實驗動物標準化及實驗動物設(shè)施

1實驗動物質(zhì)量控制標準化和實驗動物環(huán)境設(shè)施2第一節(jié)實驗動物標準化一、實驗動物標準化的必要性1、遺傳背景直接影響著實驗動物結(jié)果的準確性和可靠性

不同遺傳背景的實驗動物其遺傳物質(zhì)有較大差異，生物學特征亦表現(xiàn)不同，因而對同一實驗處理的反應(yīng)性不一樣。32、健康狀況影響著（1）實驗動物生產(chǎn)能否正常進行；（如傳染病、營養(yǎng)不良）（2）動物實驗結(jié)果的可靠性；(由于生理差，易引起反應(yīng)差異，引起數(shù)據(jù)不可比與重復）一、實驗動物標準化的必要性43、必須在特定的環(huán)境條件下培育保證質(zhì)量；保證生物安全；保證動物實驗結(jié)果的可靠性和可重復性；一、實驗動物標準化的必要性5

4、實驗動物是人的替身，是活的試劑與度量衡。主要應(yīng)用的領(lǐng)域包括生命科學、醫(yī)藥科學、生物安全研究、環(huán)境保護科學以及軍事研究與應(yīng)用。一、實驗動物標準化的必要性6一、實驗動物標準化的必要性5、標準化是實驗成功的保證保障人員的健康和安全保證實驗動物的健康保障實驗研究的順利進行保證實驗結(jié)果的正確性、精確性和可重復性67動物標準化實驗動物疾病模型動物新藥篩選質(zhì)量監(jiān)控模型研制模型應(yīng)用安全性評價科學研究安全性評價科學研究環(huán)境控制技術(shù)規(guī)范環(huán)境控制技術(shù)規(guī)范環(huán)境控制技術(shù)規(guī)范動物實驗（使用）實驗動物（生產(chǎn)）質(zhì)量監(jiān)測8第一節(jié)實驗動物標準化二、實驗動物標準化體系國家標準9二、實驗動物標準化體系遺傳質(zhì)量控制：近交系、封閉群、雜交群環(huán)境設(shè)施標準：普通環(huán)境、屏障環(huán)境、隔離環(huán)境微生物、寄生蟲質(zhì)量控制：普通級動物、清潔動物、無特定病原體動物、無菌動物10《實驗動物管理條例》（2號令國家科委1988）修訂中《實驗動物質(zhì)量管理辦法》（國家科委、技監(jiān)局1997）《實驗動物種子中心管理辦法》（科技部1998）《國家嚙齒類實驗動物種子中心引種、供種實施細則》科技部條財司

1998《實驗動物許可證管理辦法(試行)》（七部局2001）（修訂中）《關(guān)于當前許可證發(fā)放過程中有關(guān)實驗動物種子問題的處理意見》科技部條財司

1999《省級實驗動物質(zhì)量檢測機構(gòu)技術(shù)審查準則》科技部條財司

2000《省級實驗動物質(zhì)量檢測機構(gòu)審查細則》科技部條財司

1999《實驗動物出口審批辦法》制定中《善待實驗動物的指導性意見》科技部有關(guān)實驗動物政策法規(guī)11第一節(jié)實驗動物標準化三、廣東省實驗動物管理1988年3月5日，《廣東省實驗動物管理辦法》；2002年12月2日，《廣東省實驗動物許可證管理細則》；2006年4月20日，廣東省人民政府令（第106號）確認“實驗動物生產(chǎn)和使用許可核準”為省科技廳的行政許可項目；2009年11月17日，廣東省人民政府令（第142號）再次確認“實驗動物生產(chǎn)和使用許可核準”為省科技廳的行政許可項目；廣東省實驗動物管理條例(2010年10月1日起施行)1212

實驗動物是活的精密“度量衡”——利用實驗動物檢驗產(chǎn)品的安全性和質(zhì)量，能最可靠地反映藥品的質(zhì)量和安全性，起著理化檢驗或非整體實驗無法替代的作用。立法管理背景13

（1）生物安全事故時有發(fā)生，隱患堪憂——實驗動物是許多人獸共患病的自然宿主，還有動物實驗中實驗感染制造的疾病模型，都可能由于控制失當造成生物安全事故，甚至引發(fā)人員感染死亡。廣東省實驗動物工作的現(xiàn)狀需要許可管理141415（2）違規(guī)生產(chǎn)、使用和販賣實驗動物屢禁不止

