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文檔簡(jiǎn)介

食用菌生物學(xué)實(shí)驗(yàn)1精選課件ppt實(shí)驗(yàn)一母種培養(yǎng)基配制及棉塞制作一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、掌握食用菌固化培養(yǎng)基的配制。2、學(xué)會(huì)棉塞的制作方法。二、基本原理食用菌母種分離、移接和斜面保存菌種都必須要制作相應(yīng)的培養(yǎng)基,以備食用菌的培養(yǎng)、分離和保存之用。培養(yǎng)基是根據(jù)各種食用菌在生長(zhǎng)繁殖過程中對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)需求制成的,它可供給食用菌的C源、N源、水分、各種無機(jī)鹽及生長(zhǎng)物質(zhì)等。培養(yǎng)基的種類很多,本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)斜面培養(yǎng)基(PDA)制作。2精選課件ppt三.實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備1.器具:

天平、稱量紙、牛角匙、精密pH試紙、量筒、刻度搪瓷杯、試管、三角瓶、漏斗、漏斗架、玻璃棒、燒杯、試管架、鐵絲筐、剪刀、棉花、線繩、牛皮紙、皮筋、紗布、電爐、菜刀、菜板、小鋁鍋等。

2.材料:

馬鈴薯、葡萄糖或蔗糖、瓊脂、水。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

過程:制馬鈴薯濾液→融化瓊脂→培養(yǎng)基的分裝→棉塞的制作

方法步驟:3精選課件ppt1.配方(PDA):馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂15~20g,自來水1000ml,pH自然。

2.制作方法(1)制濾液:

馬鈴薯刮去粗皮,去芽眼,切成碎塊,稱量后放鍋中,加水1200~1300ml,將其煮沸20min。用雙層紗布過濾,取1000ml濾液。4精選課件ppt(2)化瓊脂:

將濾液加熱至將沸騰時(shí)加入瓊脂,不斷攪拌,注意控制火力不要使培養(yǎng)基溢出或燒焦。待瓊脂完全融化后加入剩余原料,并使其溶解(用熱水補(bǔ)足水量).

(3分裝:通過漏斗裝置,趁熱將培養(yǎng)基分裝于試管中,裝量約占試管高度的1/4(分裝三角瓶,其5精選課件ppt

裝量以不超過其容積的一半為宜)。注意管口或瓶口不要沾染培養(yǎng)基。(4)制棉塞

棉花以白色長(zhǎng)絨脫脂棉為宜。根據(jù)試管口大小取棉,將其卷成棉塞,最好外包一層紗布。將棉塞塞入試管口。棉塞塞入試管2/3。制做棉塞要求外表光滑,外包的紗不能折、松緊適宜等。6精選課件pptA.正確;B.不正確7精選課件ppt(5)

包扎:

管口堵入棉塞后7或9支試管扎一捆,棉塞部分用牛皮紙包扎。在包裝紙上標(biāo)明培養(yǎng)基名稱,制備組別和姓名、日期等。(6)、滅菌(7)、擺斜面(8)、存放冰箱(4-6C)

六、作業(yè)1、簡(jiǎn)述高壓滅菌鍋的使用。2、何謂滅菌?簡(jiǎn)述熱力滅菌的類型和原理。3.何時(shí)加入瓊脂?融化時(shí)注意什么問題?分裝的技術(shù)要求有哪些?

4.棉塞的作用有哪些和技術(shù)要求?菌種培養(yǎng)時(shí)管口堵膠塞或軟木塞行嗎?為什么?

