蘋(píng)果白絹病菌生物學(xué)特性及室內(nèi)藥劑毒力測(cè)定

收稿日期:;修回日期:基金項(xiàng)目：國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃（2016YFD0201100）,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程（CAAS-ASTIP）,中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專(zhuān)項(xiàng)(1610182019017)第一作者：徐成楠（1981—），博士，副研究員，主要從事果樹(shù)病原真菌學(xué)及其綜合防控。Email:xuchengnan@通信作者：周宗山。Email:zszhouqrj@163.com蘋(píng)果白絹病菌生物學(xué)特性及室內(nèi)藥劑毒力測(cè)定徐成楠，遲福梅，冀志蕊，張俊祥，王娜，周宗山中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹(shù)研究所,遼寧興城,125199摘要:在遼寧綏中縣發(fā)現(xiàn)蘋(píng)果白絹病發(fā)生為害，為明確病原菌種類(lèi)，將采集病樣進(jìn)行分離培養(yǎng)，并進(jìn)行柯赫氏法則驗(yàn)證致病性，根據(jù)病原菌形態(tài)和rDNA-ITS和LSU序列分析對(duì)病菌進(jìn)行分子鑒定，同時(shí)進(jìn)行了病菌生物學(xué)特性及防治藥劑毒力測(cè)定。結(jié)果表明，分離株的菌落形態(tài)與齊整小核菌SclerotiumrolfsiiSacc.一致，經(jīng)分子鑒定，其ITS序列和LSU序列與齊整小核菌的有性型序列同源性達(dá)100%，將引起蘋(píng)果白絹病的病原菌鑒定為齊整小核菌。病原菌在10~35℃均可生長(zhǎng)，25~30℃時(shí)病菌生長(zhǎng)最快，病原菌在pH值范圍為3~12時(shí)均可生長(zhǎng)，堿性環(huán)境不適宜病菌生長(zhǎng)。室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果顯示，5種藥劑戊唑醇、吡唑醚菌酯、噻呋酰胺、咯菌腈和氟硅唑均對(duì)白絹病菌有抑制作用，其中，噻呋酰胺抑菌效果最好，EC50為0.0565mg/L。關(guān)鍵詞：蘋(píng)果白絹?。积R整小核菌；生物學(xué)特性；毒力測(cè)定我國(guó)是世界范圍內(nèi)蘋(píng)果生產(chǎn)大國(guó)，栽植面積及總產(chǎn)量均占全世界的50%左右，鮮食消費(fèi)量和加工消費(fèi)量逐年增長(zhǎng)，蘋(píng)果出口位居世界前列[1]。遼寧省是我國(guó)渤海灣地區(qū)重要的蘋(píng)果產(chǎn)區(qū)之一，蘋(píng)果種植是省內(nèi)很多地區(qū)果農(nóng)主要的經(jīng)濟(jì)來(lái)源[2]。蘋(píng)果病害是影響我國(guó)蘋(píng)果產(chǎn)業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展的限制性因素之一，在我國(guó)不同時(shí)期不同省份地區(qū)給果農(nóng)造成重大損失[3]。2016年我們針對(duì)遼寧省蘋(píng)果主產(chǎn)區(qū)9個(gè)區(qū)縣144個(gè)蘋(píng)果園進(jìn)行病害發(fā)生情況調(diào)研，結(jié)果表明遼寧省蘋(píng)果栽培中主要病害為蘋(píng)果樹(shù)腐爛病、枝干輪紋病、斑點(diǎn)落葉病和炭疽葉枯病等[2]。然而，隨著矮砧密植種植模式在遼寧省的廣泛興起，部分蘋(píng)果園矮砧幼樹(shù)及近成齡樹(shù)發(fā)生的次要病害呈逐年上升趨勢(shì)。