個體戶或一些單位，在不合格條件下生產(chǎn)或使用實驗動物，嚴重擾亂了實驗動物市場，違反了實驗動物許可證制度。有不法販子，收購做過實驗的實驗動物，當成合格實驗動物販賣給第二家單位做實驗。

16（3）地區(qū)發(fā)展不平衡，制約總體發(fā)展

我省實驗動物事業(yè)在發(fā)展過程中，珠三角地區(qū)實驗動物設(shè)施水平較高，但東西兩翼及山區(qū)差距大，甚至根本無法達到最基本的要求，嚴重制約科研與產(chǎn)業(yè)發(fā)展。例如潮州地區(qū)沒有一個單位領(lǐng)取過實驗動物許可證。1717（4）實驗動物是關(guān)系公共安全的危險品，需要行政許可。

實驗動物本身可能攜帶人獸共患病，是生物安全控制的對象。

可能攜帶：猴皰疹病毒病、結(jié)核病、流行性出血熱、H5N1禽流感、狂犬病、淋巴細胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒病、真菌病弓形蟲病、鉤端螺旋體病等。1818

國家標準中實驗動物質(zhì)量微生物檢測項目66項中有22項的病原微生物可致人類發(fā)病，其中可致人類死亡的約占30%。

1、1990年2月，中山醫(yī)科大學顯微外科發(fā)生三例實驗人員因使用不合格實驗動物大鼠而感染流行性出血熱病，高熱，出現(xiàn)少尿期和多尿期、腎衰等癥狀；2、1997年4月，中山醫(yī)科大學人體解剖教研室在進行動物實驗時又感染了流行性出血熱病毒；3、1999年9月，廣州中醫(yī)藥大學博士在進行老年癡呆動物實驗時感染流行性出血熱病毒，病情發(fā)展到出現(xiàn)所有臟器功能全面衰竭；4、2007年，中山大學動物實驗設(shè)施在未達標未申領(lǐng)許可證的情況下違規(guī)使用實驗動物造成人獸共患病病員；5、2010年，中山大學又再一次在未許可的場所進行動物實驗，致使實驗人員感染流行性出血熱。

1919（5）現(xiàn)代科學技術(shù)發(fā)展的支撐條件需要行政支持

《國家中長期科學和技術(shù)發(fā)展規(guī)劃綱要（2006—2020年）》中，面向國家重大戰(zhàn)略需求的六大項基礎(chǔ)研究工作均需實驗動物保障。

實驗動物的規(guī)劃、發(fā)展、管理立法也必須與廣東科技創(chuàng)新與中醫(yī)藥強省戰(zhàn)略相適應(yīng)。2020（6）保障實驗動物福利和實驗動物倫理需要行政支持

實驗動物福利和倫理是目前世界各國政府和民間普遍關(guān)注的重要問題，甚至關(guān)系到一個國家的安定，綠色和平組織把保護動物福利提高到動物權(quán)利的高度。2121（7）國際交流與合作需要行政許可

國外對涉及實驗動物的論文、科研項目均有明確的實驗動物法律法規(guī)要求，實現(xiàn)國際接軌。對國外進入我國境內(nèi)的實驗動物及其產(chǎn)品需要相應(yīng)的法律法規(guī)約束，以防止外國公司利用中國法規(guī)空缺實現(xiàn)動物實驗倫理和生物安全等問題的轉(zhuǎn)移，把危害帶給中國22我省實驗動物立法管理的意義（1）解決實驗動物許可證制度沒有配套法規(guī)的問題（2）防范生物安全和公共衛(wèi)生安全問題的出現(xiàn)（3）解決實驗動物倫理福利問題（4）解決違規(guī)生產(chǎn)和使用實驗動物問題（5）解決行業(yè)多頭管理問題（6）解決行政管理規(guī)章層次不高、執(zhí)法力度受限問題23省人大常委會高票通過表決2010年6月2日上午，自2010年10月1日起正式頒布實施，標志著我省實驗動物管理工作進入了法制化管理的新階段。24第二節(jié)環(huán)境因素對實驗動物的影響一、哺乳動物的生態(tài)規(guī)律動物周圍環(huán)境包括：非生物環(huán)境和生物環(huán)境。環(huán)境因素（溫度、濕度、光輻射和水等）作用的一般規(guī)律：1、每一種生物對任何一種環(huán)境因素都有一個適應(yīng)范圍，生物僅能在該范圍內(nèi)生存。2、當一組環(huán)境因素中，有一個因子較接近生物的耐受極限時，該因素就成為對生物起決定性制約作用的關(guān)鍵因素——限制因素。3、環(huán)境因素既可以相互影響也可以綜合作用于生物體。25二、實驗結(jié)果與環(huán)境控制的關(guān)系動物的性狀表現(xiàn)主要由遺傳因素和環(huán)境因素決定。動物對實驗處理的反應(yīng)可用下式表示：

