、NO，彈力酶〔二級(jí)介質(zhì)〕膿毒綜合征〔發(fā)熱、低溫、心動(dòng)過(guò)速、尿少、酸中毒、低血壓〕DIC內(nèi)毒素休克MOSF〔多器官功能衰竭〕死亡10編輯pptShwartzman（什瓦茨曼現(xiàn)象）5內(nèi)毒素的生物學(xué)效應(yīng)

發(fā)熱反應(yīng)1白細(xì)胞反應(yīng)2內(nèi)毒素血癥（ETM）與內(nèi)毒素休克（ETS）3彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC）411編輯ppt內(nèi)毒素檢測(cè)方法目前內(nèi)毒素檢測(cè)的方法主要有鱟試驗(yàn)自動(dòng)化動(dòng)力學(xué)方法化學(xué)發(fā)光法光纖維生物傳感法毛細(xì)管電泳法ELISA結(jié)合免疫鱟試驗(yàn)法12編輯ppt

儀器簡(jiǎn)介北京金山川科技開(kāi)展MB-80SMB-80VMB-80DMB-80EMB-80M13編輯ppt

MB－80微生物快速動(dòng)態(tài)檢測(cè)系統(tǒng)

天津一瑞生物工程技術(shù)公司生產(chǎn)14編輯pptMB-80六大特點(diǎn)快速：1個(gè)小時(shí)完成檢測(cè)動(dòng)態(tài)：動(dòng)態(tài)檢測(cè)定量：定量檢測(cè)靈敏：內(nèi)毒素最低檢測(cè)量1pg/ml防干擾：檢測(cè)不受血中抗生素等的影響應(yīng)用范圍：血液透析液，透析用水,血液、尿液、腦積液、胸積液、腹水等

15編輯ppt細(xì)菌內(nèi)毒素

因子C 活化因子C

因子B 活化因子B

凝固酶原 凝固酶

凝固蛋白原凝固蛋白〔凝膠鱟試劑與內(nèi)毒素的反響機(jī)理16編輯ppt儀器檢測(cè)原理：動(dòng)態(tài)比濁法：動(dòng)態(tài)定量檢測(cè)革蘭陰性菌可溶性抗原〔脂多糖〕，系統(tǒng)通過(guò)測(cè)定生物試劑與檢測(cè)樣品中抗原抗體反響生成濁度，采用動(dòng)態(tài)比濁法，連續(xù)檢測(cè)濁度的變化建立時(shí)間〔T〕與微生物含量〔C〕關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過(guò)光電轉(zhuǎn)換原理，經(jīng)軟件系統(tǒng)分析得出具體檢測(cè)值，得出檢測(cè)樣品中含內(nèi)毒素含量。

17編輯ppt檢測(cè)方法內(nèi)毒素/葡聚糖定量測(cè)定

MB－80微生物快速動(dòng)態(tài)診斷分析儀天津一瑞生物工程技術(shù)公司生產(chǎn)1.血液標(biāo)本的處理：抽取新鮮肝素抗凝血2ml，0.1ml血漿加0.9ml血液前處理液，放70℃水浴10min，取出后備用。2.取鱟試劑一支加處理后的血漿0.2ml放混勻器上振蕩30秒.3.放入檢測(cè)器，1小時(shí)后報(bào)告結(jié)果。18編輯ppt內(nèi)毒素檢測(cè)的臨床意義正常參考值：正常人血漿內(nèi)毒素含量<10pg/ml。10-20pg/ml：不能確定有感染，為病變觀察期，需根據(jù)病情連續(xù)監(jiān)測(cè)2-3次才可確認(rèn)。