我國(guó)蘋(píng)果栽培中鮮有關(guān)于蘋(píng)果白絹病的發(fā)生報(bào)道，近年來(lái)僅有山東部分地區(qū)的科研及技術(shù)推廣部門(mén)初步報(bào)道了該病害的發(fā)生及防治[4-6]。2018年9月，課題組在遼寧綏中沙河鎮(zhèn)矮砧果園進(jìn)行病害調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn)蘋(píng)果白絹病疑似癥狀，為了明確診斷病害和病原菌種類(lèi)，進(jìn)行癥狀、病情調(diào)研和采樣，同時(shí)對(duì)引起病害的病原菌進(jìn)行了生物學(xué)特性研究和室內(nèi)高效藥劑篩選研究，以期為該病害的防治提供參考。1材料與方法1.1樣品采集與病原菌的分離純化2018年9月針對(duì)遼寧省綏中縣沙河鎮(zhèn)矮砧密植蘋(píng)果園開(kāi)展病害調(diào)研，重點(diǎn)針對(duì)病株率發(fā)病特征進(jìn)行調(diào)查，對(duì)病害癥狀進(jìn)行詳細(xì)記錄和拍照，采集疑似白絹病典型癥狀的病株樹(shù)皮組織及根系樣本裝入塑封袋帶回實(shí)驗(yàn)室。采用常規(guī)組織分離法對(duì)采集的典型標(biāo)樣進(jìn)行分離[7]，將樣本病健交界處組織切取為0.5mm×0.5mm大小的方塊，用75酒精表面消毒60s，再用無(wú)菌水漂洗3遍，自然風(fēng)干后放置于加入0.5%乳酸的PDA平板上，每皿接3塊，置于25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)3d后，挑取菌絲尖端純化并編號(hào)，轉(zhuǎn)入試管內(nèi)4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?.2病原菌的致病性測(cè)定病原菌致病性測(cè)定采用菌絲塊接種法在蘋(píng)果枝條、果實(shí)和葉片上進(jìn)行。采集健康長(zhǎng)勢(shì)均一的蘋(píng)果一年生枝條、果實(shí)和葉片表面先用75%酒精消毒，再用無(wú)菌水沖洗干凈，自然風(fēng)干。蘋(píng)果枝條截取為25mm后進(jìn)行兩端封蠟，用直徑4mm的菌絲塊接種于枝條表面，每根枝條接3個(gè)菌塊，每處理3根枝條；果實(shí)消毒處理后，每果實(shí)接種3個(gè)菌塊，每處理3個(gè)果實(shí)；每葉片接種6個(gè)菌塊，每處理3個(gè)葉片。所有致病性試驗(yàn)無(wú)傷及刺傷接種同時(shí)進(jìn)行，重復(fù)2次，接種無(wú)菌PDA瓊脂塊作為對(duì)照。將接種的蘋(píng)果枝條、果實(shí)及葉片分別置于搪瓷盤(pán)及塑料盒中保濕25℃恒溫培養(yǎng)，逐日觀察并記錄發(fā)病情況。1.3病原菌鑒定1.3.1形態(tài)學(xué)鑒定將純化的分離株轉(zhuǎn)接至PDA培養(yǎng)基上，置于25℃恒溫黑暗培養(yǎng)5d，逐日觀察菌落形態(tài)特征，并在顯微鏡下觀察菌絲的形態(tài)及產(chǎn)孢情況。查閱相關(guān)文獻(xiàn)[8-10]確定病菌的分類(lèi)地位。1.3.2分子生物學(xué)鑒定將供試菌株YG1和YG2在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)3d，收集菌絲體置于1.5mL離心管中，采用CTAB法提取分離株DNA，置于-20℃冰箱中備用。對(duì)供試菌株的對(duì)供試菌株的ITS和LSU基因進(jìn)行擴(kuò)增與測(cè)序，引物及退火溫度參見(jiàn)相關(guān)參考文獻(xiàn)[10]，由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。