上海外國語大學附屬中學高三第三次模擬考試新高考生物試卷及答案解析

上海外國語大學附屬中學高三第三次模擬考試新高考生物試卷注意事項1．考生要認真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．在觀察細胞減數(shù)分裂圖像時，圖像中的同源染色體和姐妹染色單體不易區(qū)分，還需借助其他結(jié)構(gòu)特點。如植物減數(shù)分裂產(chǎn)生的子細胞全部包在胼胝體（由葡聚糖形成的透明包層）內(nèi)，直到分裂結(jié)束，子細胞才分散。以下各圖是處于減數(shù)分裂不同時期的水仙細胞，下列敘述正確的是（）A．圖3所示細胞發(fā)生了同源染色體分離B．圖9所示細胞發(fā)生姐妹染色單體分離C．圖1、5、6所示細胞處于減數(shù)第一次分裂D．圖2、7、8所示細胞處于減數(shù)第二次分裂2．下列關(guān)于基因突變的表述錯誤的是（）A．發(fā)生基因突變的生物，其性狀隨之改變B．基因突變產(chǎn)生了新的基因C．基因突變一般具有可逆性的特點D．基因突變可以發(fā)生在RNA上3．研究人員利用農(nóng)桿菌侵染水稻葉片，經(jīng)組培、篩選最終獲得了一株水稻突變體。利用不同的限制酶處理突變體的總DNA、電泳；并與野生型的處理結(jié)果對比，得到圖所示放射性檢測結(jié)果。（注：T-DNA上沒有所用限制酶的酶切位點）對該實驗的分析錯誤的是（）A．檢測結(jié)果時使用了放射性標記的T-DNA片段做探針B．該突變體產(chǎn)生的根本原因是由于T-DNA插入到水稻核DNA中C．不同酶切顯示的雜交帶位置不同，說明T-DNA有不同的插入位置D．若野生型也出現(xiàn)雜交帶，則實驗樣本可能被污染，檢測結(jié)果不準確4．下列有關(guān)遺傳與人類健康的敘述，正確的是（）A．單基因遺傳病由染色體上單個基因的異常引起B(yǎng)．羊膜腔穿刺能治療胎兒出現(xiàn)的神經(jīng)管缺陷C．受精至著床前后17天，最易形成胎兒畸形D．個體發(fā)育和性狀表現(xiàn)偏離正常都是由有害基因造成的5．下列物質(zhì)屬于相關(guān)細胞產(chǎn)物或細胞的組成成分，其中都能體現(xiàn)細胞分化的一組是A．mRNA、tRNA B．DNA、DNA聚合酶 C．血紅蛋白、磷脂 D．胰島素、抗體6．下列有關(guān)免疫學應(yīng)用的敘述，錯誤的是（）A．用人工標記的抗體可以對組織內(nèi)相應(yīng)的抗原進行檢測B．抑制T細胞增殖可降低異體器官移植的免疫排斥反應(yīng)C．注射動物血清的目的是刺激機體產(chǎn)生記憶細胞和抗體D．注射青霉素前進行皮試能判斷機體是否對青霉素過敏二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）某生態(tài)茶場依靠“以草養(yǎng)蟲”“以草肥田”及生物防治等生產(chǎn)措施，多年來堅持不打農(nóng)藥、不施化肥和除草劑，獲得了良好的經(jīng)濟效益和生態(tài)效益。請回答下列問題：（1）茶毛蟲幼蟲能以茶樹芽和幼葉為食。調(diào)查茶毛蟲幼蟲的密度，一般采用的方法是____。茶小綠葉蟬以吸食茶樹幼嫩部位的汁液為生，茶毛蟲與茶小綠葉蟬的種間關(guān)系是____。（2）該茶廠生態(tài)系統(tǒng)的基石是____。茶場工人在每年4月、7月和10月各進行一次入工除草。從種間關(guān)系分析，人工除草的目的主要是____。從物質(zhì)循環(huán)的角度分析，人工除草能加快物質(zhì)循環(huán)利用，草稈為茶樹提供____。（3）茶場及周邊優(yōu)美的生態(tài)環(huán)境吸引了游人前來觀光、休閑，體現(xiàn)了生物多樣性的____價值。茶園棄荒的過程中，茶樹下首先出現(xiàn)一年生雜草，再逐步演替到灌木階段。在灌木階段，茶園內(nèi)很少有一年生草本植物生長，原因是____。8．（10分）布氏田鼠是生活在寒冷地帶的一種非冬眠小型哺乳動物。下圖為持續(xù)寒冷刺激下機體調(diào)節(jié)褐色脂肪組織細胞（BAT細胞）產(chǎn)熱過程的示意圖。請分析回答下列有關(guān)問題：（1）在持續(xù)寒冷刺激的條件下，BAT細胞中的脂肪酸主要去路是_______。A．與甘油在線粒體內(nèi)重新合成甘油三酯B．轉(zhuǎn)化成丙酮酸后再進入線粒體參與糖代謝C．在細胞質(zhì)基質(zhì)中被氧化成二碳化合物后再進入線粒體D．在線粒體基質(zhì)中參與有氧呼吸第2階段（2）寒冷刺激一方面使下丘腦部分傳出神經(jīng)末梢釋放____，此過程使BAT細胞中cAMP增加，導致部分脂肪分解。