實(shí)驗(yàn)室生物安全及樣本采集省公開課金獎全國賽課一等獎微課獲獎?wù)n件

中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院孫肖紅-9試驗(yàn)室生物安全及樣本采集1/74試驗(yàn)室生物安全2/74在BSL-2操作SARS病毒3/74在BSL-1操作未經(jīng)充分滅活SARS病毒4/74

在進(jìn)行有潛在感染性微生物試驗(yàn)時使用試驗(yàn)室操作程序、試驗(yàn)室設(shè)施和安全裝備生物安全

5/74保護(hù)：

試驗(yàn)室工作人員

“樣品”

合作者

試驗(yàn)室維護(hù)人員

環(huán)境

(群體)6/74基礎(chǔ)試驗(yàn)室生物安全一級試驗(yàn)室（BSL-1）生物安全二級試驗(yàn)室（BSL-2）生物安全防護(hù)試驗(yàn)室高度生物防護(hù)安全試驗(yàn)室生物安全四級試驗(yàn)室（BSL-4）生物安全三級試驗(yàn)室（BSL-3）生物安全試驗(yàn)室7/74試驗(yàn)室分級處理對象一級對人體、動植物或環(huán)境危害較低，不含有對健康成人、動植物致病致病因子。二級對人體、動植物或環(huán)境含有中等危害或含有潛在危險(xiǎn)致病因子，對健康成人、動物和環(huán)境不會造成嚴(yán)重危害。有有效預(yù)防和治療方法。三級對人體、動植物或環(huán)境含有高度危險(xiǎn)性，主要經(jīng)過氣溶膠使人傳染上嚴(yán)重甚至是致命疾病，或?qū)又参锖铜h(huán)境含有高度危害致病因子。通常有預(yù)防治療方法。四級對人體、動植物或環(huán)境含有高度危險(xiǎn)性，經(jīng)過氣溶膠路徑傳輸或傳輸路徑不明，或未知、危險(xiǎn)致病因子。沒有預(yù)防治療方法。8/74病毒名稱危害程度分類試驗(yàn)活動所需生物安全試驗(yàn)室級別運(yùn)輸包裝分類f備注病毒培養(yǎng)a動物感染試驗(yàn)b未經(jīng)培養(yǎng)感染材料操作c滅活材料操作d無感染性材料操作eA/BUN編號英文名漢字名分類學(xué)地位Crimean-Congohemorrhagicfevervirus（Xinjianghemorrhagicfevervirus）克里米亞—剛果出血熱病毒（新疆出血熱病毒）布尼亞病毒科第一類BSL-3ABSL-3BSL-3BSL-2BSL-1AUN2814

Chikungunyavirus基孔肯尼雅病毒披膜病毒科第二類BSL-3ABSL-3BSL-2BSL-1BSL-1AUN2814

Denguevirus登革病毒黃病毒科第三類BSL-2ABSL-2BSL-2BSL-1BSL-1AUN2814僅培養(yǎng)物為A類Yellowfevervirus,(vaccinestrain,17D)黃熱病毒（疫苗株,17D）黃病毒科第三類BSL-2ABSL-2BSL-2BSL-1BSL-1BUN33739/74BSL-1BSL-2BSL-3BSL-410/74試驗(yàn)室人員接收適當(dāng)培訓(xùn)試驗(yàn)室人員接收適當(dāng)免疫接種或測試工作人員了解注射免疫疫苗(如：作用，副作用，注射條件等)監(jiān)督者對培訓(xùn)作評價(jià)11/74標(biāo)準(zhǔn)微生物操作規(guī)程個人防護(hù)樣本處理溢出處理/消毒生物危害垃圾消毒/處理緊急情況處理12/74要求進(jìn)入政策和程序生物危害警告標(biāo)志詳細(xì)試驗(yàn)室生物安全手冊每年更新知識，接收再培訓(xùn)13/74準(zhǔn)入BSL-2,-3,and-4試驗(yàn)室門上貼國際生物危害標(biāo)志只有專業(yè)人員才能進(jìn)入試驗(yàn)室試驗(yàn)室門關(guān)閉試驗(yàn)室工作區(qū)禁止兒童進(jìn)入14/74動物進(jìn)入動物房有專業(yè)要求和試驗(yàn)無關(guān)動物不準(zhǔn)進(jìn)入試驗(yàn)室15/74BSL-2、-3試驗(yàn)室生物安全柜(BSCs)個人防護(hù)試驗(yàn)服手套大褂眼部和面部防護(hù)設(shè)備移液設(shè)備使用安全離心機(jī)16/74個人防護(hù)在試驗(yàn)室中工作需穿試驗(yàn)服戴適當(dāng)手套17/74處理感染性物質(zhì)（摘掉手套后）、動物以及離開試驗(yàn)室前洗手個人防護(hù)18/74