8精選課件ppt實(shí)驗(yàn)二、食用菌接種環(huán)境的消毒、滅菌與斜面接種一.目的及要求:1.掌握食用菌斜面接種方法及無菌操作技術(shù)。2、能正確分析自己的接種效果。二、基本原理:食用菌斜面接種是食用菌栽培過程中最基本的方法之一,也是食用菌制種工作最重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。因?yàn)樵谑秤镁耘噙^程中,一旦斜面接種污染,后面的工作將無法進(jìn)行,故斜面菌種的接種、分離和移接非常重要,必須在嚴(yán)格無菌操作條件下進(jìn)行,才能獲得純菌絲體(純菌)。9精選課件ppt三、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

1.材料:空白斜面培養(yǎng)基(無菌檢驗(yàn))、母種等

2.器具:酒精燈、接種環(huán)、火柴、尖頭鑷、酒精棉球、大鑷子、接種箱、超凈工作臺(tái)、高錳酸鉀、37%甲醛溶液、紫外燈、2%來蘇水、標(biāo)簽紙等。

四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、

接種環(huán)境的處理2、母種的轉(zhuǎn)管技術(shù)10精選課件ppt五、方法步驟1.接種環(huán)境的處理(1)接種箱的熏蒸:

先用2%來蘇清潔接種箱內(nèi)外,放入接種所需的物品,用甲醛熏蒸。每立方米空間一般用甲醛10ml,加半量高錳酸鉀(5~7g)使甲醛氧化揮發(fā)。先將高錳酸鉀放入接種箱內(nèi)的容器中,再注入甲醛,立即產(chǎn)生強(qiáng)烈刺激的甲醛氣體。熏蒸25--30min。11精選課件ppt(2)超凈工作臺(tái)的消毒:用消毒液擦拭臺(tái)面后放置接種所需物品,開啟超凈工作臺(tái)上的紫外燈,照射20-30分后使用。

2.母種的轉(zhuǎn)管技術(shù)(1)手及菌種管的消毒:用肥皂洗手,再用75%酒精棉球擦手和菌種管表面,在酒精燈焰上略燒試管外的棉塞后,立即將菌種管放入接種箱內(nèi)。(2)轉(zhuǎn)管:兩手從接種孔伸人接種箱內(nèi),酒精棉球擦拭接種環(huán)。左手持菌種管和斜面管,兩支試管口對(duì)齊于火焰上方。右手持接種環(huán)或針和鏟等,并將其在燈焰上干熱滅菌,用小指及無名指拔掉棉塞,接種環(huán)冷卻后伸入菌種管內(nèi)取略豆粒大菌種塊,迅速移人斜面培養(yǎng)基的中部。然后將棉塞在火焰上燒一下,立即塞入試管口,旋緊棉塞。接種環(huán)不要觸碰管口及管壁。接種后的試管應(yīng)立即貼標(biāo)簽,注明菌種名稱及接種日期,再進(jìn)行適溫培養(yǎng)。12精選課件ppt母種轉(zhuǎn)管過程13精選課件ppt六、作業(yè)1、何謂無菌操作、消毒?消毒分哪幾種類型?2、同學(xué)相互評(píng)比接種結(jié)果

分析自己接種成敗的原因。

14精選課件ppt實(shí)驗(yàn)三、食用菌母種制作分離技術(shù)一、目的要求

1、明確食用菌無菌操作技術(shù)要點(diǎn)。2、掌握食用菌母種分離技術(shù)。二、基本原理:食用菌母種分離方法較多,但主要采用組織和孢子分離,所不同的是前者取子實(shí)體某塊組織,后者取子實(shí)體的孢子經(jīng)過培養(yǎng)形成的純菌絲體(純種)。三、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

1.材料:空白斜面培養(yǎng)基(空白培養(yǎng)無菌).食用菌子實(shí)體等

2.器具:

酒精燈、接種環(huán)、火柴、尖頭鑷、酒精棉球、大鑷子、接種箱、超凈工作臺(tái)、高錳酸鉀37%甲醛溶液、紫外燈、2%來蘇水、標(biāo)簽紙等。15精選課件ppt四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、

組織分離2、

孢子分離五、方法步驟

1.接種環(huán)境的處理

(1)接種箱的熏蒸

先用2%來蘇清潔接種箱內(nèi)外,放入接種所需的物品,用甲醛熏蒸。每立方米空間一般用甲醛10ml,加入高錳酸鉀(5~7g)使甲醛氧化揮發(fā)。先將高錳酸鉀放入接種箱內(nèi)的容器中,再注入甲醛,立即產(chǎn)生強(qiáng)烈刺激的甲醛氣體。熏蒸20--30min。16精選課件ppt(2)超凈工作臺(tái)的消毒

