微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)

微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)

（耳鼻喉專業(yè)）

5/8/20241微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)

隨著細(xì)菌耐藥性的不斷變化，新抗生素的開發(fā)

和實(shí)驗(yàn)室技術(shù)的發(fā)展，尤其是面對(duì)新的日益增多難

對(duì)付的病原菌(ESBLS、MRS、MRSA、VRE等)的

分析和鑒定。我們深感微生物學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)之間的

溝通和交流是非常必要的。這樣既有利于醫(yī)生對(duì)感

染性疾病的診療工作，又可提高醫(yī)療水平的檢驗(yàn)質(zhì)量。

5/8/20242微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)一、眼、耳、鼻、喉拭子

病原學(xué)檢驗(yàn)⒈病原菌

⒈１正常眼部是無菌的．⒈２正常的中耳及鼻竇內(nèi)是無菌的.健康人的咽峽部有口腔的正常菌群.⒈３耳、鼻、咽部的細(xì)菌感染病原菌來源于口腔?？谇恢屑扔行柩蹙灿袇捬蹙?，所以，其周圍組織器官的感染不僅考慮是需氧菌，也須檢查厭氧菌。

5/8/20243微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)革蘭陽(yáng)性菌革蘭陰性菌金黃色葡萄球菌腦膜炎柰瑟菌肺炎鏈球菌淋病奈瑟菌B溶血性鏈球菌嗜血桿菌白喉棒狀桿菌莫拉菌念珠菌卡他布蘭漢菌百日咳桿菌腸桿菌科假單胞菌屬產(chǎn)堿桿菌屬

百日咳、白喉患者的咽部可以分離到相應(yīng)的細(xì)菌，同時(shí)還可以分離出腦膜炎奈瑟菌。中耳炎、鼻竇炎及扁桃腺炎的病原菌分布情況見表5/8/20244微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)

2.采集標(biāo)本應(yīng)注意

2.１采集耳、鼻、咽拭子時(shí)易被粘膜上的正常菌群污染，應(yīng)先用無菌生理鹽水沖洗后采集標(biāo)本。

2.２采集眼分泌物時(shí)，應(yīng)先用無菌生理鹽水沖洗眼部，然后用棉拭子拭干，再以無菌棉拭子采取分泌物。

2.３臨床標(biāo)本應(yīng)注意采集時(shí)機(jī)和部位（使用抗菌藥物前、痰標(biāo)本應(yīng)盡量從深部咳出、膿性分泌物一定要取深部的分泌物）。5/8/20245微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)

2.４盛標(biāo)本的容器須先經(jīng)滅菌，但不得用消毒劑或酸類處理。

2.５盡快送檢容器上應(yīng)貼有送檢號(hào)和病人姓名的標(biāo)簽。標(biāo)本采集完畢后應(yīng)盡快送檢，擱置時(shí)間長(zhǎng)會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果。如不能立即送檢，一般應(yīng)予以冷藏保存送檢。某些檢本（如淋病奈瑟氏菌和腦膜炎奈瑟氏菌）在送檢過程中應(yīng)注意保溫。抽血后的培養(yǎng)瓶不能放冰箱。5/8/20246微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)二、血培養(yǎng)

1．局部感染送檢血培養(yǎng)的理由

感染性疾病種類早期出現(xiàn)菌血癥顱內(nèi)感染50-80%

肺炎30%

化膿性關(guān)節(jié)炎20-70%

骨髓炎30-50%

淋球菌感染5-90%

5/8/20247微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)

2.菌血癥的臨床分類菌血癥據(jù)臨床癥狀可分為暫時(shí)性，間歇性和持續(xù)性三種:

暫時(shí)性菌血癥只有在發(fā)病初期才能檢測(cè)到病原菌；細(xì)菌數(shù)１００／ml左右間歇性菌血癥必須在特定時(shí)間內(nèi)才能分離到病原菌；細(xì)菌數(shù)４０／ml左右持續(xù)性菌血癥則在任何時(shí)間可檢到病原菌；細(xì)菌數(shù)５～20/ml左右5/8/20248微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)

