發(fā)酵過程染菌及其防治

純種培育。染菌對發(fā)酵的影響一、染菌對不同發(fā)酵過程的影響1、青霉素發(fā)酵過程：由于很多雜菌都能產生青霉素酶，因此不管染菌是發(fā)生在害格外嚴峻。2、核苷或核苷酸發(fā)酵過程：由于所用的生產菌種是多種養(yǎng)分缺陷型微生物，其基中的養(yǎng)分成分快速被消耗，嚴峻抑制了生產菌的生長和代謝產物的生成。3pH困難，在發(fā)酵中、后期不太會發(fā)生染菌，主要是要預防發(fā)酵前期染菌。、谷氨酸發(fā)酵：周期短，生產菌生殖快，培育基不太豐富，一般較少污染雜菌，但噬菌體污染對谷氨酸發(fā)酵的影響較大。二、染菌發(fā)生的不同時間對發(fā)酵的影響1、種子培育期染菌基地養(yǎng)分格外豐富，比較簡潔染菌。一旦覺察種子受到雜菌的污染，應經滅菌后棄去，并對種子罐、管道等進展認真檢查和徹底滅菌。2、發(fā)酵前期染菌少，相對而言這個時期也簡潔染菌。產菌的正常生長、生殖及產物的生成。3、發(fā)酵中期染菌代謝，影響產物的生成。pH；有的染菌后會使已生成的產物被利用或破壞。中應盡力做到早覺察、快處理。4、發(fā)酵后期染菌檸檬酸的發(fā)酵，染菌對產物的影響不大；肌苷酸、谷氨酸等地發(fā)酵，后期染菌也會影響產物的產量、提取和產品的質量。發(fā)酵特別現(xiàn)象及緣由分析生產蒙受損失。對此應準時查明緣由，加以解決。一、種子培育和發(fā)酵的特別現(xiàn)象、種子培育特別〔表現(xiàn)為培育的種子質量不合格〕：菌體生長緩慢；菌絲結團；代謝不正常。pH體濃度過高或過低；菌體生長差。二、染菌的檢查和推斷發(fā)酵過程是否染菌應以無菌試驗的結果為依據進展推斷。菌的污染。法、平板〔雙碟〕培育法、發(fā)酵過程的特別觀看法〔如溶氧量〕等。此法檢查雜菌最簡潔、最直接、最常用。必要時還可進展芽胞染色或鞭毛染色。1、顯微鏡檢查法〔鏡檢法〕用革蘭氏染色法〔Gramsstain〕對樣品進展涂片、染色，然后在顯微鏡下、肉湯培育法〔用于檢查培育基和無菌空氣是否帶菌，同時此法也可用于噬菌體的檢查〕37℃、27℃進展培育，隨時觀看微生物的生長狀況，并取樣進展鏡檢，推斷是否有雜菌。白胨、0.4％酚紅溶液，pH7.2。3、平板劃線培育或斜面培育檢查法37℃、2724h376h，使雜菌快速增殖后再劃線培育。4、留意點無菌試驗時，假設肉湯連續(xù)三次發(fā)生變色反響〔紅色→黃色〕或產生混濁，或平板培育連續(xù)三次覺察有特別菌落的消滅，即可推斷為染菌；有時肉湯培育的陽性反響不夠明顯，而發(fā)酵樣品的各項參數(shù)確有可疑染菌，染菌；一般來講，無菌試驗的肉湯或培育平板應保存并觀看至本批〔罐〕放罐后12h，確認為無雜菌后才能棄去；三、發(fā)酵染菌緣由分析1、染菌的雜菌種類分析雜菌雜菌緣由球菌、無芽胞桿菌種子帶菌、空氣過濾效率低、除菌不徹底、設備滲漏、操等 作問題等真菌 卻盤管滲漏無菌室滅菌不徹底無菌操作不當、糖液滅菌不徹底〔糖液放置時間較長〕等2、發(fā)酵染菌的規(guī)模分析局部發(fā)酵罐染菌：