用消毒液擦拭臺(tái)面后放置接種所需物品,開啟超凈工作臺(tái)上的紫外燈,照射20-30min后使用。

接入的母種

2.組織分離法

此法是生產(chǎn)中最常用的方法,具有操作簡(jiǎn)便,菌絲萌發(fā)快,分離所得的菌種在培養(yǎng)基條件適宜的情況下,能保持原菌種的優(yōu)良性狀。17精選課件ppt(1)種菇消毒

在接種箱內(nèi),用鑷子夾著燃燒的酒精棉球迅速擦拭菇體。(2)取接組織將菇體撕開,用無菌尖頭鑷在柄蓋交界處取綠豆粒大組織,放入斜面培養(yǎng)基中央,迅速塞上棉塞。

3.多孢子分離(1)鉤懸法是一種特別適用于耳類,也適用于傘菌類的多孢分離法。

在接種箱內(nèi)將一小塊消毒的耳片或菇片懸掛于無菌三角瓶?jī)?nèi)(裝約1cm厚的培養(yǎng)基),在25℃左右條件下,約24h現(xiàn)孢子粉時(shí)以無菌操作法取出分離材料。適溫培養(yǎng)后挑取健壯尖端菌絲轉(zhuǎn)管。18精選課件ppt(2)孢子印分離法

取成熟子實(shí)體經(jīng)表面消毒后,切去菌柄,將菌褶向下放置于滅過菌的有色紙上,在20~24℃靜置一天,大量孢子落下形成孢子印,接種環(huán)沾少量孢子在試管或平板培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)。

19精選課件ppt

4.母種的培養(yǎng)

將斜面朝下斜置疊放于瓷盤中,放于培養(yǎng)箱中適溫培養(yǎng)。2~3天后每天都要檢查菌絲生長(zhǎng)情況。及時(shí)挑揀污染試管(出現(xiàn)粘膜或雜色)。

5.注意事項(xiàng):分離的母種一定純化后再做出菇試驗(yàn)。

(1)純化菌絲長(zhǎng)至斜面1/2時(shí),挑尖絲轉(zhuǎn)管,培養(yǎng)成再生母種。

(2)出菇試驗(yàn)將再生母種擴(kuò)成原種、栽培種,使其出菇??串a(chǎn)量、質(zhì)量、形態(tài)、長(zhǎng)勢(shì)、抗性如何,經(jīng)鑒定為優(yōu)質(zhì)菌種后,才可供生產(chǎn)使用。

(3)控制菌齡菌絲即將長(zhǎng)滿斜面(一般7~10天)終止培養(yǎng)。分別用于菌種保藏或繁衍原種。20精選課件ppt六、作業(yè)1、食用菌菌種分離技術(shù)有哪些方法?生產(chǎn)上最常用的是哪一種?2、.孢子分離的母種為何一定要做出菇試驗(yàn)?

3.試設(shè)計(jì)一個(gè)分離野生平菇菌種的實(shí)驗(yàn)方案21精選課件ppt實(shí)驗(yàn)四.食用菌原種栽培種培養(yǎng)基(料)的配制與消毒滅菌

一、目的要求1、掌握原種、栽培種培養(yǎng)基(料)的類型。2、學(xué)會(huì)原種、栽培種培養(yǎng)基(料)的配制方法。

二、基本原理22精選課件ppt

食用菌原種及栽培種培養(yǎng)基的種類很多,根據(jù)主料不同分為糧食顆粒、棉子殼、稻草、玉米芯、糞草、木削等多種。原種、栽培種培養(yǎng)基(料)的配制基本相同,所不同的是原種培養(yǎng)基更精細(xì),營養(yǎng)更豐富、更全面,更易被菌絲吸收;栽培種培養(yǎng)基更粗放,更廣泛,更接近生產(chǎn)實(shí)際。原種、栽培種兩菌種的生產(chǎn)過程基本相同,主要區(qū)別在于接種時(shí)取接的菌種不一樣。23精選課件ppt