2.1采血時(shí)機(jī)：采血最好在病人寒顫發(fā)燒前半小時(shí)，此時(shí)血液中細(xì)菌量最多，當(dāng)病人發(fā)燒后再采血，多數(shù)細(xì)菌已裂解死亡，使培養(yǎng)陽(yáng)性率降低。2.2采血次數(shù)：據(jù)實(shí)驗(yàn)研究：培養(yǎng)1次分離率占80％，培養(yǎng)2次分離率為90％，3次培養(yǎng)分離率達(dá)到99％。（一次培養(yǎng)到表皮葡萄菌應(yīng)慎重。）2.3采血量：成人采血量為5-10ml；兒童1-3ml

采血量在一定程度上與培養(yǎng)陽(yáng)性成正比（每增加1ml血液=增加3%的敏感度）通常血液與培養(yǎng)基的比例為1:5-1:10（稀釋血液中的抗生素抗體成分）。5/8/20249微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)3．降低血培養(yǎng)的污染率(皮膚和培養(yǎng)瓶的消毒方法)。3.1皮膚消毒三步法：

(1)70%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30秒鐘以上。

(2)一根碘伏棉簽消毒皮膚：1%～2%碘酊30秒（或10%碘伏作用60秒）從穿刺點(diǎn)向外以1.5cm～2cm直徑畫圈進(jìn)行消毒。

(3)70%酒精脫碘。3.2培養(yǎng)瓶消毒程序二步法：

(1)用70%酒精(或碘溶液)消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子,酒精作用等待60秒。

(2)在血液注入血培養(yǎng)瓶之前,用無菌紗布清除橡皮塞子表面剩余的酒精,然后注入血液。5/8/202410微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)

4.血培養(yǎng)瓶適合各類無菌體液標(biāo)本增菌

無菌體液經(jīng)過增菌培養(yǎng)大大提高了陽(yáng)性率.(風(fēng)濕科周××腦脊液標(biāo)本用常規(guī)方法培養(yǎng)為無細(xì)菌生長(zhǎng),采用增菌的方法培養(yǎng)三次均為新型隱球菌).無菌體液包括:骨髓、血液、腦脊液、胸水、腹水、關(guān)節(jié)液、心包液、玻璃體液、淚管積液、腦組織液、浸出液、滲出液、深部膿液、羊水、腹膜透析液、血漿引流液、等等,均可采用增菌的方法培養(yǎng).5/8/202411微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)5．血培養(yǎng)陽(yáng)性的多極報(bào)告方式一級(jí)報(bào)告:電話立即報(bào)告革蘭氏染色形態(tài).革蘭氏染色結(jié)果可指導(dǎo)醫(yī)生為患者經(jīng)驗(yàn)選擇抗生素治療,并作為實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)菌鑒定補(bǔ)充試驗(yàn)的參考依據(jù).二級(jí)報(bào)告:依據(jù)細(xì)菌革蘭氏染色形態(tài)特點(diǎn),選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基轉(zhuǎn)種并立即進(jìn)行抗生素敏感試驗(yàn),這種直接非標(biāo)準(zhǔn)的抗生素敏感試驗(yàn),能節(jié)約寶貴的時(shí)間.三級(jí)報(bào)告:轉(zhuǎn)種培養(yǎng)24小時(shí)后進(jìn)行細(xì)菌鑒定和標(biāo)準(zhǔn)的藥敏試驗(yàn),最后發(fā)出終報(bào)告.5/8/202412微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)患者出現(xiàn)哪些重要體癥時(shí)，可作血培養(yǎng)？發(fā)熱（

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C）或低溫（

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C）寒戰(zhàn)白細(xì)胞增多（計(jì)數(shù)大于10，000

109/L，特別有“核左移”、未成熟的或帶狀的白細(xì)胞）粒細(xì)胞減少（成熟的多核白細(xì)胞小于1000

109/L）血小板減少皮膚粘膜出血昏迷，血壓低多器官衰竭呼吸快5/8/202413微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)皮膚和環(huán)境的細(xì)菌在嚴(yán)格的消毒條件下，仍有3%