R=（A+B+C）×D±ER：實驗動物的總反應(yīng)

A：實驗動物種的共同反應(yīng)

B：動物品種及品系特有的反應(yīng)

C：動物個體反應(yīng)（個體差異）

D：環(huán)境的影響（包括實驗處理）

E：實驗誤差26二、實驗結(jié)果與環(huán)境控制的關(guān)系實驗動物環(huán)境條件，對動物的健康和質(zhì)量，以及對動物實驗結(jié)果有直接的影響，尤其是高等級的實驗動物，環(huán)境條件要求嚴格和恒定。

實驗動物環(huán)境控制的原則是，充分利用和創(chuàng)造那些對實驗動物有利的因素，消除和防止那些有害因素以保證實驗動物的健康并達到實驗的目的。27三、實驗動物環(huán)境實驗動實驗動物外環(huán)境物環(huán)境實驗動物實驗動物大環(huán)境內(nèi)環(huán)境實驗動物小環(huán)境28三、實驗動物環(huán)境生物的環(huán)境——泛指圍繞生物體的一切事物，是生物賴以生存的外部條件。實驗動物環(huán)境——人工控制的，供實驗動物繁殖、生長的特定場所及有關(guān)條件，即圍繞實驗動物的所有事物的總和。實驗動物設(shè)施——界定實驗動物的生存空間、維持其需要的建筑物和設(shè)備等的總稱。29四、實驗動物設(shè)施實驗動物生產(chǎn)設(shè)施：用于實驗動物生產(chǎn)的建筑物和設(shè)備的總和。實驗動物實驗設(shè)施：以研究、試驗、教學、生物制品和藥品及相關(guān)產(chǎn)品生產(chǎn)、檢定等為目的而進行實驗動物試驗的建筑物和設(shè)備的總和。實驗動物特殊實驗設(shè)施：包括感染動物實驗設(shè)施（動物生物安全實驗室）和應(yīng)用放射性物質(zhì)或有害化學物質(zhì)等進行動物實驗的設(shè)施。特殊實驗動物設(shè)施設(shè)施內(nèi)是負壓，不同污染程度間的區(qū)域與室外均應(yīng)維持一定的負壓梯度，是污染氣體方向由危害程度低的區(qū)域向危害程度高的區(qū)域滲漏，以保證周圍環(huán)境的安全。30五、實驗動物環(huán)境因素的種類

氣候因素：溫度、濕度、氣流、風速等

理化因素：光照、噪聲、粉塵、臭氣（NH3、H2S等）、殺蟲劑、消毒劑、有害氣體等

營養(yǎng)因素：飼料、飲水、籠具、墊料等

生物和棲居因素：各種病原體（細菌、病毒、寄生蟲等）、落菌數(shù)、社會因素和飼養(yǎng)密度等31六、實驗動物環(huán)境監(jiān)控的意義沒有人工嚴格監(jiān)控的實驗動物環(huán)境設(shè)施，就不可能有實驗動物科學的發(fā)展。1、確保實現(xiàn)實驗動物健康和質(zhì)量標準化2、確保動物實驗獲得正確的結(jié)果3、確保實驗動物從業(yè)人員的身體健康，為實驗動物及動物實驗工作者提供適宜的條件32第三節(jié)影響實驗動物的各種環(huán)境因素及其控制要求主要闡述實驗動物飼養(yǎng)室內(nèi)的環(huán)境因素，指飼養(yǎng)室內(nèi)氣溫、相對濕度、氣流、空氣中顆粒物、微生物、有害氣體、光照和噪聲等對實驗動物的影響，并列出各項環(huán)境因素的控制要求。33一、氣候因素（一）氣溫（18-29℃）不同種類動物“熱平衡”區(qū)的范圍不同。在熱平衡區(qū)，動物呈基礎(chǔ)代謝率。如果環(huán)境溫度降至低于熱平衡區(qū)溫度的下限，動物的代謝率將呈線性增長。如果環(huán)境溫度高于熱平衡區(qū)溫度的上限，代謝率也將增長，這不是防御機制，而是由于環(huán)境溫度導致體溫升高，升高的體溫提高了代謝率。34（一）氣溫溫度對實驗動物的影響1、影響生長發(fā)育和繁殖2、影響代謝3、影響健康與抗感染能力4、激發(fā)應(yīng)激反應(yīng)5、影響實驗結(jié)果3536（一）氣溫環(huán)境溫度緩慢地變化，在一定范圍內(nèi)機體可以自行調(diào)節(jié)而適應(yīng)，但氣溫變化過大或過急對動物的健康將產(chǎn)生不良反應(yīng)。環(huán)境溫度與小鼠脈搏數(shù)的關(guān)系環(huán)境溫度（℃）小鼠數(shù)平均（次/分）標準偏差相關(guān)系數(shù)心跳數(shù)17202326291515141611752.1729.2709.5659.3628.621.226.121.929.648.5r=-0.821p<0.013738環(huán)境溫度與小鼠的脈搏數(shù)、呼吸數(shù)、發(fā)熱量的關(guān)系環(huán)境溫度(℃)小鼠數(shù)