三、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備1.材料:

棉籽殼、麩皮、蔗糖、石灰粉、過磷酸鈣等。2.器具;

棉塞、打孔棒、菌種袋或瓶、標(biāo)簽、高壓滅菌鍋、接種箱、消毒藥品、線繩等。

四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、培養(yǎng)料的配制2、

菌種瓶及菌種袋的分裝24精選課件ppt

五、方法步驟(一)培養(yǎng)基的配制

(1)配方與配制P102

①糧食顆粒培養(yǎng)基(麥粒、玉米粒等)

配方:糧食粒98.5%,石膏粉1%,碳酸鈣0.5%。配制:將洗凈的糧食粒洗凈,用1%石灰水泡脹,文火煮沸15~20min(熟而不爛,勿破皮),撈出晾至無明水后拌入余料。原種多使用顆粒培養(yǎng)基。25精選課件ppt

②棉籽殼麥麩培養(yǎng)基

配方:棉籽殼87%,麥麩10%,白糖1%,石灰1%,過磷酸鈣1%。

配制:將棉籽殼、麥麩、石灰混合為主料,余料溶解于少量水后澆入主料中。邊加清水邊翻拌至含水量達(dá)60%~65%(緊握料的指縫中有水泌出而不下滴)。26精選課件ppt

(2)分裝:原種培養(yǎng)基裝入菌種瓶(或其他大口瓶),裝量約占瓶高的1/2(非顆粒培養(yǎng)基可裝至瓶肩,用錐形棒打一料孔),瓶口擦凈,堵棉塞后外包牛皮紙或雙層報(bào)紙。

栽培種培養(yǎng)基一般裝入聚丙烯菌種袋,上端套頸圈后如同瓶口包扎法。兩端開口的菌種袋可將兩端扎活結(jié)。裝料要求外緊內(nèi)松,培養(yǎng)料需緊貼瓶壁或袋壁。松散的培養(yǎng)料會(huì)導(dǎo)致菌絲斷裂及影響對(duì)養(yǎng)分、水分的吸收。27精選課件ppt(二)培養(yǎng)基的滅菌原種與栽培種培養(yǎng)基的容器大、裝量多,應(yīng)增加滅菌壓力及滅菌時(shí)間。高壓蒸汽滅菌,一般在壓力(1.5kg/cm2)、溫度約128.1℃條件下,保持滅菌時(shí)間1~2h。若采用常壓滅菌,需保持最高溫度10h左右,再悶1天或1晚。

六、作業(yè)(料)的配置有何不同?糧食顆粒為何要進(jìn)行泡和煮?

28精選課件ppt

實(shí)驗(yàn)五、食用菌原種、栽培種接種環(huán)境消毒、滅菌與接種

一、目的要求1、掌握接種前的準(zhǔn)備工作及原種、栽培種的接種。2、能通過培養(yǎng)觀察分析自己的接種結(jié)果和存在的問題。二、基本原理食用菌菌種制作分為三個(gè)階段,即:母鐘、原種、栽培種;栽培種是對(duì)菌種的再次擴(kuò)大培養(yǎng),為食用菌生產(chǎn)提供大量?jī)?yōu)質(zhì)菌種,是生產(chǎn)的需求。同時(shí),也使菌種適應(yīng)大生產(chǎn)用的栽培料和生態(tài)環(huán)境的需求,通過菌種的多次擴(kuò)繁提純以逐級(jí)檢查菌種的品質(zhì),及時(shí)存優(yōu)去劣,以獲得高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)菌種。29精選課件ppt

三、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

材料器具:

一、二級(jí)菌種、接種耙鏟、大鑷子、酒精燈、火柴、酒精棉球、標(biāo)簽、高壓滅菌鍋、接種箱、消毒藥品等。

四、方法步驟食用菌一二級(jí)菌種的生產(chǎn)過程基本相同,主要區(qū)別在于接種時(shí)取接的菌種不一樣。

(一)接種轉(zhuǎn)管(瓶)滅菌后的原種及栽培種培養(yǎng)基及時(shí)運(yùn)送至無菌環(huán)境中,待料溫降至約24℃,進(jìn)行搶溫接種。30精選課件ppt(1)接原種