5%的污染菌皮膚菌：表皮葡萄球菌痤瘡丙酸桿菌梭桿菌屬類白喉群環(huán)境菌：革蘭陽(yáng)性桿菌不動(dòng)桿菌屬

5/8/202414微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)降低污染率的質(zhì)保

如果污染率超過3％，應(yīng)考慮采取以下措施：1.加強(qiáng)宣傳無菌操作采集血標(biāo)本的重要性；2.確保靜脈穿刺采血與接種血培養(yǎng)瓶時(shí)使用的是同一針頭；3.更換皮膚殺菌劑。碘酊殺菌效果快于碘伏(如聚烯吡酮），洗必太是好的皮膚殺菌劑。5/8/202415微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)何種情況下考慮可能是菌血癥的致病菌？對(duì)兩次不同部位血培養(yǎng)生長(zhǎng)同一種微生物其它無菌部位標(biāo)本培養(yǎng)中生長(zhǎng)同一種微生物微生物快速生長(zhǎng)≤48h實(shí)驗(yàn)室工作人員和醫(yī)生之間進(jìn)行交流溝通，結(jié)合臨床討論這些菌的意義5/8/202416微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)1、ESBLs(超廣譜β—內(nèi)酰胺酶)1.1 ESBL的定義：?主要由腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)生。?在體外試驗(yàn)中，可使三代頭孢菌素和氨曲南的抑菌環(huán)縮小.?一般可被棒酸，舒巴坦，三唑巴坦抑制。?臨床上對(duì)青霉素類、頭孢菌素類、單環(huán)類耐藥，但對(duì)碳青霉烯類和頭霉類藥物敏感。?由質(zhì)粒介導(dǎo)，往往由普通的β—內(nèi)酰胺酶基因突變而來。三、當(dāng)前面臨的細(xì)菌耐藥問題及治療對(duì)策

5/8/202417微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)1.2報(bào)告提示由于本菌ESBL陽(yáng)性，因此，青霉素類、頭孢菌素類及安曲南治療體內(nèi)均無效。目前亞胺培南尚未出現(xiàn)耐藥性，也可考慮采用含酶抑制劑的復(fù)合劑與實(shí)驗(yàn)為敏感的藥物聯(lián)合治療。5/8/202418微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)1.3選藥:根據(jù)NCCLS(美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì))建議提出ESBL（+）菌株的治療對(duì)策。1.3.1產(chǎn)超廣譜肺炎克雷伯菌及大腸埃希菌：選用亞胺培南、美羅培南、某些β—內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)方和其他敏感抗菌藥。1.3.2耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌：環(huán)丙沙星、氨基苷類、多粘菌素（粘菌素）或根據(jù)藥敏結(jié)果選用。通常需聯(lián)合用藥。1.3.3耐碳青霉烯類、氟喹諾酮類、氨基苷類、第三代頭孢菌素等的鮑曼不動(dòng)桿菌：用舒巴坦復(fù)方制劑，如氨芐西林/舒巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦；多粘菌素（粘菌素）、聯(lián)合用藥（如氨基苷類與上述藥物聯(lián)合）。5/8/202419微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)2、AmpC(I型酶或I型β—內(nèi)酰胺酶)2.1AmpC的定義·AmpC酶是ampc基因編碼產(chǎn)生·Ampc基因表達(dá)同時(shí)受ampD，ampR，ampG等多種基因調(diào)控?！な穷^孢菌素酶的代表酶?！儆谌旧wBushI型酶或AmblerC類酶。2.2Ampc酶菌株的治療對(duì)策。中、重度感染：頭孢吡肟，美羅培南，亞胺培南氟喹諾酮類：環(huán)內(nèi)沙星，左氧氟沙星氨基糖苷類：阿米卡星5/8/202420微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)3.MRSA及MRCNS—耐甲氧西林金黃葡萄球菌及凝固酶陰性葡萄球菌3.1MRS的意義：·通常對(duì)所有β—內(nèi)酰胺類抗菌素均耐藥。.并對(duì)氯霉素、林可霉素類、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)脂類及喹諾酮類亦不敏感。3.2報(bào)告提示

MRSA或MRCNS:則對(duì)青霉素類、頭孢菌素類、碳青霉烯類和含酶抑制劑均應(yīng)報(bào)告耐藥，而不考慮其體外藥敏結(jié)果.3.3選藥:選用萬(wàn)古霉素或替考拉寧、磷霉素、復(fù)方磺胺甲噁唑、利福平等，可根據(jù)情況與糖肽類藥聯(lián)合使用。5/8/202421微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)

