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課后定時檢測案38微生物的培養(yǎng)和利用[基礎(chǔ)鞏固練]——學(xué)業(yè)水平一、二考點一微生物的分離和培養(yǎng)1.不同的微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列有關(guān)一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物的描述,不正確的是()A.氮源物質(zhì)可為該微生物提供必要的氮素B.碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)C.無機鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)D.水是該微生物的營養(yǎng)要素之一2.下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述,錯誤的是()A.操作順序為計算→稱量→溶化→倒平板→滅菌B.將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C.待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時倒平板D.待平板冷卻凝固后將平板倒過來放置3.[2021·衡水中學(xué)全國高三聯(lián)考]秸稈還田可增加土壤肥力,緩解環(huán)境污染。為分離分解纖維素的微生物菌種,實現(xiàn)廢物的資源化利用,研究人員設(shè)計了“土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌株”的實驗流程。下列敘述錯誤的是()A.配制培養(yǎng)基時,應(yīng)在高壓蒸汽滅菌之后調(diào)節(jié)pHB.選擇培養(yǎng)時,應(yīng)使用纖維素為唯一碳源培養(yǎng)基C.進行梯度稀釋時,應(yīng)在酒精燈火焰旁完成各種操作D.挑選菌株后,應(yīng)將使用過的培養(yǎng)基進行滅菌后再丟棄考點二某種微生物數(shù)量的測定4.能夠測定樣品活菌數(shù)的方法是()A.稀釋涂布平板法B.直接計數(shù)法C.質(zhì)量法D.比濁法考點三培養(yǎng)基對微生物的選擇作用5.通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上,大部分微生物無法生長;在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌的生長;在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細菌和霉菌的生長。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出()①大腸桿菌②霉菌③放線菌④固氮細菌A.④②③B.①②③C.①③④D.只有③④[提能強化練]——學(xué)業(yè)水平三、四6.[2021·重慶市高三調(diào)研]我國生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定:接種1mL水樣在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上,經(jīng)37℃、24h培養(yǎng)后,生長出的菌落總數(shù)不得大于100。某興趣小組對某蓄水池進行細菌總數(shù)測定,以了解池水是否符合飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)?;卮鹣铝袉栴}:(1)用三角瓶取水樣前,可采用________________(填滅菌方法)對三角瓶滅菌;取水池的水龍頭用酒精擦拭后,再通過________的方法滅菌;在微生物培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮________和滲透壓等條件。(2)該小組通過濾膜法測定細菌總數(shù),將10mL的水樣進行過濾后,將濾膜放在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng),培養(yǎng)時應(yīng)將平板倒置,其目的是________________________,經(jīng)過24h培養(yǎng),得到的結(jié)果為:平板1中41個菌落、平板2中35個菌落、平板3中38個菌落,則所取水樣測定結(jié)果________(填“符合”或“不符合”)飲用水的標(biāo)準(zhǔn)。