50μLPCR反應(yīng)體系：2×EsTaqMasterMix25μL（康為世紀(jì)CWBIO）、總DNA模板2μL、10μmol/L上下游引物各2μL、ddH2O19μL。PCR反應(yīng)條件為：94℃預(yù)變性5min；94℃變性30s，55℃退火30s（ITS）和49℃退火60s（LSU），72℃延伸1min，共35個(gè)循環(huán)；最后72℃延伸10min，4℃保存。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠檢測(cè)后，送往生工生物工程（上海）股份有限公司測(cè)序。將測(cè)序結(jié)果在NCBI進(jìn)行Blast同源性比對(duì)，確定菌株種類(lèi)歸屬后將相關(guān)基因提交至GenBank。1.4病原菌生物學(xué)特性研究將純化的病原菌菌株YG1接種至PDA平板上，培養(yǎng)3d后采用十字交叉法測(cè)量不同碳氮源、溫度、pH值條件下的菌落直徑，分析不同條件下菌落直徑的差異[11]，每處理重復(fù)3次。碳氮源：以馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，以等摩爾質(zhì)量的木糖、半乳糖、果糖、蔗糖、山梨醇、麥芽糖和葡萄糖作為碳源，以等摩爾質(zhì)量的甘氨酸、酒石酸銨、牛肉浸膏、尿素、硝酸銨、硫酸銨和胰蛋白胨作為氮源，將菌株接種于不同碳氮源培養(yǎng)基后，于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3d。溫度：將菌株YG1接種于PDA培養(yǎng)基上，并將其置于5、10、15、20、25、30、35和37℃條件下培養(yǎng)3d。pH值：將菌株YG1接種于pH值分別為3、4、5、6、7、8、9、10、11、12的培養(yǎng)基上，25℃培養(yǎng)3d。病原菌菌絲致死溫度試驗(yàn)：將直徑4mm的菌塊移入裝有5mL無(wú)菌水的試管中，將試管分別置于40、45、50、55和60℃的恒溫水浴鍋中處理10min，然后移至PDA平板上25℃培養(yǎng)3d，每溫度處理重復(fù)3皿。產(chǎn)草酸能力測(cè)定：采用BPDA培養(yǎng)基進(jìn)行病菌產(chǎn)草酸能力的半定量測(cè)定，每升PDA培養(yǎng)基中加入60mg溴酚藍(lán)[12]，即為BPDA培養(yǎng)基。菌株YG1活化后，用打孔器打取菌落邊緣菌塊，接種至BPDA培養(yǎng)基平板上，置于25℃黑暗培養(yǎng)，逐日觀察記錄培養(yǎng)基轉(zhuǎn)變顏色情況，以確定菌株產(chǎn)草酸能力強(qiáng)弱，試驗(yàn)重復(fù)3次。1.5病原菌室內(nèi)藥劑毒力測(cè)定以菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定5種殺菌劑對(duì)供試菌株的室內(nèi)毒力[13]（藥劑詳細(xì)種類(lèi)及濃度見(jiàn)表1）。表1供試藥劑、生產(chǎn)廠家及濃度設(shè)置藥劑名稱(chēng)劑型生產(chǎn)廠家濃度設(shè)置/mg·L—1400g/L氟硅唑乳油青島星牌作物科學(xué)有限公司0.05、0.1、1.0、5.0、10.015%吡唑醚菌酯懸浮劑北京燕化永樂(lè)生物科技股份有限公司0.05、0.1、1.0、5.0、10.0240g/L噻呋酰胺懸浮劑天津市漢邦植物保護(hù)劑有限責(zé)任公司0.005、0.025、0.05、0.1、1.025g/L咯菌腈懸浮種衣劑先正達(dá)作物保護(hù)有限公司0.05、0.1、0.5、1.0、5.0430g/L戊唑醇懸浮劑成都科利隆生化有限公司0.05、0.1、1.0、5.0、10.0在滅菌的PDA培養(yǎng)基冷卻至55℃左右時(shí)，加入藥劑，充分混勻，配制成系列濃度梯度的含藥平板，以加入等量無(wú)菌水的平板作為對(duì)照。