緣由種子帶菌、連消設備染菌系統(tǒng)構造不合理、空氣過濾介質失效等問題

緣由種子帶菌、連消系統(tǒng)滅菌不徹底中間補料染菌，如補料液帶菌、補料管滲漏〔于設備滲漏造成，應認真檢查閥門、罐體或罐器是否清潔等。3、不同污染時間分析、染菌發(fā)生在種子培育階段，或稱種子培育期染菌。通常是由種子帶菌、培育基或設備滅菌不徹底，以及接種操作不當或設備因素等緣由而引起染菌。B、在發(fā)酵過程的初始階段發(fā)生染菌，或稱發(fā)酵前期染菌。大局部也是由于種子而引起。、發(fā)酵后期染菌大局部是由空氣過濾不徹底、中間補料染菌、設備滲漏、泡沫頂蓋以及操作問題而引起。雜菌污染的預防一、種子帶菌及其防治、保藏斜面試管菌種染菌、培育基和器具滅菌不徹底、種子轉移和接種過程染菌、種子培育所涉及的設備和裝置染菌。2、嚴格掌握無菌室的污染，依據生產工藝的要求和特點，建立相應的無菌室，交替使用各種滅菌手段對無菌室進展處理；在制備種子時對砂土管、斜面、三角瓶及搖瓶均嚴格進展治理，防止雜菌的進入而受到污染。為了防止染菌，種子保級種子均未受雜菌污染后才能使用；對菌種培育基或器具進展嚴格的滅菌處理，的溫度達不到預定值，造成滅菌不徹底而使種子染菌。二、空氣帶菌及其防治選用和裝填、過濾介質的滅菌和治理等方面完善空氣凈化系統(tǒng)。1進口空氣的干凈度。2、設計合理的空氣預處理工藝，盡可能削減生產環(huán)境中空氣帶油、水量，提高空氣冷卻器漏水，防止冷卻水進入空氣系統(tǒng)等。3、設計和安裝合理的空氣過濾器，防止過濾器失效。選用除菌效率高的過濾介劇變和流速的急增。三、操作失誤導致染菌及其防治1、通常對于淀粉質培育基地滅菌承受實罐滅菌較好，一般在升溫前先通過攪拌料，再轉至發(fā)酵罐內進展實罐滅菌較為有效。、在滅菌升溫時，要翻開排氣閥門，使蒸汽能通過并驅除罐內冷空氣，一般可避開“假壓”造成染菌。3、要嚴防泡沫升頂，盡可能添加消泡劑防止泡沫的大量產生。4、避開蒸汽壓力的波動過大，應嚴格掌握滅菌溫度，過程最好承受自動控溫。、發(fā)酵過程越來越多的承受自動掌握，一些掌握儀器漸漸被應用。一般常承受化學試劑浸泡等方法來滅菌。四、設備滲漏或“死角”造成的染菌及其防治〔發(fā)酵代謝所產生的有機酸等發(fā)生腐蝕作用良等緣由形成微小漏孔后發(fā)生滲漏染菌。染菌的挽救和處理一、種子培育期染菌的處理、一旦覺察種子受到雜菌污染，該種子不能再接入發(fā)酵罐中進展發(fā)酵，應經滅菌后棄之，并對種子罐、管道等進展認真檢查和徹底滅菌。2、承受備用種子，選擇生長生產無染菌的種子接入發(fā)酵罐，連續(xù)進展發(fā)酵生產。3、如無備用種子，則可選擇一個適當菌齡的發(fā)酵罐內的發(fā)酵液作為種子，進展二、發(fā)酵前期染菌的處理1將培育基加熱至規(guī)定溫度，重進展滅菌處理后，再接入種子進展發(fā)酵；2、假設此時染菌已造成較大的危害，培育基中的碳、氮源的消耗量已比較多，三、發(fā)酵中、后期染菌處理1、發(fā)酵中、后期染菌或發(fā)酵前期稍微染菌而覺察較晚時，可以參加適當?shù)貧⒕档屯L量、停頓攪拌、少量補糖等其它措施，進展處理。、假設發(fā)酵過程的產物代謝已到達肯定水平，此時產品的含量假設達肯定值，只要明確是染菌也可放罐。12030min能排放。四、染菌后對設備的處理12h上等方法進展處理。噬菌體污染及其防治一、病癥：發(fā)酵液