平均標準偏差相關(guān)系數(shù)心跳數(shù)1715752.1次/min21.2r=-0.821p<0.012015729.2次/min26.12314907.5次/min21.92616659.3次/min29.62911828.6次/min28.5呼吸數(shù)1613285.7次/min24.9r=-0.859p<0.011921238.4次/min33.22210207.3次/min28.52510178.6次/min27.42811150.7次/min17.6發(fā)熱量1050.85kcal/h/只0.12r=-0.69p<0.011560.76kcal/h/只0.132060.69kcal/h/只0.082570.61kcal/h/只0.083050.62kcal/h/只0.0639（一）氣溫不同氣溫條件下，藥品和化學品對實驗動物的毒性也有較大差異。溫度對三種藥物LD50的影響藥物LD50（mg/kg）15.5℃27℃苯異丙胺鹽酸脫氧麻黃素麻黃素197.090.0111.033.2477.1565.040LD50值在不同的房間溫度條件下相差了35倍，LD50值在動物熱穩(wěn)定區(qū)內(nèi)最高，表明動物在這時對該試驗物質(zhì)的耐受性最強。當然，應(yīng)用其它物質(zhì)也可能獲得相反的結(jié)果，亦即動物在熱穩(wěn)定區(qū)的耐受性最小。41