用直徑4mm打孔器取病菌菌餅，接種至含藥PDA培養(yǎng)基中央，菌絲面朝下接觸培養(yǎng)基，每藥劑不同濃度處理重復(fù)4次，置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待對(duì)照長(zhǎng)滿90mm培養(yǎng)皿后，用十字交叉法測(cè)量各處理的菌落直徑，計(jì)算各殺菌劑對(duì)病原菌生長(zhǎng)的抑制率。抑制率（%）=[（對(duì)照菌落平均直徑－含藥平板菌落平均直徑）/（對(duì)照菌落平均直徑－菌餅直徑）]×100。根據(jù)抑制率求出各藥劑的毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)和有效抑制中濃度（EC50）。1.6統(tǒng)計(jì)分析方法試驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用Excel2007和SAS9.1統(tǒng)計(jì)分析。單因素方差分析，采用Duncan新復(fù)極差法進(jìn)行差異顯著性分析。長(zhǎng)度數(shù)值以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。2結(jié)果與分析2.1病害發(fā)生情況與癥狀調(diào)查結(jié)果表明遼寧省綏中縣沙河鎮(zhèn)感病蘋(píng)果樹(shù)品種為中秋王，病株率為20%并且有逐漸發(fā)生嚴(yán)重的趨勢(shì)。感病植株樹(shù)勢(shì)衰弱，葉片失綠、萎蔫甚至落葉。根部病斑從貼近地表處開(kāi)始，集中在根莖部蔓延擴(kuò)展，致使皮層被環(huán)割而最終導(dǎo)致整樹(shù)枯死，發(fā)病部位呈黃褐色至紅褐色濕腐狀，多汁液。感病樹(shù)體皮層組織腐爛成爛泥狀，極易剝離，具有刺鼻酸味，感病木質(zhì)部組織呈紅褐色。根莖部發(fā)病部位具有明顯的白色菌絲層，病部還著生大量大小如油菜籽狀褐色至黑褐色菌核，白色菌絲層和菌核蔓延到樹(shù)體根系周?chē)耐寥篮碗s草上（見(jiàn)圖1-A,B）。依據(jù)發(fā)病樹(shù)體癥狀特征，初步判斷引起根腐癥狀為蘋(píng)果樹(shù)白絹病。注：A，B為病害田間癥狀;C為枝條回接發(fā)病癥狀;D為果實(shí)回接發(fā)病癥狀;E為葉片回接發(fā)病癥狀。圖1蘋(píng)果白絹病的田間癥狀與致病性測(cè)定2.2病原菌的致病性用純培養(yǎng)分離物菌絲塊接種健康蘋(píng)果枝條，恒溫保濕培養(yǎng)3d后開(kāi)始顯癥（見(jiàn)圖1-C）。病斑呈黃色至黃褐色，沿著接種點(diǎn)上下擴(kuò)展，呈橢圓形，接種5d后病斑長(zhǎng)度可達(dá)15~23mm，病斑表面形成白色的菌體體，無(wú)傷與對(duì)照枝條均未發(fā)病。果實(shí)接種3d后呈現(xiàn)褐色水漬狀近圓形病斑（見(jiàn)圖1-D），接種5d后病斑直徑可達(dá)15~30mm，無(wú)傷對(duì)對(duì)照果實(shí)均未發(fā)病。健康葉片接種2d后即可出現(xiàn)水漬狀褐色病斑（見(jiàn)圖1-E），不規(guī)則形，葉片病部失水萎蔫，無(wú)傷接種同樣發(fā)病。再次針對(duì)室內(nèi)接種發(fā)病的枝條、葉片及果實(shí)的典型病斑進(jìn)行分離培養(yǎng)，獲得與接種菌株形態(tài)特征一致的病原菌，完成了柯赫氏法則驗(yàn)證，證明引起遼西地區(qū)蘋(píng)果根腐病的病菌為白絹病菌。