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文檔簡介
葡萄球菌屬及檢驗(yàn)1.同學(xué)們大家好,歡迎來到微生物檢驗(yàn)技術(shù)課堂。今天我們學(xué)習(xí)的內(nèi)容是葡萄球菌屬,葡萄球菌屬是一類觸酶試驗(yàn)陽性革蘭染色陽性的球菌,因?yàn)樗麄冊陲@微鏡下經(jīng)常成堆成團(tuán)成葡萄串狀,因此而得名。2.葡萄球菌廣泛分布于自然界,而且大多數(shù)沒有致病性,構(gòu)成了人體的正常菌群,但是我們要注意的是有些人體的皮膚和鼻咽部可攜帶致病性菌株,特別是醫(yī)務(wù)工作者的攜帶菌率可高達(dá)70%以上,而其中金黃色葡萄球菌是致病性最強(qiáng)的一類,是引起醫(yī)院感染的重要微生物,也是最常引起化膿性感染的球菌。3.下面我們來學(xué)習(xí)葡萄球菌的生物學(xué)特性,首先來看一下它的形態(tài)與染色,革蘭染色表現(xiàn)為陽性球菌,而且呈現(xiàn)不規(guī)則的葡萄串狀排列,這類細(xì)菌它一般沒有莢膜,沒有鞭毛,而且不形成芽孢,大多數(shù)呢,也沒有形成菌毛。4.下面我們再來看它的培養(yǎng)特性,葡萄球菌屬為需氧或兼性厭氧菌,最適的生長溫度為35到37攝氏度,它們的營養(yǎng)要求不高,在大多數(shù)的培養(yǎng)均能夠生長良好,我們來看一下右邊這張圖,這個是葡萄球菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象,我們可以看到它呈均勻渾濁生長。5.如果將這類球菌接種到普通瓊脂平板上,培養(yǎng)24到48小時,那么就會在普通培養(yǎng)基上形成直徑是2到3毫米大小的圓形菌落,而且菌落表面光滑凸起,邊緣整齊濕潤,并且不同的細(xì)菌可以產(chǎn)生不同的脂溶性色素,比如金黃色,白色,檸檬色等。6.如果我們把金黃色葡萄球菌在血瓊脂平板上培養(yǎng)后觀察結(jié)果,我們來一起看看菌落呈什么顏色呢?是金黃色,這主要是由于產(chǎn)生了脂溶性的金黃色色素的緣故,那我們再仔細(xì)觀察一下,會發(fā)現(xiàn)菌落的周圍有明顯的β溶血環(huán),這主要是由于金黃色葡萄球菌產(chǎn)生了溶血素的緣故。7.另外葡萄球菌屬中的某些菌株耐鹽性強(qiáng),他們能夠耐受10%到15%的氯化鈉,因此可以用高鹽培養(yǎng)基對葡萄球菌屬進(jìn)行分離培養(yǎng),當(dāng)我們接種糞便,嘔吐物或者是剩余食物的標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)的時候,可以利于葡萄球菌的這個生長特點(diǎn)進(jìn)行分離培養(yǎng),因?yàn)樵诟啕}的情況下,革蘭陰性菌一般是不能生長的,從而達(dá)到分離選擇培養(yǎng)的目的,我們再來看左邊這張圖,它顯示的是金黃色葡萄球菌在高鹽甘露醇平板上的培養(yǎng)結(jié)果,因金黃色葡萄球菌能夠分解甘露醇,因此我們的菌落呈現(xiàn)的是淡橙黃色而表皮或者腐生葡萄球菌,呈現(xiàn)的則是白色或者是檸檬色。8.另外,在高鹽卵黃磷脂平板上,金黃色葡萄球菌可以產(chǎn)生卵磷脂酶,所以,在菌落的周圍可形成白色的沉淀環(huán),而表皮葡萄球菌或者是腐生葡萄球菌,則沒有這個現(xiàn)象,因此我們還是強(qiáng)調(diào)一下,大多數(shù)葡萄球菌,它們耐鹽性極強(qiáng)的,所以綜上所述的高鹽甘露醇和高鹽卵黃磷脂平板都可以作為葡萄球菌的選擇培養(yǎng)基。9.我們再來看看生化反應(yīng),葡萄球菌屬的生化反應(yīng),首先是碳水化合物氧化發(fā)酵試驗(yàn)(O/F試驗(yàn))呈發(fā)酵型,金黃色葡萄球菌能分解多種糖類產(chǎn)酸(如:葡萄糖,麥芽糖,蔗糖,甘露醇)。