眼部和面部保護(hù)設(shè)備個人防護(hù)19/74試驗(yàn)室應(yīng)整齊潔凈，不存放與試驗(yàn)無關(guān)物品20/74不在試驗(yàn)室儲存人吃食物和飲料試驗(yàn)室中不能露腳趾試驗(yàn)服、設(shè)備不能在試驗(yàn)室外使用有適合衣服存放處不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化裝21/74禁止用嘴移液禁止將東西放入嘴中22/74防止產(chǎn)生濺出和氣溶膠限制使用皮下注射器針頭用機(jī)械裝置移液短距離安全移動試驗(yàn)室感染性物質(zhì)23/74使用安全杯和轉(zhuǎn)子在生物安全柜內(nèi)密封和打開24/74使用塑料器皿和有螺旋帽容器25/74濺出或偶然事件中，顯著暴露于傳染源時，要馬上匯報(bào)。制訂并恪守溢出處理計(jì)劃書26/74廢液倒掉前消毒書面文檔從試驗(yàn)室拿出時應(yīng)防止污染27/74全部污染物(如手套，試驗(yàn)服等)、樣本和培養(yǎng)物均應(yīng)使用可行消毒方法進(jìn)行消毒。有溢出和每日工作結(jié)束后應(yīng)消毒工作區(qū)表面28/74有效消毒辦法高壓鍋，化學(xué)消毒轉(zhuǎn)移廢棄物時應(yīng)進(jìn)行恰當(dāng)包裝，并保護(hù)處理廢棄物人員29/74生物安全柜生物安全柜是為了操作人員及周圍環(huán)境安全，把在處理病原體時發(fā)生污染氣溶膠隔離在操作區(qū)域內(nèi)第一道隔離屏障，通常稱為一級屏障或一級隔離30/74物理防護(hù)設(shè)備：是用于預(yù)防病原微生物逸出和對操作者實(shí)施防護(hù)物理或機(jī)械設(shè)備屏障是物理控制慣用方法，經(jīng)過采取封閉設(shè)備和隔離設(shè)施構(gòu)建而成。依據(jù)它們所處地位和作用，設(shè)有一級屏障和二級屏障31/74一級屏障也稱一級隔離，是操作對象和操作者之間距離，包含各級生物安全柜、動物隔離器和個人防護(hù)裝備等32/74二級屏障也稱二級隔離，是生物安全試驗(yàn)室和外部環(huán)境隔離，包含建筑結(jié)構(gòu)、通風(fēng)空調(diào)、給水排水、電氣和控制系統(tǒng)33/74氣溶膠懸浮于氣體介質(zhì)中粒徑普通為0.001~100μm固態(tài)、液態(tài)微小粒子形成相對穩(wěn)定分散體系。生物安全柜預(yù)防操作過程中含有危害性或未知性生物微粒氣溶膠散逸空氣凈化安全裝置。生物安全柜通常分為Ⅰ級、Ⅱ級和Ⅲ級。34/74BSC-I型ContaminatedairundernegativepressureHEPA-filteredairRoomair

保護(hù)試驗(yàn)人員和環(huán)境試驗(yàn)區(qū)無垂直層流前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速≥0.40m/s可向室內(nèi)排風(fēng)循環(huán)氣流百分比為035/74ContaminatedairunderpositivepressureHEPA-filteredairRoomairBSC-II-A1型

保護(hù)試驗(yàn)人員、試驗(yàn)對象和環(huán)境試驗(yàn)區(qū)有垂直層流前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速≥0.38m/s可向室內(nèi)排風(fēng)循環(huán)氣流百分比為70%有正壓污染區(qū)不能用于揮發(fā)性有毒化學(xué)物質(zhì)和揮發(fā)性放射性物質(zhì)試驗(yàn)操作

36/74生物安全柜使用

為了維持安全柜正常運(yùn)行必須定時檢驗(yàn)高效過濾器是否有堵塞、泄漏情況，風(fēng)量及其平衡情況，以及報(bào)警裝置情況。為了對柜內(nèi)污染充分稀釋，并確保下次正常運(yùn)行，在操作完成后，最少要空轉(zhuǎn)15min

