生物化學與分子生物學：常用分子生物學技術(shù)的原理及應用

常用分子生物學技術(shù)的原理及應用印跡技術(shù)類別及應用:（一）DNA印跡技術(shù)(Southernblotting)用于基因組DNA、重組質(zhì)粒和噬菌體的分析。（二）RNA印跡技術(shù)(Northernblotting)

用于RNA的定性定量分析。（三）蛋白質(zhì)的印跡分析(Westernblotting)

用于蛋白質(zhì)定性定量及相互作用研究。

2008X-162．常用于研究基因表達的分子生物學技術(shù)有A．NorthernblottingB．SouthernblottingC．WesternblottingD．RT-PCR答案：ACD解析：基因表達=轉(zhuǎn)錄(RNA)+翻譯(蛋白)下列哪些手段利用了核酸分子雜交原理？A、Southern印跡B、Northern印跡C、斑點印跡D、基因芯片答案：ABCD

細胞信號轉(zhuǎn)導第一信使:細胞間信息物質(zhì)，細胞分泌調(diào)節(jié)靶細胞活動的物質(zhì)。分三類：神經(jīng)激素：乙酰膽堿和去甲腎上腺素內(nèi)分泌：胰島素、甲狀腺素、生長激素旁分泌及自分泌：生長因子、白細胞介素能與胞內(nèi)受體結(jié)合的信息物質(zhì)有類固醇激素、甲狀腺素、維生素D3和維甲酸。2003A-32、通過胞內(nèi)受體發(fā)揮作用的激素是A、腎上腺素B、甲狀腺激素C、胰高血糖素D、胰島素

E、促腎上腺皮質(zhì)激素答案：B重要效應酶：腺苷酸環(huán)化酶（AC）磷脂酶C（PLC）磷脂酶A2（PLA2）磷酸二酯酶（PDE）①腎上腺素、胰高血糖素、促腎上腺皮質(zhì)激素②促甲狀腺激素釋放激素、去甲腎上腺素、抗利尿激素③心鈉素、NO④胰島素、生長激素、紅細胞生成素、表皮生長因子⑤甲狀腺素、糖皮質(zhì)激素、鹽皮質(zhì)激素、雌激素通過cAMP-蛋白激酶途徑發(fā)揮作用的激素是：A、心鈉素B、促腎上腺皮質(zhì)激素C、去甲腎上腺素D、胰高血糖素答案：BD硝酸甘油治療心絞痛的機理是：硝酸甘油促使心臟內(nèi)皮細胞產(chǎn)生NO與NO受體結(jié)合，該受體具有的活性是A、鳥苷酸環(huán)化酶 B、腺苷酸環(huán)化酶C、鳥苷酸水解酶 D、絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶胰島素等生長因子的受體被激活后表現(xiàn)的活性為A．Ser激酶 B．Thr激酶C．Tyr激酶 E．Ser和Thr激酶ACG蛋白偶聯(lián)受體：七跨膜

螺旋受體

G蛋白：和GTP或GDP結(jié)合的蛋白，、、三個亞基組成。非活化型：αβγ三聚體與GDP結(jié)合活化型：α亞基與GTP結(jié)合，βγ脫落2002A-31．G蛋白是指

A．蛋白激酶A

B．鳥苷酸環(huán)化酶C．蛋白激酶GD.Grb2結(jié)合蛋白E．鳥苷酸結(jié)合蛋白答案：E2007A169.關(guān)于GTP結(jié)合蛋白(G蛋白)敘述錯誤的是A.膜受體通過G蛋白與腺甘酸環(huán)化酶偶聯(lián)B.可催化GTP水解為GDPC.霍亂毒素可使其失活D.有三種亞基α,β,γ答案：C解析：各種G蛋白的α亞基均有一個被霍亂毒素進行ADP核糖基化的修飾部位，能改變G蛋白功能。霍亂毒素引起αADP核糖基化，α喪失GTPase活性，維持在活性狀態(tài)。1997A32．能使GTP結(jié)合蛋白中的Gs亞基喪失GTP酶活性的是A．霍亂毒素B．百日咳毒素C．白喉毒素D．抗霉素AE．魚藤酮答案：A解析：白喉毒素使真核延長因子eEF-2糖基化失活?？苟舅谹抑制復合體ⅢCytb與Cytc1間電子傳遞。魚藤酮與復合體I鐵硫蛋白結(jié)合，阻斷電子傳遞。2012A-39.與7次跨膜結(jié)構(gòu)受體偶聯(lián)的蛋白質(zhì)是A.蛋白激酶AB.小G蛋白C.酪氨酸蛋白激酶D.異源三聚體結(jié)構(gòu)的G蛋白答案：D效應酶G蛋白作用于腺苷酸環(huán)化酶AC，催化ATP生成第二信使如cAMP其他效應酶：鳥苷酸活化酶（GC）cGMP磷脂酶C（PLC）IP3DAG(DG)PPiATPACMg2+cAMP5′-AMP

磷酸二酯酶H2OMg2+IP3：與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和肌漿網(wǎng)上的受體結(jié)合，促使細胞內(nèi)Ca2+釋放DAG：激活PKC下列可直接被活化G蛋白激活的是：A、腺苷酸環(huán)化酶B、磷脂酶CC、鳥苷酸環(huán)化酶D、蛋白激酶A答案：ABC2004A-30.直接影響細胞內(nèi)cAMP含量的酶是A.磷脂酶B.蛋白激酶AC.腺苷酸環(huán)化酶D.蛋白激酶CE.酪氨酸蛋白激酶答案：C2006A-36.下列哪種酶激活后會直接引起cAMP濃度降低?A.蛋白激酶AB．蛋白激酶CC.磷酸二酯酶