2.3病原菌形態(tài)學(xué)鑒定菌株在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)茂盛，菌絲白色羽毛狀，較纖細(xì)，菌落呈圓形輻射狀擴(kuò)展，培養(yǎng)3d即可長(zhǎng)滿直徑為90mm的培養(yǎng)皿（見(jiàn)圖2-A）。培養(yǎng)5~6d后形成菌核，菌核表生，集中分布或分散分布，球形或者橢圓形，初期白色，逐漸轉(zhuǎn)為淡褐色，最后變?yōu)樯詈稚ㄒ?jiàn)圖2-B）。菌核表面光滑，具有光澤，內(nèi)部灰白色，直徑大小約為1.5~2.2mm。根據(jù)菌落、菌核形態(tài)特征初步判斷分離株為齊整小核菌（SclerotiumrolfsiiSacc.）圖2蘋(píng)果白絹病菌菌落形態(tài)特征2.4病原菌的分子鑒定以供試分離株YG1和YG2的DNA為模板，擴(kuò)增其rDNA-ITS和LSU基因區(qū)域，經(jīng)DNA測(cè)序分析分別獲得了684bp和685bp大小的ITS基因片段，661bp大小的LSU基因片段，將相關(guān)序列提交至GenBank，登錄號(hào)為MK424481~MK424484。經(jīng)BLAST比對(duì)分析，所獲序列與GenBank中的齊整小核菌SclerotiumrolfsiiSacc.相關(guān)菌株相似性均達(dá)99%~100%。結(jié)合病原菌形態(tài)特征及DNA序列比對(duì)分析，將分離株YG1、YG2鑒定為齊整小核菌SclerotiumrolfsiiSacc.。2.5病原菌的生物學(xué)特性2.5.1不同碳氮源的影響碳氮源試驗(yàn)結(jié)果表明，病原菌在葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)最好，培養(yǎng)3d菌落直徑可達(dá)90.0mm；生長(zhǎng)較差的碳源是木糖，培養(yǎng)3d菌落直徑僅為12.0mm。病原菌在胰蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)最好，培養(yǎng)3d菌落直徑可達(dá)26.5mm，在以尿素為氮源的培養(yǎng)基上無(wú)法生長(zhǎng)（表2）。表2不同碳氮源對(duì)蘋(píng)果白絹病菌菌落生長(zhǎng)的影響不同碳源菌落直徑/mm不同氮源菌落直徑/mm葡萄糖90.0±0.0A胰蛋白胨26.5±5.8A蔗糖28.3±3.9B酒石酸銨23.8±1.8AB山梨醇26.8±8.0B硫酸銨23.2±7.3AB麥芽糖23.0±6.4BC酵母浸膏23.0±2.7AB果糖18.8±1.5CD硝酸銨22.5±2.3AB半乳糖17.5±3.9D甘氨酸21.0±4.5B木糖12.0±2.8E尿素4.0±0.0C注：不同大寫(xiě)字母表示差異顯著（p＜0.05）2.5.2溫度和pH值對(duì)病原菌生長(zhǎng)影響病原菌在5℃條件下僅可微弱生長(zhǎng)，在10~35℃均可正常生長(zhǎng)，25~30℃時(shí)病菌生長(zhǎng)最快，3d之日均可長(zhǎng)滿90mm培養(yǎng)皿，培養(yǎng)溫度為37℃時(shí)病菌幾乎無(wú)法生長(zhǎng)。病原菌在pH值范圍為3~12時(shí)均可生長(zhǎng)，當(dāng)pH值為3~9時(shí)，病原菌生長(zhǎng)最快，培養(yǎng)3d即可長(zhǎng)至90mm，當(dāng)pH值為10時(shí)，病原菌隨著pH值增加生長(zhǎng)逐漸變慢（表3）。表3不同溫度和pH值對(duì)蘋(píng)果白絹病菌菌落生長(zhǎng)的影響溫度/℃菌落直徑/mmpH值菌落直徑/mm57.8±0.7E390±0.0A1019.3±1.0D490±0.0A1558.0±2.0B590±0.0A2088.8±2.3A690±0.0A2590.0±0.0A790±0.0A3090.0±0.0A890±0.0A3550.0±4.1C990±0.0A378.0±0.0E1081.3±1.0B1161.8±2.9C1222.3±2.1D注：不同大寫(xiě)字母表示差異顯著（p＜0.05）2.5.3病原菌致死溫度及產(chǎn)草酸能力經(jīng)50℃水浴處理后的菌絲塊無(wú)法在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，由此明確該菌菌絲致死溫度為50℃。