4.PRSP—青霉素耐藥肺炎鏈球菌4.1PRP的意義：?對(duì)青霉素類、頭孢類和碳青霉烯類耐藥。?對(duì)四環(huán)素、紅霉素、氯霉素、克林霉素、鏈霉素、利福平等多重耐藥。4.2報(bào)告提示對(duì)于某些細(xì)菌/抗微生物藥組合，尚不存在耐藥菌株，因此除了“敏感”以外沒有任何其他分類。（如果菌株的結(jié)果提示“不敏感”，應(yīng)該確認(rèn)其其鑒定和藥敏試驗(yàn)。隨后將此菌株遞交到參考試驗(yàn)室用NCCLS的藥敏稀釋法進(jìn)一步確認(rèn)。）5/8/202422微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)4.3選藥:4.3.1青霉素敏感株（PSSP）引起：任何β—內(nèi)酰胺類均有效。4.3.2青霉素中介株（PISP）引起：部分頭孢菌素類如頭孢呋辛、頭孢丙烯、頭孢曲松、頭孢噻肟；青霉素或阿莫西林（大劑量）。4.3.3青霉素耐藥株（PRSP）引起：第三代頭孢菌素如頭孢噻肟、頭孢曲松；氟喹諾酮類如莫西沙星、加替沙星、左氧氟沙星；萬(wàn)古霉素。4.3.4青霉素不敏感（PISP、PRSP）肺炎鏈球菌腦膜炎：萬(wàn)古霉素、美羅培南、頭孢噻肟和頭孢曲松。5/8/202423微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)5.HLAR—高水平耐氨基糖苷類腸球菌5.1報(bào)告提示應(yīng)用大劑量的氨基糖苷類(慶大霉素和鏈霉素)篩選試驗(yàn),能夠預(yù)測(cè)氨芐西林,青霉素或萬(wàn)古霉素和一種氨基糖苷類抗生素的協(xié)同效應(yīng).其它的氨基糖苷類不需進(jìn)行測(cè)試,因?yàn)樗鼈儗?duì)腸球菌的活性并不優(yōu)于慶大霉素和鏈霉素.5.2選藥:5.2.1嚴(yán)重的腸球菌感染，如心內(nèi)膜炎，需要青霉素或氨芐西林加一種氨基糖苷類抗生素的聯(lián)合治療。5.2.2如果用萬(wàn)古霉素治療嚴(yán)重的腸球菌感染，如心內(nèi)膜炎，常常需要與一種氨基糖苷類抗生素聯(lián)用，并在報(bào)告中注明。5/8/202424微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)6.VRE—耐萬(wàn)古霉素腸球菌6.1報(bào)告提示腸球菌對(duì)頭孢菌素類、氨基糖苷類（篩選高水耐藥除外）、克林霉素和甲氧芐啶/磺胺甲惡唑（TMP/SMZ）在體外顯示活性但臨床無效，因此對(duì)上述藥物不應(yīng)該報(bào)告敏感。6.2選藥:VRE株可選用：氯霉素,紅霉素,四環(huán)素(或多西環(huán)素或米諾環(huán)素)及利福平.對(duì)萬(wàn)古霉素耐藥的屎腸球菌可用新開發(fā)品種如利奈唑胺、奎奴普汀—達(dá)福撲汀等，(但后者對(duì)糞腸球菌無作用)。根據(jù)藥敏結(jié)果聯(lián)合用藥（磷霉素、利福平、氟喹諾酮類、米諾環(huán)素等。）磷霉素聯(lián)合呋喃妥因可能對(duì)尿路感染有效。5/8/202425微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)