D．磷脂酶CE．蛋白激酶G答案：C第二信使：細胞內(nèi)產(chǎn)生的傳遞細胞調(diào)控信號的化學物質(zhì)如：Ca2+、DAG、IP3、Cer、cAMP、cGMP等。第三信使：細胞核內(nèi)外信息傳遞的物質(zhì)，是可與靶基因特異序列結(jié)合，調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄。1999X-146．參與細胞內(nèi)信息傳遞的第二信使物質(zhì)有

A．cAMP

B．Ca2+

C．DG（DAG）D．IP3答案：ABCD

2009X-162、細胞內(nèi)信息傳遞中能作為第二信使的有：A、cGMPB、AMPC、DAGD、TPK答案：ACA．磷脂酶AB．磷脂酶CC．腺苷酸環(huán)化酶D．鳥苷酸環(huán)化酶2008B121、與胞質(zhì)中cAMP生成有直接關(guān)系的G蛋白效應器是C

2008B122、與IP3和DG生成有直接關(guān)系的G蛋白效應器是B

cAMP激活蛋白激酶A

PKA（絲∕蘇氨酸蛋白激酶）cGMP激活蛋白激酶GPKGDAG、Ca2+激活蛋白激酶CPKC2005B-36、cAMP能別構(gòu)激活下列哪種酶?A、磷脂酶AB．蛋白激酶A

C．蛋白激酶CD．蛋白激酶GE．酪氨酸蛋白激酶答案：BPTK-Ras-MAPK途徑細胞生長、增殖和分化JAKs-STAT途徑細胞生長、增殖和分化NF-B途徑炎癥和應激反應信號分子TGF-β途徑調(diào)節(jié)增殖、分化和凋亡2008X-159．與細胞生長、增殖和分化有關(guān)的信號轉(zhuǎn)導途徑主要有A．cAMP-蛋白激酶途徑B．cGMP-蛋白激酶途徑C．受體型TPK-Ras-MAPK途徑D．JAK-STAT途徑答案：CD癌基因與抑癌基因抑癌基因癌基因生長因子細胞負調(diào)控正調(diào)控癌基因：細胞內(nèi)控制細胞生長和分化的基因，它的異?？梢砸鸺毎┳儯ǚ材芫幋a生長因子、生長因子受體、細胞內(nèi)生長因子傳遞分子，以及與生長有關(guān)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子的基因）2007A-34.下列細胞原癌基因的敘述正確的是A.存在于DNA病毒中B.存在于正常真核生物基因組中C.存在于RNA病毒中D.正常細胞含有即可導致腫瘤的發(fā)生答案：B癌基因的特點:①廣泛存在于生物界，基因序列呈高度保守性。②維持正常生理功能、調(diào)控細胞生長和分化起重要作用。③理化因素作用下被激活，發(fā)生數(shù)量上或結(jié)構(gòu)上的變化時，可能導致正常細胞癌變。2010A40．下列關(guān)于原癌基因的敘述正確的是A．只存在于哺乳動物中B．進化過程中高度變異C．維持正常細胞生理功能

D．Rb基因是最早發(fā)現(xiàn)的原癌基因答案：C常見癌基因舉例：1、細胞外生長因子sis2、跨膜的生長因子受體c-src、c-abl、c-mos、c-raf3、細胞內(nèi)信號傳導體：c-src、c-abl、c-ras、c-mas、crk4、核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子myc、fos2008X-161．下列基因?qū)儆谠┗虻挠蠥．c-junB．c-fosC．c-erbBD．P16答案：ABC2010X-162、細胞癌基因的產(chǎn)物有ABDA、生長因子受體B、轉(zhuǎn)錄因子C、P53蛋白D、酪氨酸蛋白激酶答案：ABD1、獲得啟動子與增強子2、基因易位3、原癌基因擴增4、點突變癌基因活化機制:原癌基因的活化機制包括：ABCDA、獲得啟動子和增強子B、基因易位C、原癌基因擴散D、點突變答案：ABCD抑癌基因：抑制細胞過度生長、增殖從而遏制腫瘤的基因。A、細胞原癌基因B、抑癌基因C、病毒癌基因D、操縱子調(diào)節(jié)基因2007B-111P53基因是一種B2007B-112正常細胞內(nèi)可以編碼生長因子的基因是A

維生素

維生素A構(gòu)成視紫紅質(zhì)；保持上皮完整夜盲癥、干眼病維生素D促進鈣磷吸收佝僂病維生素E保護細胞膜，維持生殖維生素K合成凝血因子易出血脂溶性維生素2012X-162.下列關(guān)于維生素D的敘述正確的有：A.調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣、磷代謝B.代謝產(chǎn)物可與核受體結(jié)合C.作為輔酶參與糖有氧氧化D.構(gòu)成視覺細胞內(nèi)的感光物質(zhì)答案：AB維生素B1

硫胺素TPP腳氣病維生素B2

核黃素FMN

FAD口角炎維生素B6磷酸吡哆醛轉(zhuǎn)氨酶、脫羧酶、ALA合酶輔酶維生素B12甲鈷胺素轉(zhuǎn)甲基酶巨幼貧維生素PPNAD+和NADP+癩皮病維生素