10.血漿凝固酶試驗(yàn)金黃色葡萄球菌是陽性,其他球菌是陰性.致病性葡萄球菌可產(chǎn)生2種血漿凝固酶:結(jié)合型和游離型,這兩種凝固酶使我們能夠在玻片法上看到微小的凝集顆粒,試管法上看到液態(tài)血漿不流動的現(xiàn)象。11.乳膠凝集試驗(yàn)陽性,此試驗(yàn)不僅可檢測金黃色葡萄球菌凝固酶,還可檢測葡萄球菌A蛋白(SPA)。12.下面我們一起了解一下葡萄球菌屬的臨床意義,葡萄球菌屬所致的疾病,主要包括侵襲性疾病和毒素性疾病,首先侵襲性疾病,也就是我們通常所說的化膿性感染,比如金黃色葡萄球菌,它主要可以引起皮膚軟組織的癤、癰、蜂窩組織炎等,還有外科手術(shù)切口、創(chuàng)傷等局部化膿性的感染,播散入血后,也可引起全身感染,引發(fā)敗血癥和膿毒血癥,表皮葡萄球菌是醫(yī)院感染的重要病原菌,腐生葡萄球多引起住院患者的尿路感染;毒素性疾病是葡萄球菌屬因?yàn)槟墚a(chǎn)生腸毒素,通過污染食物從而引起食物中毒,嬰幼兒也可引發(fā)皮膚燙傷綜合癥毒素,休克綜合癥毒素等,最后還有部分葡萄球菌可因長期使用抗生素而引起菌群失調(diào)導(dǎo)致假膜性腸炎。13.通過剛才講到的葡萄球菌所指的疾病中有一類疾病是食物中毒,大家注意到?jīng)]有,我們都知道食品安全關(guān)系到人民的生命安全,食品安全問題不僅僅是哪類國家的問題,乃是全球全人類的問題。這就是習(xí)總書記提出的“構(gòu)建人類命運(yùn)共同體”,總書記在“七一”重要講話精神中對我們青年一代的殷切期望中就有希望我們青年學(xué)生有社會責(zé)任感和擔(dān)當(dāng)意識;做好人民餐桌上的“守護(hù)神”,從而以科學(xué)態(tài)度和精益求精的“工匠精神”為祖國、為人民奉獻(xiàn)一生。13.那么假如我們碰到以上這些患者,在臨床上是如何對葡萄球菌屬進(jìn)行檢驗(yàn)?zāi)??下面我們主要從?biāo)本采集、檢驗(yàn)程序和檢驗(yàn)方法三個方面來共同學(xué)習(xí)。14.首先標(biāo)本采集,根據(jù)病情采集標(biāo)本,臨床上常見的標(biāo)本種類有:膿液、傷口分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、腦脊液、糞便等。注意在采集標(biāo)本時一定要遵循無菌操作原理,避免正常菌群污染。15.根據(jù)不同的檢驗(yàn)標(biāo)本,我們先進(jìn)行設(shè)計檢驗(yàn)程序,根據(jù)我們前面所學(xué)的知識,一起來看一下,當(dāng)我們?nèi)〉揭环菽撝瓨?biāo)本時,我們首先可以將標(biāo)本進(jìn)行涂片、染色、鏡檢,如果革蘭染色鏡檢的結(jié)果是革蘭染色陽性呈葡萄串狀排列的球菌,那此時我們就可以做出初步診斷報告,查見革蘭陽性球菌葡萄串狀排列,疑為葡萄球菌。16.但是有時臨床上需要對標(biāo)本中的疑似致病菌進(jìn)行分離培養(yǎng),那么我們對于不同的膿汁、穿刺液、中段尿等標(biāo)本可以選擇血瓊脂平板進(jìn)行接種,血液和腦脊液標(biāo)本則需要進(jìn)行增菌之后再接種到血瓊脂平板中,而糞便、嘔吐物或者是剩余的食物標(biāo)本則可接種在高鹽甘露醇平板上或者是高鹽卵黃磷脂平板上,從而有利于葡萄球菌的分離檢出,經(jīng)過以上分離培養(yǎng)之后,可根據(jù)菌落的形態(tài)、所產(chǎn)生的金黃色色素、β溶血現(xiàn)象等等,對平板上的可疑菌落
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