（一）氣溫在低溫或高溫環(huán)境下動物的繁殖機能下降：氣溫過低或過高常導致雌性動物性周期紊亂；雄性動物精子生成能力下降，睪丸萎縮。

氣溫過高或過低可導致動物抵抗力降低，易患疾病甚至死亡，影響實驗結(jié)果。42各種資料規(guī)定的溫度標準值（℃）種類ASHRAE1ILAR2JAPANGV-SOLAS3OECDMRC小鼠23~2521~2721~2520~2419~2517~21大鼠23~2521~2721~2520~2419~2517~21倉鼠-21~2321~2320~2419~2517~21豚鼠22~2321~2321~2516~2019~2517~21家兔21~2416~2121~2516~2017~2317~21貓24~2518~2921~2720~24-17~21犬21~2418~2921~2716~20-17~21猴24~2625~2621~2520~24--1、美國保暖、冷卻和空調(diào)工程師學會；2、實驗動物資源研究所；3、歐洲實驗動物學會；4、經(jīng)濟合作和發(fā)展組織；5、醫(yī)學研究委員會43（二）空氣濕度（40-70%）空氣濕度是指大氣中水分含量，按每平方米實際含水量（g）表示，稱為絕對濕度；空氣中實際含水量與同等溫度下飽和含水量的百分比值，稱為相對濕度?？諝庀鄬穸葘游餀C體熱調(diào)節(jié)有密切關(guān)系。濕度對動物機體熱調(diào)節(jié)有很大影響，當環(huán)境溫度與體溫接近時，動物體可通過蒸發(fā)作用來排出熱量，而當環(huán)境濕度接近或達到飽和狀態(tài)時（即高溫、高濕的情況下），動物體的蒸發(fā)受到抑制，不利于動物的散熱。44高濕80%-85%，動物將停止生長；高濕容易引起代謝紊亂；利于微生物滋生；氨易溶于水，濕度高，室內(nèi)氨濃度增加。45低濕至40%，小鼠、大鼠和倉鼠繁殖力下降；低于30%停止繁殖，出現(xiàn)疾病癥狀，在大鼠會出現(xiàn)一種特殊的疾病---環(huán)尾??；此時，動物的上呼吸道承受干燥和刺激，可能會出現(xiàn)一系列臨床癥狀；墊料可比正常情況下產(chǎn)生更多的灰塵，堵塞鼻孔；增加靜電產(chǎn)生，泌乳動物在幼仔允吸時會有電擊感，這會導致她們將幼子咬死。46各種資料推薦的實驗動物濕度標準值（%）1、美國保暖、冷卻和空調(diào)工程師學會；2、實驗動物資源研究所；3、歐洲實驗動物學會；4、經(jīng)濟合作和發(fā)展組織；5、醫(yī)學研究委員會種類ASHRAE1ILAR2JAPANGV-SOLAS3OECDMRC小鼠45~5040~7045~5550~6030~7040~70大鼠45~5040~7045~5550~6030~7040~70倉鼠-40~70-50~6030~7040~70豚鼠45~5040~7045~5050~6030~7040~70家兔45~5040~60-50~6030~7040~70貓45~5030~7045~5550~60-40~70犬45~5030~7045~5550~60-40~70猴7540~6045~5550~60-40~7047（三）換氣次數(shù)和氣流速度氣流主要影響動物皮膚的體表蒸發(fā)和對流散熱。在飼養(yǎng)室內(nèi)保持一定氣流，有利于保持溫度、濕度及化學物質(zhì)組成的均勻一致；有利于供給動物新鮮空氣，將污濁氣體排出室外；有利于排除動物呼吸、機械運轉(zhuǎn)產(chǎn)生的余熱；有利于稀釋粉塵和空氣中的浮游微生物。48（三）換氣次數(shù)和氣流速度實驗動物通常采用值系0.13-0.18m/s的氣流。小型實驗動物體表面積與體重之比比大動物大，環(huán)境溫度和氣流速度的變化可引起體溫的變化。如換氣次數(shù)過多，則動物要消耗大量的能量用于維持體溫而出現(xiàn)生育率下降等現(xiàn)象。換氣次數(shù)：屏障環(huán)境：≥15次/h；保證溫度、排凈臭氣和污染粒子。在雙走廊SPF設(shè)施中空氣流動方向是從清潔走廊飼育室→污物走廊、淋浴室→設(shè)施外，室內(nèi)處于正壓。設(shè)施內(nèi)的壓力梯度為20-50Pa。49（三）換氣次數(shù)和氣流速度不同動物的代謝量和必要的換氣量動物種類體重(g)代謝量（與一個人等價的只數(shù)）保證良好空氣狀態(tài)(m3/只)必要的換氣量(m3/只.h)小鼠大鼠金黃地鼠豚鼠兔貓猴犬2120040040026003000300014000672110737021161650.0850.1130.2260.1700.2831.001.004.250.851.272.541.703.2017.0017.0047.250二、理化因素（一）光照（150-300Lux）與晝夜明暗交替時間（12h/12h或10h/14h）51（一）光照動物的活動和生理機能在一晝夜中變化很大，尤其嚙齒類動物午夜比白天活躍。因而僅占電磁波極小部分波段的可見光（350-750μm）對動物機體有多種功能，特別對調(diào)節(jié)其生理活動具有重要意義。光照對實驗動物的影響1、影響視力和內(nèi)分泌系統(tǒng)2、影響生理及生殖機能52（一）光照大鼠、小鼠和家兔是夜行性動物，強光對它們是有害的。當籠具上下排列時，動物所受的光照強度會有很大差別。在籠架底部的動物能夠找到陰影區(qū)域，而處于籠架頂端的動物只能擠在食槽底下避免過多的光照。飼養(yǎng)室內(nèi)光線要符合以下兩方面的基本要求：1、能維持實驗動物健康和繁育條件；2、滿足飼養(yǎng)人員操作和實驗要求。動物室內(nèi)光照明暗比應(yīng)保持穩(wěn)定，一般多控制在12∶12或14∶10。53（二）噪聲（≤60dB）噪聲是影響實驗動物健康的重要環(huán)境因素。動物的聽覺與人不同，能聽到較寬的音域，所以噪聲對動物的影響不容忽視。影響非聽覺效應(yīng)：造成大、小鼠生育力減退，妊娠障礙、流產(chǎn)，甚至出現(xiàn)食仔現(xiàn)象。心率、呼吸加快，血壓升高。聽覺效應(yīng)：噪聲造成聽源性痙攣，表現(xiàn)為耳朵下垂呈緊張狀況，出現(xiàn)洗臉動作，發(fā)生跳躍運動，頭部出現(xiàn)輕微痙攣，嚴重的全身痙攣，四肢僵直死亡。54（二）噪聲噪聲對實驗動物的繁育有很大影響。噪聲環(huán)境下小鼠的產(chǎn)出率與咬仔率分類產(chǎn)出率咬仔率陰道栓確認后飼養(yǎng)在普通環(huán)境下陰道栓確認當天起飼養(yǎng)在噪聲環(huán)境下陰道栓確認18天后飼養(yǎng)在噪聲環(huán)境下10/10（100%）3/5（60%）6/6（100%）0/10（0%）1/3（33%）4/6（67%）55不同品系小鼠對聽源性痙攣發(fā)作的感受性品系雄鼠雌數(shù)DBA/212/12100%10/10100%J:ICR68/8080%106/15568%JC1:ddn23/2370%8/1747%DDD3/1520%2/1613%C16BL/Db1/119%0/190BALB/C0/1500/150C3H/HeN0/1700/190TVCS0/1400/130KK0/1500/120NC0/1600/170備注：3~4周齡音刺強度：10kHz100dB2min56日本三類實驗動物設(shè)施中噪聲的實測水平(dB)測定部位J設(shè)備I設(shè)備T設(shè)備晝夜晝夜晝夜機械室77~9075~9065~7264~7087~9871~72準備室158~7054~6782~8741~4771~8459~69洗滌室260~8854~6782~8741~4771~8459~69走廊60~7057~65--59~6650~63飼育室50~6450~5950~5848~5352~5853~57注：1晝間在操作時測定；2晝間在籠格洗滌劑運轉(zhuǎn)時測定57所有實驗動物的聽力均超過人類，人類的聽力范圍是15000～20,000Hz，而大鼠可測聲音高至100,000Hz.噪聲（Noise）58（二）噪聲噪音是實驗動物發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)的常見原因。引起動物緊張，導致不安和騷動。國家標準：≤60dB。飼養(yǎng)室內(nèi)噪聲的來源1、室內(nèi)機器：各種機器的運轉(zhuǎn)（排風機、空調(diào)機）2、動物自身活動：走動、爭斗、鳴叫3、工作人員行動和操作：喂料、清掃、洗滌、搬器材、談話59在選擇實驗動物設(shè)施場地時盡量避開城市、工廠機器及設(shè)備與飼養(yǎng)是之間要有一定的距離不同動物房之間要隔開對聲感受性高的小動物室內(nèi)門窗和墻壁應(yīng)采用隔音材料安裝的設(shè)備應(yīng)選擇低噪音的產(chǎn)品控制噪聲的措施60（三）粉塵飼養(yǎng)清潔級以上實驗動物的設(shè)施，進入飼養(yǎng)環(huán)境的空氣必須經(jīng)過有效的過濾，去除顆粒物使空氣達到一定的潔凈度。表示凈化的潔凈度主要按美國宇航局生物凈化室的標準，以每立方英尺空氣中含0.5μm以上粒子的累積個數(shù)進行分類。屏障環(huán)境——10000級（即空氣中≥0.5μm的顆粒物應(yīng)≤350個/L）隔離環(huán)境——100級61（三）粉塵