北京協(xié)和醫(yī)院轉(zhuǎn)載了一個(gè)研究發(fā)現(xiàn)：1、產(chǎn)ESBLs的大腸桿菌的肺炎克雷伯菌：碳青酶烯類最有效，根據(jù)藥效報(bào)告可選擇頭霉素類、加酶抑制劑復(fù)合藥和氟喹諾酮類，必要時(shí)聯(lián)合氨基糖苷類治療；2、產(chǎn)AmpC酶的陰溝腸桿菌和弗勞地枸櫞酸桿菌：碳青霉烯類和四代頭孢菌素最有效，根據(jù)藥敏報(bào)告可選擇氟喹諾酮類，必要時(shí)聯(lián)合氨基糖苷類治療；3、嗜麥芽窄食單胞菌：磺胺最有效，根據(jù)藥敏報(bào)告可選擇替卡西林/棒酸，米諾環(huán)素，氟喹諾酮類和頭孢他啶；4、MRS：萬(wàn)古霉素，去甲萬(wàn)古霉素，替考拉寧，喹奴普汀，利奈唑烷最有效。5、李斯特菌屬：氨芐西林或青霉素，必要時(shí)聯(lián)合慶大霉素最有效。5/8/202426微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)四、微生物藥敏報(bào)告單我院發(fā)出的微生物常規(guī)藥敏報(bào)告單中，革蘭氏陰性菌有20（15）種抗菌素、革蘭氏陽(yáng)性菌有21（16）種抗菌素,抗生素的種類有青霉素類、頭孢類、喹諾酮類、頭霉素類、氨基糖苷類、碳青霉烯類、磺胺類、林可霉素類、多肽類、呋喃類等等。實(shí)驗(yàn)報(bào)告中我們有所測(cè)定的MIC值（最低抑菌濃度，minimalinhibitoryconcentration,

MIC）、敏感度、使用方法（成人劑量）、以及要達(dá)到所測(cè)定敏感度的血藥濃度參考值和尿藥濃度參考值。在最終評(píng)語(yǔ)中：我們對(duì)ESBL、MRS、β－內(nèi)酰胺酶、VRE、HLAR、等作出提示，并報(bào)告出耐藥特性。5/8/202427微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)1．專家系統(tǒng)提示：如果腸道細(xì)菌對(duì)環(huán)丙沙星耐藥（R）并對(duì)任何三代喹諾藥物是“R”，則耐藥性也出現(xiàn)于其他喹諾酮類藥物。2．嗜麥芽窄食單胞菌對(duì)卡巴培能（亞胺培南和美羅培南）天然耐藥，頭孢他啶可能是常用治療假單胞菌的抗生素中抗嗜麥芽窄食單胞菌最有效的藥物，在治療過程中可以出現(xiàn)耐藥。聯(lián)合藥物治療嗜麥芽窄食單胞菌感染的療效更顯著。3．NCCLS標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：用三代頭孢菌素治療，腸桿菌屬、枸櫞酸菌屬和沙雷菌屬可發(fā)展為耐藥性。敏感菌株在開始治療3－4天內(nèi)就可變?yōu)槟退帯Ｒ磸?fù)測(cè)試這些菌株五、報(bào)告評(píng)語(yǔ)5/8/202428微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)4.腸球菌對(duì)鏈霉素2000結(jié)果＝協(xié)同耐藥并對(duì)慶大霉素500結(jié)果＝協(xié)同耐藥。則和任何氨基糖苷類抗生素?zé)o協(xié)同產(chǎn)生。

5．腸球菌對(duì)鏈霉素2000結(jié)果＝協(xié)同敏感并對(duì)慶大霉素500結(jié)果＝協(xié)同耐藥。則協(xié)同僅出現(xiàn)于對(duì)鏈霉素和青霉素敏感的或?qū)μ请念惷舾械木g，和其他氨基糖苷類抗生素不會(huì)出現(xiàn)協(xié)同。6.腸球菌對(duì)鏈霉素2000結(jié)果＝協(xié)同耐藥并對(duì)慶大霉素500結(jié)果＝協(xié)同敏感。則協(xié)同作用僅出現(xiàn)在對(duì)慶大霉素和青霉素敏感的細(xì)菌之間或?qū)μ请念惷舾械募?xì)菌，與鏈霉素?zé)o協(xié)同作用。7.腸球菌對(duì)鏈霉素2000結(jié)果＝協(xié)同敏感并對(duì)慶大霉素500結(jié)果協(xié)同敏感。則協(xié)同出現(xiàn)于慶大霉素、鏈霉素、青霉素敏感的或糖肽類抗生素敏感的細(xì)菌間。5/8/202429微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)鼻竇炎的細(xì)菌學(xué)