供試菌株在溴酚藍(lán)指示培養(yǎng)基（BPDA）平板上黑暗培養(yǎng)2d后開(kāi)始轉(zhuǎn)色，3d后最終使培養(yǎng)基由藍(lán)色轉(zhuǎn)變成為黃色，由此確定病原菌具有產(chǎn)草酸能力。2.6幾種殺菌劑對(duì)病菌的室內(nèi)毒力選擇生產(chǎn)上常見(jiàn)的5種殺菌劑進(jìn)行了蘋(píng)果白絹病菌菌絲生長(zhǎng)抑制比較研究，結(jié)果表明，供試5種藥劑對(duì)病原菌均有抑制作用，各殺菌劑毒力回歸方程的相關(guān)系數(shù)均接近于1，可信度較高，由其推算的EC50值也比較準(zhǔn)確。噻呋酰胺對(duì)蘋(píng)果白絹病菌菌絲生長(zhǎng)抑制作用最強(qiáng)，EC50為0.0565，戊唑醇對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)抑制作用最差，EC50為0.7564，吡唑醚菌酯、咯菌腈和氟硅唑?qū)z生長(zhǎng)抑制效果居中，EC50大小從0.2675至0.5965（見(jiàn)表4）。表4不同殺菌劑對(duì)蘋(píng)果白絹病菌菌絲生長(zhǎng)的毒力藥劑回歸方程相關(guān)系數(shù)EC50/mg·L—1400g/L氟硅唑y=5.2279x+1.01600.96880.596515%吡唑醚菌酯y=5.5322x+0.92930.97250.2675240g/L噻呋酰胺y=6.4452x+1.15790.98800.056525g/L咯菌腈y=5.8319x+1.64300.97940.3117430g/L戊唑醇y=5.1036x+0.85450.98930.75643討論我國(guó)是世界上蘋(píng)果栽培面積最大的國(guó)家，長(zhǎng)期以來(lái)關(guān)于蘋(píng)果病害的研究報(bào)道主要集中于傳統(tǒng)三大病害——蘋(píng)果樹(shù)腐爛病、輪紋病和早期落葉病[2-3]，而關(guān)于蘋(píng)果白絹病鮮有相關(guān)研究報(bào)道。引起蘋(píng)果白絹病的病原菌齊整小核菌SclerotiumrolfsiiSacc.具有廣泛的寄主范圍，為害麥類(lèi)、谷子、花生、大豆、棉花、麻類(lèi)、薯類(lèi)、煙草、蔬菜、瓜類(lèi)和果樹(shù)等60多科，210多種植物[4,12]。引起植物癥狀主要有猝倒、莖基腐爛、果實(shí)腐爛和根際腐爛等，白絹病發(fā)生嚴(yán)重植株葉片變黃、病株枯死，菌核在土壤中可存活4—5年。準(zhǔn)確的病原診斷鑒定，病菌的生物學(xué)特性與致病性是研究病害發(fā)生規(guī)律和防治措施的重要基礎(chǔ)[14]。本研究針對(duì)遼寧綏中中秋王蘋(píng)果種植園開(kāi)展白絹病診斷及防治基礎(chǔ)研究，采用菌物形態(tài)結(jié)合分子學(xué)手段明確了病原歸屬，首次證實(shí)了白絹病菌可以侵染蘋(píng)果的根、果實(shí)以及葉片；研究結(jié)果表明病菌在10~35℃的溫度范圍內(nèi)可正常生長(zhǎng)，25~30℃時(shí)病菌生長(zhǎng)最快，這與白絹病在遼寧西部地區(qū)多在8~9月份夏季高溫潮濕天氣發(fā)生有很大關(guān)系，這與高常燕等的報(bào)道相似[4]，病原菌隨著pH值增加生長(zhǎng)逐漸變慢，說(shuō)明病害的發(fā)生喜好酸性的土壤環(huán)境，所以在防治該病時(shí)可有針對(duì)性的調(diào)整土壤的酸堿性；在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)試驗(yàn)中病菌可以較好的利用葡萄糖，而無(wú)法利用尿素，這與病害在果實(shí)座果期間加重危害有關(guān)。