19編輯ppt那種病人需要連續(xù)檢測(cè)〔1〕檢測(cè)值在10pg/ml—20pg/ml之間的病人，連續(xù)檢測(cè)的目的是為最終確診?！?〕檢測(cè)值在500pg/ml以上的病人，連續(xù)檢測(cè)的目的是為防止膿毒血癥的發(fā)生?！?〕需要觀察藥物療效的病人?！?〕用常規(guī)方法難以確診的病人?！?〕有血液透析、血漿置換或介入治療的病人。20編輯ppt內(nèi)毒素檢測(cè)的臨床意義內(nèi)毒素檢測(cè)的臨床意義革蘭陰性菌敗血癥的診斷呼吸道感染肝臟感染及肝硬化膽道疾病急性胰腺炎潰瘍性結(jié)腸炎細(xì)菌性感染的輔助性診斷、治療和預(yù)后判斷原因不明的發(fā)熱外源性輸注的內(nèi)毒素血癥的診斷21編輯ppt1.革蘭陰性菌敗血癥的診斷:通過(guò)測(cè)定人血漿中的內(nèi)毒素即可對(duì)G－菌所引起的臨床菌血癥及敗血癥進(jìn)行確診，而且對(duì)病原菌的分辨及各種感染病癥治療及預(yù)后判定都具有很大幫助。2.呼吸道感染：由革蘭陰性菌所引起的肺炎、胸膜炎及慢性支氣管炎時(shí)，一般在血中的內(nèi)毒素水平均較高。因此在綜合診治的情況下因該考慮內(nèi)毒素在疾病中的作用，適當(dāng)?shù)膽?yīng)用拮抗內(nèi)毒素的藥物在減少死亡,降低并發(fā)癥方面都是十分重要的。內(nèi)毒素檢測(cè)的臨床意義22編輯ppt3.肝臟感染甲肝：甲肝的內(nèi)毒素血癥發(fā)生率為58％，平均內(nèi)毒素濃度為54.7pg/ml。在發(fā)病的前3周內(nèi)毒素最低水平為37.7pg/ml。5周后開(kāi)始恢復(fù)正常。乙肝：急性乙肝內(nèi)毒素血癥的發(fā)病率占51.9%，隨著病情的緩解內(nèi)毒素水平逐漸下降。慢性活動(dòng)性乙肝時(shí)出現(xiàn)內(nèi)毒素血癥者占53.7%，并且有80％的患者持續(xù)存在內(nèi)毒素血癥。丙肝：慢性活動(dòng)性丙肝的內(nèi)毒素血癥發(fā)病率最高〔>80%〕，而且血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶水平與內(nèi)毒素血癥發(fā)生率及含量無(wú)明顯關(guān)系。內(nèi)毒素檢測(cè)的臨床意義23編輯ppt4.肝硬化：肝臟可攝取血流中內(nèi)毒素的80~90%，由于肝硬變后造成的肝枯否氏細(xì)胞去除能力下降及肝內(nèi)組織結(jié)構(gòu)和血流的改變，肝內(nèi)毒素?cái)z取減少，造成嚴(yán)重的內(nèi)毒素血癥。5.膽道疾?。耗懯Y伴膽囊炎的內(nèi)毒素血癥的發(fā)生率為78％；化膿性膽管炎為20％；梗阻性黃疸的程度與內(nèi)毒素濃度以及持續(xù)時(shí)間有一定關(guān)系，術(shù)后的內(nèi)毒素血癥發(fā)病率為50％~75%，是術(shù)后出現(xiàn)并發(fā)癥和患者死亡的一個(gè)重要原因。內(nèi)毒素檢測(cè)的臨床意義24編輯ppt6.急性胰腺炎：急性胰腺炎并發(fā)內(nèi)毒素血癥較常見(jiàn)，約占66％，早期測(cè)定內(nèi)毒素水平有助于判斷疾病的嚴(yán)重程度，指導(dǎo)治療，防止惡化,值得注意的是致死病例生前均并發(fā)內(nèi)毒素血癥且持續(xù)存在直至死亡。7.潰瘍性結(jié)腸炎：此病的內(nèi)毒素血癥發(fā)病率高達(dá)100％，也有個(gè)別報(bào)道的陽(yáng)性率僅為25％。但多數(shù)認(rèn)為內(nèi)毒素血癥是該病的重要并發(fā)癥。內(nèi)毒素檢測(cè)的臨床意義25編輯ppt8.細(xì)菌性感染的輔助診斷、治療和預(yù)后判斷☆全身性細(xì)菌感染時(shí)，內(nèi)毒素濃度持續(xù)升高標(biāo)志著炎癥反響的加重，暗示預(yù)后不良并提示存在感染病灶，內(nèi)毒素濃度下降那么說(shuō)明炎癥反響逐步消失，提示潛在感染性病灶治療有效，感染得到控制?！顚?duì)尿液進(jìn)行內(nèi)毒素測(cè)定可檢出革蘭氏陰性細(xì)菌