鼻竇炎：是指鼻腔黏膜及至少一個(gè)副鼻竇發(fā)生的炎癥和感染。為臨床常見病,多由病毒引起,并發(fā)細(xì)菌感染者,稱為細(xì)菌性鼻竇炎。致病菌：多為肺炎鏈球菌、非典型流感嗜血桿菌、肺炎雙球菌、葡萄球菌、大腸桿菌及變形桿菌等；臨床多見混和感染；院內(nèi)感染者常由革蘭陰性菌引起；齒源性或鼻部、口腔術(shù)后多為厭氧菌感染；免疫功能低下者更易發(fā)生真菌（尤其是曲霉菌及毛菌屬）感染。5/8/202430微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)

慢性鼻竇炎的細(xì)菌學(xué)

細(xì)菌感染作為鼻竇炎的病因之一，已成共識(shí)。但是，鼻竇菌群的不斷變遷以及菌株耐藥的日益嚴(yán)重,困擾著慢性鼻竇炎的抗感染治療5/8/202431微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)標(biāo)本采集在鼻內(nèi)鏡鼻竇手術(shù)中,當(dāng)開放病變較重側(cè)的上頜竇和后組篩竇后,立即伸入特制帶外套管的吸引管,將竇腔膿性分泌物吸取到注射器內(nèi)。排除注射器管內(nèi)空氣,將前、末段分泌物注入需氧菌培養(yǎng)瓶,中段分泌物注入?yún)捬蹙囵B(yǎng)瓶。遇分泌物黏稠、吸取困難時(shí),將吸引器的塑料導(dǎo)管接入注射器管內(nèi)再進(jìn)行取樣,即獲成功。所有標(biāo)本均在30min以內(nèi)送細(xì)菌室進(jìn)行細(xì)菌和真菌培養(yǎng)。5/8/202432微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)需氧菌表皮葡萄球菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、甲型鏈球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、卡他布蘭漢菌、產(chǎn)氣腸桿菌、銅綠假單胞菌、乙型鏈球菌、肺炎克雷伯菌、糞腸球菌、屎腸球菌、變形桿菌、洋蔥假單胞菌厭氧菌脆弱類桿菌、消化鏈球菌屬、丙酸桿菌屬、梭桿菌屬、產(chǎn)黑素普菌5/8/202433微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)細(xì)菌耐藥機(jī)制及藥敏試驗(yàn)

慢性鼻竇炎的致病菌耐藥日趨嚴(yán)重，與β-LPB關(guān)系甚大。Β-內(nèi)酰胺類抗生素的不規(guī)范使用,可誘導(dǎo)細(xì)菌產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶,使β-內(nèi)酰胺類抗生素的β-內(nèi)酰胺鍵斷裂,抗菌活性被破壞,成為耐藥菌株。當(dāng)敏感菌株殺滅后,耐藥菌株獲得大量生存空間而躍為優(yōu)勢(shì)菌,并將其耐藥性水平垂直傳播,最終導(dǎo)致抗生素治療失敗。本研究結(jié)果顯示,β-LPB陽(yáng)性率達(dá)37.7%,以表皮葡萄球菌等更為嚴(yán)重,應(yīng)引起臨床重視,避免使用不耐β-內(nèi)酰胺酶的抗生素。5/8/202434微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)細(xì)菌的陽(yáng)性培養(yǎng)率：中鼻道為42.5%，篩竇為32.5%；需氧菌檢出率：中鼻道為39.2%，篩竇為22.5%；厭氧菌檢出率：中鼻道為12.5%，篩竇為11.7%。慢性鼻竇炎患者中鼻道及篩竇棉拭子標(biāo)本中的細(xì)菌培養(yǎng)率不高；篩竇與中鼻道細(xì)菌的相關(guān)性較小。5/8/202435微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)急性鼻竇炎的細(xì)菌學(xué)易感因素

