中藥顯微鑒定

關于中藥顯微鑒定內容提要顯微鑒定的簡介顯微制片方法的分類顯微制片方法第2頁,共27頁，2024年2月25日，星期天植物顯微鑒定的簡介(MicroscopicalIdentification)植物顯微鑒定是植物鑒定的重要手段之一。它通過植物組織、細胞、細胞后含物等特征進行微觀分析，達到鑒別真、偽、優(yōu)、劣的目的。植物顯微鑒別不但適用于中藥材（飲片），也適用于中成藥制品。這一檢測方法先后被《中國藥典》、《香港中藥材標準》、《日本藥局方》、《印度草藥典》、《美國藥典》等采用。第3頁,共27頁，2024年2月25日，星期天《中國藥典》附錄Ⅱ顯微鑒別法顯微鑒別法系指用顯微鏡對藥材（飲片）切片、粉末、解離組織或表面制片及含藥材粉末的制劑中藥材的組織、細胞或內含物等特征進行鑒別的一種方法。鑒別時選擇具有代表性的供試品，根據(jù)各種鑒別項的規(guī)定制片。制劑根據(jù)不同劑型適當處理后制片。第4頁,共27頁，2024年2月25日，星期天顯微鑒別方法分類

1根據(jù)不同劑型適當處理后制片，分為：藥材（飲片）顯微制片：橫切片或縱切片制片、粉末制片、表面制片、解離組織制片、花粉粒與孢子制片、磨片制片。含飲片粉末的制劑顯微制片：按粉末制片法制片細胞壁性質鑒別：木質化細胞壁、木栓化或角質化細胞壁、纖維素細胞壁。細胞內含物性質鑒別：淀粉粒、菊糖、草酸鈣結晶2根據(jù)切片方法，分為：徒手切片、冷凍切片、半薄切片（0.5-2.0微米）、超薄切片（

50-70nm)。第5頁,共27頁，2024年2月25日，星期天2

儀器與材料2.1

儀器生物光學顯微鏡（應配有目鏡測微尺和載物臺測微尺）、滑走切片機或徒手圓筒生物切片器、小型粉碎機、鏡臺測微尺、離心機、醫(yī)用超聲儀。

第6頁,共27頁，2024年2月25日，星期天2.2

用具放大鏡、刀片、解剖刀、鑷子（包括粗鑷及眼科彎鑷與直鑷）、剪（眼科剪與手術剪）、解剖針。載玻片、蓋玻片、吸濕器（即玻璃干燥器改裝蒸餾水加微量苯酚，潮氣潤濕藥材樣品用）、培養(yǎng)皿或小燒杯（放切片用，切片后的處理均可在其中進行）、酒精燈、鐵三角架、石棉網(wǎng)、滴瓶、試管、試管架、滴管、玻璃棒（粗與細）、乳缽、量筒、毛筆（從刀上刷取切片用）、鉛筆（HB、4H、6H繪圖用）、帶蓋搪瓷盤（裝切片標本用）、紗布、吸水紙（濾紙）、火柴等。第7頁,共27頁，2024年2月25日，星期天第8頁,共27頁，2024年2月25日，星期天第9頁,共27頁，2024年2月25日，星期天

粉末制片第10頁,共27頁，2024年2月25日，星期天1藥材粉碎

選取完整的藥材或待鑒定部位，粉碎，過《中國藥典》4號篩備用。第11頁,共27頁，2024年2月25日，星期天

斯氏液裝片

斯氏液由醋酸∶甘油∶水（1∶1∶1）組成，主要用于觀察淀粉粒及一些遇水合氯醛試液易溶解的成分。如多糖類成分、樹脂類成分等。

水合氯醛液裝片

水合氯醛試液能滲透組織，使皺縮的細胞膨脹；并能溶解淀粉粒、蛋白質、樹脂、揮發(fā)油和葉綠素等，使細胞組織變得透明而清晰。2粉末特殊處理制片方法第12頁,共27頁，2024年2月25日，星期天第13頁,共27頁，2024年2月25日，星期天第14頁,共27頁，2024年2月25日，星期天含多量淀粉的藥材粉末

大量淀粉粒的存在會影響觀察、描繪及攝影等效果。取一部分粉末于試管中加水煮沸，使淀粉粒糊化而溶解，放置或用離心機使所需細胞、組織下沉管底，用長吸管將沉淀物吸出供制片觀察。3粉末特殊處理制片方法含多量油類的藥材粉末

進行脫脂以除去大部分油脂，取少許粉末于小燒杯中，加氯仿少許攪拌浸漬，過濾，在濾紙上再加少許氯仿洗滌粉末即可。也可直接將粉末置載玻片進行。第15頁,共27頁，2024年2月25日，星期天含纖維較多的粉末

細胞彼此不分離，則可以用5%氫氧化鉀溶液浸漬若干小時或在水浴上加熱浸漬，使組織分解后再行制片觀察。顏色很深的藥材粉末進行脫色處理，取粉末少許置小燒杯中或載玻片上，加少許3%的過氧化氫溶液（雙氧水）浸漬數(shù)分鐘，待粉末顏色變淺時，除去多余液體，加新煮沸的冷蒸餾水，以除去粉末中的大量氣泡即可，然后再行制片觀察。第16頁,共27頁，2024年2月25日，星期天水泛丸：全球面取樣，將丸藥從中心剖開，從1/2球面上刮取。大蜜丸：將丸藥從中心剖開，從1/2或1/4球面上刮??；也可從內部挑取適量粉末。4中成藥粉末制片散劑、顆粒劑、膠囊：挑取部分粉末；包衣丸、片：剝除糖衣或包衣，取適量丸或片心磨碎后，取粉末裝片。