動物飼養(yǎng)室空氣中粉塵的來源一為室外空氣未經(jīng)過濾處理直接帶入；一為動物體表被毛、皮屑、飼料和墊料等材料的碎屑往往可以被氣流攜帶或動物活動揚起而在空氣中懸浮，形成顆粒物污染。62（三）粉塵粉塵（5μm以下）對人及實驗動物的影響1、飼養(yǎng)室空氣中漂浮著顆粒物（塵埃、微生物多附著在顆粒物上），對動物機體可造成不同程度的危害，也可能干擾動物實驗過程——呼吸道刺激、過敏原2、顆粒物除本身對動物產(chǎn)生不良影響外，還可成為微生物的載體，可把各種微生物粒子包括飼料、墊料中帶入的粉螨、霉菌孢子、各種細菌及其芽胞和病毒帶入飼養(yǎng)室。63（四）空氣潔凈度動物糞尿等排泄物發(fā)酵分解產(chǎn)生的污染物種類很多，主要有氨、甲基硫醇、硫化氫、硫化甲基、三甲胺、苯乙烯、乙醛和二硫化甲基等。其中氨是這些污染物質(zhì)中濃度最高的一種，故將其作為飼養(yǎng)室污染狀況的檢測指標。氨濃度≤14ppm/m3有害氣體對實驗動物的影響刺激動物及人的眼結(jié)膜、鼻腔黏膜和呼吸道黏膜，引起鼻炎、氣管炎、肺炎甚至中耳炎。64