(3)若要鑒別水樣中的大腸桿菌,培養(yǎng)基中還應(yīng)加入的非營養(yǎng)物是____________,若要長時間保存大腸桿菌,可以采用____________;使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過處理后才能丟棄,以防止________________________________。7.[2021·內(nèi)江六中入學(xué)考試]2019年起,全國地級及以上城市全面啟動生活垃圾分類工作,習(xí)近平總書記強調(diào),實行垃圾分類,關(guān)系廣大人民群眾生活環(huán)境,關(guān)系節(jié)約使用資源,也是社會文明水平的一個重要體現(xiàn)。有機垃圾通過微生物處理的基本原理是利用微生物降解菌產(chǎn)生的多種酶,對分類后的有機垃圾進行快速分解,其技術(shù)流程如下:(1)樣品采集:樣品取自某食堂的餐廚垃圾,原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)分離純化:上述流程中利用________________(方法)進行菌株的分離純化,接種后進行培養(yǎng)時,需將培養(yǎng)皿呈________狀態(tài)放置。(3)鑒別培養(yǎng):對餐廚垃圾組分進行分析發(fā)現(xiàn),其中纖維素類含量較高。若對菌株的纖維素降解活性進行鑒別,需將分離純化得到的各菌種,接種于加入____________的培養(yǎng)基中,通過比較菌落的______________來判斷降解活性的高低。(4)現(xiàn)將各類有機物降解活性較高的3個菌株分別制成菌劑,測定其對餐廚垃圾的實際降解能力,其實驗思路如下:①配制培養(yǎng)基:將纖維素、淀粉、脂肪、蛋白質(zhì)和水,按照餐廚垃圾的組分比例配制。②將等量的3種菌劑,分別與等量的培養(yǎng)基在適宜的環(huán)境中進行混合培養(yǎng)。③培養(yǎng)相同時間,測定____________________。(5)篩選出高效降解纖維素的菌株后,若需要長期保存,可采用____________的方法。纖維素分解菌分解纖維素主要依賴產(chǎn)生的纖維素酶,該復(fù)合酶至少包括三種組分,即______________________。為測定纖維素酶降解纖維素的能力,需要先將該酶分離出來,常用________法分離,該方法是根據(jù)____________________來分離蛋白質(zhì)的。8.[2021·重慶高三診斷]北方每年在小麥豐收的季節(jié),焚燒秸稈時火焰四起,煙霧彌漫,不但導(dǎo)致嚴重的霧霾而且造成資源的浪費??茖W(xué)家為了解決這個問題,努力尋找能分解秸稈中纖維素的微生物,他們做了如下實驗,據(jù)圖回答:(1)根據(jù)甲圖,選擇培養(yǎng)纖維素分解菌要用____________培養(yǎng)基。為了鑒別纖維素分解菌,常在培養(yǎng)基中加入________。為了統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目,常用的方法除稀釋涂布平板法外還有__________的方法。(2)乙圖是培養(yǎng)出的單菌落示意圖,最適合分解秸稈的兩個菌落是________(填數(shù)字),纖維素分解菌將纖維素最終分解為________________。從圖中可以看出培養(yǎng)基上菌落數(shù)較少,推測可能的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)為了長期保存該微生物,可以采用________________________________________________________________________的方法。9.日前微博傳言細菌比馬桶按鈕多,央視和北京衛(wèi)視通過實驗展示調(diào)查結(jié)果如下圖。回答下列相關(guān)問題:(1)該實驗需制備培養(yǎng)基,培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、________________。(2)據(jù)圖可知,兩電視臺均采用________法接種,該方法需要________(多選)。A.接種環(huán)B.酒精燈C.移液管D.涂布器E.無菌水(3)通過觀察菌落的________,可知屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物。兩電視臺實驗操作均正確且完全一致,但報道結(jié)果截然不同,你認為其原因是:________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)按圖操作取樣面積,實驗員測定某屏幕的細菌數(shù)量,將10mL菌懸液進行梯度稀釋,分別取0.1mL稀釋倍數(shù)為102的樣品液接種到三個培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時間后,統(tǒng)計菌落數(shù)分別為48、50、52,則該屏幕的細菌數(shù)為________個/cm2。