急性細(xì)菌性鼻竇炎常繼發(fā)于感冒、上呼吸道感染或過敏性及非過敏性急性鼻炎,空氣污染、吸煙、高空飛行氣壓驟變、游泳、跳水、吸毒亦可導(dǎo)致本病的發(fā)生。炎癥多由鼻腔直接蔓延至各鼻竇,因各竇口鄰近,故可為單竇發(fā)病或多竇同時(shí)受累。另外,鄰近病灶感染如急性扁桃體炎、上頜磨牙根尖感染或因拔牙損傷竇壁,亦可繼發(fā)感染。鼻腔填塞物留置過久以及鼻腔內(nèi)占位性病變?nèi)缦⑷狻⒛[瘤、鼻竇外傷等均可導(dǎo)致該病。艾滋病、糖尿病等患者可因機(jī)體免疫力低下,病原菌經(jīng)血循環(huán)播散而致病。5/8/202436微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)鑒別診斷5/8/202437微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)急性細(xì)菌性鼻竇炎和遷延不愈的病毒性上呼吸道感染，癥狀和體征都很相似，容易誤診。所以，臨床工作中常以病程作為上呼吸道感染及細(xì)菌性鼻竇炎鑒別診斷的主要依據(jù)：成人鼻病毒感染的自然病程通常為1～33天，多數(shù)患者在第7～10天自覺癥狀緩解。若上呼吸道感染癥狀持續(xù)10～14天或5～7天后加重，則應(yīng)考慮為急性細(xì)菌性鼻竇炎，并行鼻竇及呼吸道分泌物菌培養(yǎng)，以明確診斷。5/8/202438微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)急性鼻竇炎細(xì)菌學(xué)的研究結(jié)果比較一致，肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌是最常見的致病菌。常見的致病菌5/8/202439微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)

咽炎細(xì)菌學(xué)慢性咽炎是咽科常見病,其發(fā)病率占咽部疾病的10%～20%,它雖為“小病”,有時(shí)卻可嚴(yán)重影響病人的生活質(zhì)量。由于其病因復(fù)雜,病程遷延,且易復(fù)發(fā),耳鼻咽喉科醫(yī)生對(duì)該病治療常感棘手。慢性咽炎雖被稱為炎癥,但有關(guān)其細(xì)菌學(xué)方面的研究甚少,細(xì)菌感染在該病中所起的作用究竟如何尚不清楚。5/8/202440微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)采樣與培養(yǎng)

病人用無菌生理鹽水含漱2～3次,用無菌棉拭子涂擦咽后壁充血處或?yàn)V泡處的黏膜,置于無菌試管并密封,30min內(nèi)送檢驗(yàn)。

5/8/202441微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)

大多數(shù)為口腔正常菌（陳磊報(bào)道）細(xì)菌分布5/8/202442微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)病原菌檢出率為34%；病原菌

流感嗜血桿菌(發(fā)生于慢性干燥性咽炎及慢性單純性咽炎)、肺炎克雷伯桿菌(發(fā)生于慢性厚性咽炎及慢性單純性咽炎)、肺炎鏈球菌(發(fā)生于慢性肥厚型咽炎)、產(chǎn)氣腸桿菌(發(fā)生于慢性單純型咽炎)、卡他莫拉菌(發(fā)生于慢性肥厚型咽炎)、副流感嗜血桿菌(發(fā)生于慢性單純型咽炎、慢性肥厚型咽炎、慢性干燥性咽炎)。僅肺炎鏈球菌為GP菌,其余均為GN菌。許昱報(bào)道5/8/202443微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)以75%酒精消毒外耳道口及其周圍，用無菌槍狀鑷子取小段無菌紗條伸入耳道深部近鼓膜穿孔處拭取濃性分泌物，立即送檢。中耳炎樣本采集5/8/202444微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)

細(xì)菌分布（于維林）5/8/202445微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)藥物敏感試驗(yàn)（江廣理）5/8/202446微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)5/8/202447微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)扁桃體炎5/8/202448微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)目前認(rèn)為急性化膿性扁桃體炎與需氧菌和厭氧菌混合感染有關(guān)。需氧菌和厭氧菌混合感染時(shí),需氧菌消耗了環(huán)境中的氧而有利于厭氧菌的生長(zhǎng)。部分患者可檢出黑色素類桿菌、消化鏈球菌等厭氧菌。4-10小孩多發(fā)病。5/8/202449微生物學(xué)培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)耳鼻喉專業(yè)細(xì)菌僅從表面

分離到的

菌株數(shù)僅從核心

分離到的

菌株數(shù)從兩處同

時(shí)分離到

的菌株數(shù)合計(jì)表面核心流感嗜血桿菌215121427金黃色葡萄球菌57152022肺炎球菌24131517鏈球菌12