37/74前面開口部位要使手、材料、器具等經(jīng)過前面開口部位次數(shù)最少，在操作開始前，就要把必要器具材料放在適當(dāng)位置上。人步行速度很輕易到達(dá)1m/s，所以在柜前行走時要尤其注意。38/74吸附墊在操作臺上放上貼有吸附材料塑料薄膜，每日更換，能夠把操作臺污染降低到最低程度39/74柜內(nèi)試驗(yàn)器材和材料取出

（1）凡生物安全試驗(yàn)室廢棄污染性材料、使用過包裝材料、容器、紙張等廢棄物，統(tǒng)統(tǒng)都收裝好或者經(jīng)高壓滅菌器滅菌后拿到緩沖區(qū)。（2）在試驗(yàn)中或完成后，必須從安全柜中取出非滅活病原體時，應(yīng)裝好放在藥液槽中，使容器外側(cè)被消毒后取出，消毒液種類因病原體不一樣而異。40/74瓶蓋

在安全柜內(nèi)使用瓶子不用橡膠塞，而用螺旋蓋，開啟時可降低氣溶膠發(fā)生。消毒火焰

用火焰消毒是古典微生物學(xué)方法，不過因?yàn)闀a(chǎn)生氣溶膠，并使柜內(nèi)氣流紊亂，盡可能不使用，而能夠用最近研制成小型電爐、無焰管口加熱器進(jìn)行消毒。在不得不使用火焰消毒法時，美國提議在安全柜內(nèi)用手動燈頭，日本提議用腳踏式燈頭，首先用小火點(diǎn)燃，然后在腳下將腳踏開關(guān)一踏，主要火焰就被點(diǎn)著。腳踏開關(guān)一停頓踏時，主要火焰即熄滅，而且采取不開通風(fēng)機(jī)則不點(diǎn)火聯(lián)鎖氣閘方式，因而也較安全。。41/74回收容器

在安全柜內(nèi)應(yīng)配置回收污染物質(zhì)容器。容器中必須配有消毒液，將污染物質(zhì)完全浸沒。這些回收容器最少天天操作完成后蓋好以防污染。再次使用時需重新清配制消毒液42/74高效過濾器更換（1）高效過濾器更換前，一定要將柜內(nèi)表面及原高效過濾器采取甲醛滅菌。（2）過濾器更換時，最好讓使用試驗(yàn)人員在場（預(yù)先問詢試驗(yàn)時使用細(xì)菌）。（3）手和身體有外傷者不得進(jìn)行操作，操作人員一定要戴上防毒面具和橡膠手套。（4）取出過濾器要馬上密封放入塑料袋內(nèi)，再放入紙箱內(nèi)，使用過面具、手套也要一樣處理，然后一起燒毀。（5）在安裝新過濾器時，不要隨便將頭和身體伸到柜內(nèi)，一樣要高度慎重操作。43/74廢棄物處理44/74醫(yī)療廢棄物分類感染性廢棄物:

指疑似包含試驗(yàn)室病原體培養(yǎng)物、來自隔離病房廢物、組織等病理廢物:

人身體部分組織或體液、血液、其它體液利器:

針、輸液器、解剖刀、剪刀、刀片、破碎玻璃 藥品廢棄物:

過期或不再需要醫(yī)藥品、

被藥品污染或含有藥品物品

45/74具遺傳毒性廢物:

包含細(xì)胞毒性藥品及含有遺傳毒性化學(xué)藥品化學(xué)廢棄物:

包含試驗(yàn)室使用化學(xué)物質(zhì)——試劑、消毒劑、溶劑

高含量重金屬廢棄物:電池、破碎體溫計(jì)、

血壓計(jì)噴霧劑:

（高壓）貯氣筒,藥筒或氣霧劑放射性廢棄物:

來自放射治療及試驗(yàn)研究液體，被污染玻璃器具、包裝、尿樣或者已用未密封放射性核素治療或檢驗(yàn)患者排泄物

醫(yī)療廢棄物分類46/74處理醫(yī)療/試驗(yàn)室廢棄物步驟產(chǎn)生分離搜集運(yùn)輸貯存處理最終銷毀制訂和執(zhí)行廢棄物處理計(jì)劃為醫(yī)療/試驗(yàn)室廢棄物處理判別方法47/74安全辦法與險(xiǎn)情處理高危險(xiǎn)廢棄物低危險(xiǎn)廢棄物試驗(yàn)室廢棄物可處理衛(wèi)生用具人/動物組織干燥血液和體液利器新鮮血液和體液細(xì)胞毒素48/74醫(yī)學(xué)試驗(yàn)室高致病性廢物處理步驟方法分離-預(yù)處理之前保留在醫(yī)療區(qū)域;-從其它普通或醫(yī)療廢物中分離出來;-置于密封袋子或容器中預(yù)處理在與其它醫(yī)療廢棄物合并之前應(yīng)該預(yù)處理（高壓滅菌或化學(xué)處理）包裝黃色袋子要貼好生物危害標(biāo)識標(biāo)識機(jī)構(gòu)和部門名稱、廢棄物種類、日期、名稱或密封袋子/容器人署名貯存、運(yùn)輸、處理DisinfectedHIWstored,transportedanddisposedofwithotheryellow-baggedwaste.

49/74醫(yī)療/試驗(yàn)室廢棄物分離和搜集50/74普通處理和銷毀方法高壓滅菌微波消毒系統(tǒng)化學(xué)消毒焚燒填埋51/74高壓滅菌器袋子應(yīng)該是塑料制品，且耐高溫消毒等級評定:生物(細(xì)菌或其它)或化學(xué)試劑蒸汽滅菌52/74能夠被處理:利器培養(yǎng)物被血液污染物品繃帶,亞麻制品無化學(xué)藥品試驗(yàn)室廢棄物不能夠被處理:來自化學(xué)療法處理廢棄物汞揮發(fā)或半揮發(fā)有機(jī)化合物、放射性廢棄物其它含有危害化學(xué)廢棄物蒸汽消毒53/74 高壓滅菌鍋54/74低成本，設(shè)備簡單對環(huán)境無害不適合用于組織和動物尸體需要一定操作培訓(xùn)蒸汽滅菌55/74微波照射–大量廢棄物微波消毒不是原材料直接暴露于微波中結(jié)果

微波能量使廢棄物中濕氣產(chǎn)生蒸汽破壞廢棄物中致病體

56/74化學(xué)消毒化學(xué)消毒劑特征是使病原體失活化學(xué)消毒劑有效性依賴于：溫度pH其它綜合原因抗生素作用于

-分子水平-細(xì)胞水平破壞細(xì)胞骨架和細(xì)胞膜改變蛋白或DNA合成或引發(fā)酶抑制作用57/74能夠被處理:利器培養(yǎng)物及其原料被血液、人體液、和動物廢棄物污染物品來自手術(shù)室和隔離病房廢物醫(yī)用繃帶及其制品等物化學(xué)藥品試驗(yàn)室廢棄物不可被處理:來自化學(xué)療法處理廢物汞揮發(fā)或半揮發(fā)有機(jī)化合物、放射性廢棄物其它含有危害化學(xué)廢棄物化學(xué)消毒58/74需要廢棄物粉碎可能使強(qiáng)化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入環(huán)境中通常人和動物組織不用此方法消毒特殊物品銷毀需要防止對環(huán)境污染化學(xué)消毒59/74低技術(shù)焚燒廢棄物不完全燃燒可能不會破壞全部致病原焚燒爐是二惡英和呋喃主要起源。二惡英和呋喃是需要全球盡可能降低排放和最終消除十二大物質(zhì)之首60/74中等技術(shù)焚燒–一些嘗試控制焚燒過程處理方法高等技術(shù)焚燒

溫度控制在900-1000°C

控制空氣污染設(shè)備副產(chǎn)物、氣體從初級焚燒爐進(jìn)入次級焚燒爐中、高等技術(shù)焚燒61/74處理技術(shù)比較焚燒高壓滅菌微波化學(xué)消毒原生質(zhì)熱解成本高中高低高廢棄物適用性不適于放射性廢棄物除病理廢棄物除細(xì)胞毒性廢棄物、放射性廢棄物液體廢棄物

全部操作難易度難易易易難廢棄物體積降低程度顯著不顯著顯著顯著 氣味問題有輕輕輕環(huán)境影響

有 無無有無62/74廢水處理醫(yī)院/試驗(yàn)室全體組員應(yīng)為降低浪費(fèi)水資源，降低排入下水道體液、化學(xué)物質(zhì)和藥品。全部組員都要接收廢水處理方法培訓(xùn)，并作為日常學(xué)習(xí)一部分。63/7464樣本采集1.鼻拭子標(biāo)本采集病人頭部盡可能保持不動，將聚醋纖維頭拭子輕輕轉(zhuǎn)動緩緩插入病人鼻孔至顎部，停留數(shù)