草酸是一些病原真菌的致病因子[15]，本研究所采用菌株具有較強(qiáng)的產(chǎn)草酸能力。本研究病原菌室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明：所選用的5種藥劑戊唑醇、吡唑醚菌酯、噻呋酰胺、咯菌腈和氟硅唑均對(duì)白絹病菌有抑制作用，其中噻呋酰胺可作為首選用藥，在生產(chǎn)季節(jié)與其他藥劑交替使用，進(jìn)行輪換用藥。李棟等[5]的室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果研究表明吡唑醚菌酯、咯菌腈和甲基立枯磷三種藥劑抑菌效果較好，可作為防治蘋(píng)果白絹病的主推藥劑。本研究結(jié)果拓寬了病害防治過(guò)程中藥劑種類(lèi)的選擇范圍，為及時(shí)有效地防治病害奠定了理論基礎(chǔ)。白絹病致病菌齊整小核菌屬于土壤習(xí)居菌，以菌絲或菌核在土壤中或病根上越冬，病菌在土壤中隨著灌溉水流動(dòng)傳播[6]。根據(jù)我們調(diào)查分析，遼西地區(qū)一些蘋(píng)果園澆水方式多采用澆灌方式，可能是造成病害流行的因素之一，另外，有些蘋(píng)果園中果樹(shù)與花生的間作可能是導(dǎo)致病原菌寄主間轉(zhuǎn)移傳播的重要原因。綜合分析，果園土壤酸性、重茬、土壤中病原基數(shù)較大、長(zhǎng)期積水透氣性差均是導(dǎo)致病害發(fā)生嚴(yán)重的因子，因此，改良土壤結(jié)構(gòu)及酸化土壤，及時(shí)排水，合理的修剪，早春針對(duì)病樹(shù)進(jìn)行扒土晾根，刮除病斑涂藥處理，綜合利用以上策略進(jìn)行蘋(píng)果白絹病的科學(xué)防治。參考文獻(xiàn)[1]陳紅，王倩，高強(qiáng).我國(guó)蘋(píng)果產(chǎn)業(yè)發(fā)展及其影響因素分析——基于7個(gè)主產(chǎn)省份的面板數(shù)據(jù)[J].中國(guó)果樹(shù)，2019（1）：92-95[2]徐成楠，岳強(qiáng)，冀志蕊，等.2015年遼寧省蘋(píng)果園農(nóng)藥使用情況調(diào)查與分析[J].中國(guó)果樹(shù)，2017（2）：80-83[3]王樹(shù)桐，王亞南，曹克強(qiáng).近年我國(guó)重要蘋(píng)果病害發(fā)生概況及研究進(jìn)展[J].植物保護(hù)，2018,44（5）：13-25[4]高常燕，李保華.蘋(píng)果白絹病的發(fā)病流行條件與防治方法[J].中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2017年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集，2017，456[5]李棟，董向麗，李平亮，等.8種殺菌劑對(duì)蘋(píng)果樹(shù)白絹病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定[J].中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2017年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集，2017，457[6]劉美英，宋來(lái)慶，趙玲玲，等.蘋(píng)果白絹病的發(fā)生與防治[J].煙臺(tái)果樹(shù)，2018（4）：35[7]方中達(dá).