飼養(yǎng)間空氣的好壞對于進入房間的人會有最直接的感受。其實，最值得關(guān)注的是籠具中的氣體或微氣候，這與籠具設(shè)計、籠具通風、墊料材料和房間的通風換氣密切相關(guān)。籠具中的氣體理想情況應(yīng)該是盡可能地與新鮮空氣接近，符合空氣中氣體組分的正確混合(nitrogen,78.1%;oxygen,20.92%;carbondioxide,0.03%;andammoniaandothergasses,0.94%)。空氣中氣體成分及通風換氣（Gascomponentsinairandventilation）65不同種動物飼養(yǎng)室與排氣口中惡臭物質(zhì)動物種類小鼠大鼠家兔犬貓猴總排氣口

面積(m2)9.621.686.421.621.614.4n=7收容只數(shù)340280205241919惡臭物質(zhì)氨氣(mg.L-1)19.01.826.724.715.023.72.5±0.7甲基硫醇(μg.L-1)0.10.10.12.61.70.80.07±0.19硫化氫(μg.L-1)0.10.50.43.77.53.40.45硫化甲基(μg.L-1)0.20.20.61.60.80.30.06三甲胺(μg.L-1)未檢出未檢出苯乙烯(μg.L-1)未檢出未檢出乙醛(μg.L-1)未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出二硫化甲基(μg.L-1)未檢出未檢出未檢出0.60.4未檢出未檢出注：星期一清掃前測定。各室溫度為22±2℃，濕度均為50%±10%，換氣次數(shù)均為10次/h，個數(shù)之取3次的平均值66三、生物因素（一）空氣中的微生物——落菌數(shù)：以細菌（非致?。?shù)為指標。在5-10m２面積放置1只9cm直徑的培養(yǎng)皿，放置30min，經(jīng)37℃培養(yǎng)48h，計算落下菌落數(shù)。普通環(huán)境——無硬性規(guī)定屏障環(huán)境——3個/皿隔離環(huán)境——無檢出67（二）社會因素和飼養(yǎng)密度1、社會因素——社會地位2、飼養(yǎng)密度——每m2最大飼養(yǎng)密度 小鼠——100只 大鼠——50只 豚鼠——20只 兔——4只 狗——1只 猴——1只6869第四節(jié)實驗動物環(huán)境及設(shè)施國家標準

（GB14925-2010）70普通環(huán)境設(shè)施符合動物居住的基本要求，不能完全控制傳染因子，適用于飼育教學等用途的普通級實驗動物。屏障環(huán)境符合動物居住的要求，嚴格控制人員、物品和空氣的進出，適用于飼育清潔級和/或無特定病原體級實驗動物。隔離環(huán)境設(shè)施采用無菌隔離裝置以保持無菌或無外源污染動物。隔離裝置內(nèi)的空氣、飼料、水、墊料和設(shè)備應(yīng)無菌，動物和物料的動態(tài)傳遞須經(jīng)特殊的傳遞系統(tǒng)，該系統(tǒng)既能保持與環(huán)境的絕對隔離，又能滿足轉(zhuǎn)運動物時保持內(nèi)環(huán)境一致。適用于飼育無特定病原體級、悉生及無菌級實驗動物。

7172六、實驗動物環(huán)境及設(shè)施國家標準（GB14925-2010）73一、隔離環(huán)境由隔離器（正壓或負壓隔離器）等與外界隔離的設(shè)施及其附屬輔助裝置組成的飼養(yǎng)系統(tǒng)。用于飼養(yǎng)無菌動物、悉生動物和SPF動物。74一、隔離環(huán)境操作時，工作人員只能通過隔離器上的橡膠手套來進行飼養(yǎng)或?qū)嶒灐Ｎ锲肥峭ㄟ^包裝消毒后，由滅菌渡艙或傳遞窗傳入；動物是經(jīng)由無菌剖腹產(chǎn)的方法進入；進入隔離器的空氣，應(yīng)經(jīng)高效過濾，保證隔離器內(nèi)空氣潔凈度達100級，無菌并維持正壓狀態(tài)。根據(jù)實驗需要也可維持負壓狀態(tài)，但需要配置空氣排放裝置，保證空氣排放符合標準。