第17頁,共27頁，2024年2月25日，星期天5粉末制片注意事項裝片用的液體如易揮發(fā)，應裝片后立即觀察。用水裝片也較易蒸發(fā)而干涸，通常滴加少許甘油可延長保存時間。

粉末加液體攪拌及加蓋玻片時容易產(chǎn)生氣泡。如用水或甘油裝片時，可先加少量乙醇使其潤濕，可避免或減少氣泡的形成，或反復將蓋玻片沿一側輕抬，亦可使多數(shù)氣泡逸出。攪拌時產(chǎn)生的氣泡可隨時用針將其移出。第18頁,共27頁，2024年2月25日，星期天粉末藥材制片時，每片取用量宜少不宜多，為使觀察全面可多做些制片。如取量多，顯微特征單一輪廓不清，反而費用時，不易得出準確強論。中成藥制劑的粉末檢查，因在多味藥材粉末中尋找某一味藥的某一顯微特征，有時較難查見，可以取粉末量多些，置試管或小燒杯中，加入水合氯醛試液，加熱透化。透化好后再用吸管吸出，滴在載玻片上，加蓋玻片，即可觀察。

需用水合氯醛試液透化時，應注意掌握操作方法。裝片后用手執(zhí)其一端，保持水平置小火焰上約1～2cm處加熱，并緩緩左右移動使之微沸，見氣泡免同時離開火焰，待氣泡停止逸出再放在小火上，并隨時補充蒸發(fā)的試液，如此反復操作，直至粉末呈透明裝為止，放涼后滴加甘油鏡檢第19頁,共27頁，2024年2月25日，星期天6目鏡測微尺先將目鏡測微尺用載臺測微尺標化，計算出每一小格的μm數(shù)，應用時將測得物的小格數(shù)，乘以每一小格的μm數(shù)，即得所欲測定物的大小。

觀察細胞和后含物時，常需要測量其直徑、長短(以μm計)，作為鑒定依據(jù)之一，測量可用目鏡測微尺進行。第20頁,共27頁，2024年2月25日，星期天

目鏡測微尺每1小格的長度為30×10um÷77＝3.8μm第21頁,共27頁，2024年2月25日，星期天6.1目鏡測微尺注意事項測量時，如大小與規(guī)定有差異時，允許有少量略高于或低于規(guī)定的數(shù)值。每次測量記下數(shù)據(jù)，并分析數(shù)據(jù)最小量值、最大量值和多見值（μm）。目鏡測微尺所代表的長度值隨不同目鏡與物鏡配合而異因此在實驗前，應將專用的目鏡測微尺，在所用顯微鏡不同倍數(shù)的目鏡與物鏡組合后，進行測量其長度值，全部測定后記載于實驗記錄本或將數(shù)值表貼在顯微鏡子座上，備用。測量通常是在高倍鏡下進行，因目鏡量尺的每一小格的長度

值較小，結果較為準確。每次測量記下數(shù)據(jù)，并分析數(shù)據(jù)最小量值、最大量值和多見值（μm）。第22頁,共27頁，2024年2月25日，星期天7顯微鑒別法注意事項

顯微鑒別實驗時，應先觀察淀粉粒、菊糖等，再觀察其他顯微特征。所以，一般先以甘油醋酸試液裝片觀察，然后以水合氯醛試液裝片觀察，最后加熱透化或滴加其他試液進行觀察。每步驟觀察結果均應作記錄。

粉碎用具用完后必須處理干凈，干燥后才能使用于另一種藥材。所用蓋玻片和載玻片應絕對干凈。新片要用洗液浸泡或用肥皂水煮半小時取出，先用流水沖洗后，再用蒸餾水沖洗1～2次后，置于70%～90%乙醇中，備用。第23頁,共27頁，2024年2月25日，星期天7顯微鑒別法注意事項

鑒別成方制劑前，應了解處方組成和制法，分析處方中各種飲片的主要鑒別特征及用量的多少。進行顯微鑒別時，應觀察3～5張裝片，使特征不致遺漏

可借助偏光裝置尋找和觀察，尤其是淀粉粒、結

晶，纖維、石細胞、導管等顯微特征。第24頁,共27頁，2024年2月25日，星期天8記錄

粉末顯微鑒別時，先記錄原粉末的色澤、氣味。然后邊觀察、邊記錄。注意觀察的全面性。觀察每張粉末片時，應自上左至下右，呈“之”字形掃描，逐漸移動裝片，全面觀察目的物，描述其特征，測量其長度，并注意統(tǒng)計最小量值、多見量值、最大量值。一一記錄。

組織特征的記錄，應以從外至內的次序進行，對有鑒別意義的特征需詳細地描述；一般應繪制簡圖。必要時，應利用顯微描繪器或顯微攝影裝置繪制詳圖或提供顯微照片，并注明放大倍數(shù)，或加比例尺。第25頁,共27頁，2024年2月25日，星期天8記錄

應注意標準規(guī)定以外的異常顯微特征的記錄，并根據(jù)藥材和飲片的基原、成方制劑的處方和制法綜合分析，必要時可采用對

照藥材或已經(jīng)鑒定