該實驗的對照組該如何設(shè)置________________________________________________________________________________________________________________________________________________。10.[2021·廣東省梅州市豐順高三質(zhì)檢]苯酚是含酚工業(yè)廢水的主要成分,具有致癌、致畸和致突變作用。苯酚降解菌能分解工業(yè)廢水中的苯酚?;卮鹣铝袉栴}。(1)MP培養(yǎng)基的成分為KH2PO42.25g/L、K2HPO42.75g/L、(NH4)2SO41.0g/L、MgCl20.2g/L、NaCl0.1g/L、FeCl30.02g/L、CaCl20.01g/L。在制作苯酚降解菌的富集培養(yǎng)基和平板分離培養(yǎng)基時,應(yīng)在MP培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,前者添加________成分,后者添加____________成分,然后對培養(yǎng)基進行滅菌,滅菌的方法為______________。(2)將等量的污泥樣液均分兩份,分別接種在相同體積的MP培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基中,搖床振蕩培養(yǎng),振蕩培養(yǎng)的目的是____________________________________________。兩種培養(yǎng)中,苯酚降解菌菌體密度較低的培養(yǎng)基是____________,原因是______________________________。將富集培養(yǎng)基中的菌液稀釋并涂布在平板上,經(jīng)過一段時間的培養(yǎng),在平板上長出一些形態(tài)、大小和顏色不完全相同的菌落,這說明______________________。課后定時檢測案381.解析:碳源分為有機碳源和無機碳源,當(dāng)有機物作為碳源物質(zhì)時,該物質(zhì)既是碳源,又可作為能源;當(dāng)無機物作為碳源物質(zhì)時,該物質(zhì)只能作為碳源,不能作為能源;該微生物碳源物質(zhì)是二氧化碳,屬于無機物,不能作為微生物的能源物質(zhì)。答案:B2.解析:制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是:計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板,其順序不能顛倒;牛肉膏容易吸潮,所以稱好后需將稱量紙一同放入燒杯,當(dāng)牛肉膏溶化并與稱量紙分離后,用玻璃棒取出稱量紙;待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右,用手觸摸錐形瓶剛剛不燙手,并且培養(yǎng)基處于溶化狀態(tài)時開始倒平板,平板冷卻凝固后才能倒置。答案:A3.解析:配制培養(yǎng)基時,應(yīng)在高壓蒸汽滅菌之前調(diào)節(jié)pH,避免滅菌之后調(diào)pH造成雜菌污染,A錯誤;選擇培養(yǎng)時,為分離分解纖維素的微生物菌種,應(yīng)使用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基,B正確;進行梯度稀釋時,為了無菌操作,應(yīng)在酒精燈火焰旁完成各種操作,C正確;挑選菌株后,為了防止造成污染,應(yīng)將使用過的培養(yǎng)基進行滅菌后再丟棄,D正確。答案:A4.解析:直接計數(shù)法是利用特定的計數(shù)板,在顯微鏡下計算一定容積內(nèi)樣品中微生物的數(shù)量,不能區(qū)分死菌與活菌;質(zhì)量法是用于微生物生長測定的一種方法,有濕重法和干重法,也可以通過對蛋白質(zhì)和DNA含量的測定以反應(yīng)細胞的物質(zhì)質(zhì)量;比濁法是在一定范圍內(nèi),懸液中細胞濃度與混濁度成正比,即與光密度成正比,菌越多,光密度越大;活菌在適宜培養(yǎng)基和良好生長條件下通過生長形成菌落,此法又稱活菌計數(shù)法,可采用稀釋涂布平板法接種。答案:A5.解析:缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長,而固氮細菌能生長;在培養(yǎng)基中加青霉素可以抑制細菌和放線菌等原核生物細胞壁的合成,而霉菌屬于真核生物,故能生長;在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細菌和霉菌的生長,對放線菌的生長無影響。答案:A6.解析:(1)用無菌三角瓶取水樣前,取樣器(玻璃制品)需高壓蒸汽(干熱滅菌)滅菌;水龍頭需要通過灼燒滅菌,在微生物培養(yǎng)過程中,需要合適的條件以利于微生物的生長,包括營養(yǎng)條件、溫度、pH和滲透壓等。