75一、隔離環(huán)境要點：1、物品要求滅菌2、人員與實驗動物隔離3、動物要求采取檢疫措施4、空氣潔凈度達到100級76二、屏障環(huán)境是標準的動物飼養(yǎng)室或?qū)嶒炇?，用來飼養(yǎng)SPF動物。屏障系統(tǒng)模式圖77二、屏障環(huán)境1、與外界相對隔離的設(shè)施，表現(xiàn)為無窗或密封門窗，有緩沖間。適合飼養(yǎng)清潔級動物和SPF級動物。2、空氣采取三級過濾，空氣潔凈度達到10000級。設(shè)施內(nèi)不同的區(qū)域之間存在著一定的空氣壓力差，室內(nèi)保持正壓。3、人員經(jīng)過一定的消毒程序后方能進入，如淋浴、洗手、噴霧、風淋等。工作時應(yīng)帶滅菌手套，盡量減少與動物的直接接觸。4、物品經(jīng)高壓滅菌、化學滅菌和紫外線照射后進入，即滅菌處理后進入。5、動物經(jīng)一定步驟的檢疫、監(jiān)測后證明合格方能進入。6、空氣、人、物品、動物的走向采用單向流通。78屏障環(huán)境移動流程

屏障系統(tǒng)動物室的移動路線模式圖79二、屏障環(huán)境進入清潔區(qū)的人員、動物和物品要分別遵循一定的運行路線：人員：更衣--淋浴--更衣--清潔走廊--飼養(yǎng)室或動物實驗室—污物走廊--洗刷消毒室--更衣--外部區(qū)域。

物品：包裝--高壓消毒（已包裝消毒的可經(jīng)傳遞窗，清結(jié)籠具經(jīng)有消毒液的渡槽）--清結(jié)準備室--清潔物品儲存室--飼養(yǎng)室或動物實驗室--（污物經(jīng)包裝處理）污物走廊--外部區(qū)域。

動物：動物（帶專用包裝）--傳遞窗--檢疫室--清潔走廊--飼育室或?qū)嶒炇?-（實驗后或生產(chǎn)供應(yīng)）--傳遞窗--（經(jīng)包裝）污物走廊--外部區(qū)域。80外區(qū)磁卡登記磁卡門清潔走廊緩沖間實驗觀察室污物走廊風淋手消毒更衣室1更衣室2換鞋換無菌服淋浴外界8182三、普通環(huán)境

與外界相通的環(huán)境，適用于飼養(yǎng)普通級實驗動物的設(shè)施。

人員：進入飼養(yǎng)室前必須更換工作服、鞋，戴工作帽和口罩，工作前洗手。安裝凈化排風裝置，有防昆蟲、野鼠的設(shè)施。所用物品（均指未經(jīng)污染的）須經(jīng)適當處理（飼料經(jīng)烘干、安全貯存，墊料高溫）方可應(yīng)用，籠具水瓶集中洗刷消毒。83三、普通環(huán)境該系統(tǒng)通常分為三個區(qū)域：前區(qū)（檢疫室、辦公室、休息室等）；控制區(qū)（動物飼育室、或動物實驗室、清潔走廊、清潔物品儲存室等）；后勤處理室（污染走廊、洗刷消毒室、污物處理設(shè)施等）。人員、動物和物品原則上按：前區(qū)--控制區(qū)--后勤處理區(qū)的走向運行。84四、室外1避開自然疫源地。2空氣質(zhì)量及自然環(huán)境較好的區(qū)域。3遠離鐵路，碼頭，飛機場，交通要道及工廠，貯倉等污染，噪聲干擾的區(qū)域。4如不能遠離，則應(yīng)布置在當?shù)叵募咀钚☆l率風向的下風側(cè)。5與生活區(qū)保持50m的距離。85第五節(jié)實驗動物設(shè)施的使用及維護一、設(shè)施的人員配置二、規(guī)章制度和SOP的建立三、實驗動物設(shè)施的運行管理86一、設(shè)施的人員配置1、總負責人2、具體操作人員3、設(shè)施質(zhì)量監(jiān)督人員87二、規(guī)章制度和SOP的建立從管理及應(yīng)急預案、人員物品動物進出、實驗標準操作、儀器設(shè)施的使用與維護等方面制定了64個標準操作規(guī)程。大型系統(tǒng)維護：凈化系統(tǒng)、空調(diào)系統(tǒng)、滅菌系統(tǒng)、動物飲用無菌水系統(tǒng)88規(guī)章制度一覽表0001文件制定、格式與管理制度0002SPF級動物室使用制度0003普通級動物室使用制度0004進出SPF級動物室制度0005進出普通級動物室制度0006動物室喂飼、喂水與更換墊料制度0007動物室衛(wèi)