用接種耙鏟取蠶豆大母種(連同培養(yǎng)基)放于瓶中培養(yǎng)料的孔口處用料蓋實(shí)(一般1支母種可接10支再生試管母鐘;一只再生試管母鐘約接5~8瓶原種)31精選課件ppt

(2)接栽培種

用大鑷子、接種鏟或接種匙取棗大原種,放于瓶或袋中料面上(若兩端扎活結(jié)的菌種袋,每端都要接入原種)。1瓶原種約接60瓶或25-30袋栽培種。去棄表面老化菌絲及老種塊。堵棉塞或用線繩扎袋口。貼標(biāo)簽,注明菌種名稱和接種日期。32精選課件ppt(二)培養(yǎng)接種后將種瓶(袋)置于適溫下培養(yǎng)。菌種瓶初放時(shí),應(yīng)直立于床架上,當(dāng)菌絲吃料后,再將其橫放;菌種袋根據(jù)氣溫可單層或多層疊放,隔4~5天轉(zhuǎn)動(dòng)或調(diào)換位置,以利于受溫一致,并避免培養(yǎng)料水分的沉積;經(jīng)常檢查及時(shí)去除出現(xiàn)雜色、粘液及菌種死亡的瓶或袋;

逐漸降溫當(dāng)菌絲長(zhǎng)至料深的1/2時(shí),降溫2~3℃,以免料溫升高,菌絲生長(zhǎng)細(xì)弱;注意菌齡原種約30天、栽培種約20~30天菌絲長(zhǎng)滿,再繼續(xù)培養(yǎng)7~10天是使用的最好菌齡。33精選課件ppt

五、作業(yè)1、原種和栽培種培養(yǎng)基(料)的配置有何不同?2、何謂接種?一只試管種可接多少瓶原種和栽培種?3、菌種的表面有一塊殘留的瓊脂塊,證明該菌種是哪級(jí)菌種?菌種表面有少許玉米粒或麥粒,證明該菌種是哪級(jí)菌種?菌種在適宜條件下培養(yǎng)了十多天,發(fā)現(xiàn)有些菌種塊絲毫未萌動(dòng),請(qǐng)分析原因?34精選課件ppt

實(shí)驗(yàn)六、食用菌制種及栽培中主要病蟲害識(shí)別綜合觀察分析(綜合)

一、目的要求能正確識(shí)別主要病蟲害的形態(tài)特征及侵染癥狀,分析產(chǎn)生的原因,能采取正確的防治方法。

二、基本原理食用菌栽培中,優(yōu)良的菌種是最關(guān)鍵條件。因此,必須通過各類菌種培養(yǎng)觀察中篩選出菌體潔白,生長(zhǎng)旺盛,無污染和蟲害的純菌絲體(純種)用于生產(chǎn),否則會(huì)直接影響產(chǎn)量和質(zhì)量。35精選課件ppt

三、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

1、材料:被侵染的培養(yǎng)料和子實(shí)體

2、器具:放大鏡、顯微鏡、解剖鏡、接種針、尖頭鑷、載玻片、蓋玻片、吸水紙、酒精燈、火柴、無菌水、染色劑等。

四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

1、主要(競(jìng)爭(zhēng)性)真菌侵染癥狀的識(shí)別2、主要病蟲害的識(shí)別36精選課件ppt

五、方法步驟

1.主要(競(jìng)爭(zhēng)性)真菌侵染癥狀的識(shí)別。

(1)觀察:用肉眼和放大鏡觀察木霉、青霉、曲霉、毛霉、根霉、雜菌的危害癥狀。

(2)鏡檢:載玻片中央滴半滴無菌水或染色劑,無菌尖頭鑷取少許污染材料置于水或染液中,無菌接種針輕輕撥散,放蓋片。低倍鏡找理想目標(biāo)

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