(2)平板倒置后可防止冷凝水滴落培養(yǎng)基,造成污染,影響實驗結(jié)果;根據(jù)測定結(jié)果,10mL水中大腸桿菌的平均值為(41+35+38)/3=38,小于100,所以符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)。(3)鑒別大腸桿菌需要加入伊紅美藍試劑,使菌落呈黑色;長時間保存菌種可采用甘油管藏法;為防止培養(yǎng)物擴散對環(huán)境造成污染,所以使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過處理后才能丟棄。答案:(1)高壓蒸汽滅菌法或干熱滅菌法灼燒溫度、pH(2)防止冷凝水滴落污染培養(yǎng)基符合(3)伊紅美藍甘油管藏法培養(yǎng)物的擴散,對環(huán)境造成污染7.解析:(1)擬篩選出能高效降解有機物的耐高溫菌株,餐廚垃圾中富含各類有機物,相應(yīng)的分解菌含量豐富,因此樣品應(yīng)取自某食堂的餐廚垃圾。(2)稀釋涂布平板法是單菌落的分離方法之一,分離純化過程中需要利用稀釋涂布平板法進行菌株的分離純化;接種后放入恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)時,需將培養(yǎng)皿呈倒置狀態(tài)放置。(3)剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物,若對菌株的纖維素降解活性進行鑒別,需將分離純化得到的各菌種,接種于加入剛果紅的培養(yǎng)基中;通過比較菌落的透明圈直徑(或者透明圈直徑與菌落直徑的比值),來判斷降解活性的高低(直徑越大,說明酶活性越高)。(4)現(xiàn)將各類有機物降解活性較高的3個菌株分別制成菌劑,測定其對餐廚垃圾的實際降解能力,實驗思路如下:①含有碳元素且能被微生物生長繁殖所利用的一類營養(yǎng)物質(zhì)統(tǒng)稱為碳源,含有氮元素且能被微生物生長繁殖所利用的一類營養(yǎng)物質(zhì)統(tǒng)稱為氮源,餐廚垃圾的組分中提供碳源的是淀粉、纖維素、脂肪、蛋白質(zhì),提供氮源的是蛋白質(zhì)。②將等量的3種菌劑,分別與等量的培養(yǎng)基在適宜的環(huán)境中進行混合培養(yǎng)。③每隔相同的時間測定各組培養(yǎng)基的減少量(或各組培養(yǎng)基的剩余量)。(5)篩選出高效降解纖維素的菌株后,若需要長期保存,可采用甘油管藏的方法。纖維素分解菌分解纖維素主要依賴產(chǎn)生的纖維素酶,該復(fù)合酶至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三種組分。為測定纖維素酶降解纖維素的能力,需要先將該酶分離出來,該酶的成分是蛋白質(zhì),常用凝膠色譜(分配色譜)法分離;該方法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的。答案:(1)餐廚垃圾中富含各類有機物,相應(yīng)的分解菌含量豐富(2)稀釋涂布平板法倒置(3)剛果紅透明圈直徑(或者透明圈直徑與菌落直徑比值)(4)各組培養(yǎng)基的減少量(或各組培養(yǎng)基的剩余量)(5)甘油管藏C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶凝膠色譜(分配色譜)相對分子質(zhì)量的大小8.解析:(1)從土壤樣液中篩選能分解纖維素的細菌所用的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基中加入剛果紅,剛果紅會與纖維素形成紅色復(fù)合物,而呈現(xiàn)紅色。當(dāng)纖維素被降解,則培養(yǎng)基表面會形成以纖維素分解菌為中心的透明圈,可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目常用稀釋涂布平板法或顯微鏡直接計數(shù)。(2)透明圈的大小反應(yīng)了細菌分解纖維素能力的大小,培養(yǎng)基中大的透明圈就是分解纖維素多的地方,所以乙圖中最適合分解秸稈的兩個菌落是1和4;纖維素是多糖,最終被分解菌分解成葡萄糖;從圖中可以看出培養(yǎng)基上菌落數(shù)較少,推測可能是土壤中纖維素分解菌較少,稀釋的倍數(shù)太大所致。(3)長期保留菌種可用甘油管藏的方法。答案:(1)選擇剛果紅(CR)顯微鏡直接計數(shù)(2)1和4葡萄糖土壤中纖維素分解菌較少,稀釋的倍數(shù)太大(3)甘油管藏9.解析:(1)微生物培養(yǎng)基的成分一般包括水、碳源、氮源和無機鹽。(2)據(jù)圖分析可知,該實驗的接種方法為稀釋涂布平板法,用到的

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