另一方面寒冷刺激還能使下丘腦合成并釋放_______的量增加，最終導致體內(nèi)甲狀腺激素的量增加。（3）有氧呼吸過程中大量ATP是在______（部位）合成的，該結(jié)構(gòu)富含ATP合成酶，能在跨膜H+濃度梯度的推動下合成ATP。在BAT細胞中，_______能促進UCP-1基因表達，UCP-1蛋白能增大該結(jié)構(gòu)對H+的通透性，消除H+梯度，無法合成ATP。那么在BAT細胞中有氧呼吸最后階段釋放出來的能量的全部變成_________。（4）綜上所述，在持續(xù)寒冷的環(huán)境中，布氏田鼠通過_____調(diào)節(jié)，最終引起B(yǎng)AT細胞中____和______，實現(xiàn)產(chǎn)熱增加，維持體溫的穩(wěn)定。9．（10分）荸薺又稱馬蹄，是一種果蔬兼用型的經(jīng)濟作物，在生產(chǎn)實踐中發(fā)現(xiàn)，洗得干凈的荸薺在貯藏過程中往往比帶泥荸薺更容易失水腐爛。研究者從荸薺表面泥土中分離出一些拮抗細菌，并發(fā)現(xiàn)2株拮抗細菌發(fā)酵濾液對荸薺表面細菌、霉菌具有顯著的抑制作用，為荸薺貯藏過程中新型生物貯藏保鮮技術(shù)的開發(fā)提供了一定的理論依據(jù)。分離純化拮抗細菌的操作如下，請回答：（1）從新鮮的帶泥荸薺中分離出泥土樣后，將樣品稀釋至一定濃度范圍，以保證獲得菌落數(shù)在________之間的計數(shù)平板，稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁操作，目的是確保________。（2）吸取1mL稀釋液涂布到培養(yǎng)基上培養(yǎng)，制備固體培養(yǎng)基時應(yīng)加入_________，培養(yǎng)基采用________法滅菌。（3）從培養(yǎng)基上挑選出菌落形態(tài)不同的單菌落若干，培養(yǎng)24h后，取菌液劃線于培養(yǎng)基中，獲得單菌落，重復3次，獲得純化菌株，劃線時應(yīng)注意從________開始劃；為了防止水蒸汽凝結(jié)成的水珠影響平板內(nèi)菌落生長，培養(yǎng)時應(yīng)將培養(yǎng)皿________。（4）研究發(fā)現(xiàn)2株細菌的發(fā)酵液對荸薺表面細菌、霉菌具有顯著的抑制作用，為長期保存這兩種菌種，可采用________法保存，并放在________℃的冷凍箱中。10．（10分）在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以放出熒光。熒光素酶及其合成基因在生物研究中有著廣泛的應(yīng)用。請回答下列問題：（1）熒光素酶基因可以從基因文庫中獲取，也可以通過________方法得到，再利用PCR技術(shù)擴增即可，擴增熒光素酶基因利用的原理是__________________。（2）在基因工程操作過程中，需要用________酶和________酶構(gòu)建基因表達載體，基因表達載體要有________，以便篩選出含有目的基因的受體細胞。（3）熒光素酶基因也可以作為目的基因轉(zhuǎn)入某些動植物細胞中表達產(chǎn)生熒光素酶。將目的基因?qū)胫参锛毎壳俺Ｓ玫哪康幕蜉d體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒，目的基因需插入到該基因載體的________上，然后再轉(zhuǎn)移至受體細胞中。將目的基因?qū)雱游锛毎募夹g(shù)中，應(yīng)用最多的是_______。11．（15分）某溫帶草原生態(tài)系統(tǒng)的食物網(wǎng)如左下圖所示；不同營養(yǎng)級的同化能量與能量分配如右表所示。請回答：營養(yǎng)級同化能量能量分配(單位：cal/cm5．a(chǎn))呼吸X分解者未利用生產(chǎn)者1．35．83．5593植食性動物4．83．65．159．3肉食性動物7．5微量5（1）鷹在食物網(wǎng)中有___________個營養(yǎng)級。（5）在該草原群落中，貓頭鷹晝伏夜行，這種現(xiàn)象體現(xiàn)了群落的__________________結(jié)構(gòu)。（3）左圖中兔糞便中的能量________（填“能”或“不能”）傳遞給狐。（4）表中生產(chǎn)者用于生長發(fā)育繁殖的能量包括____________________________。表中X表示的能量去路是____________________。根據(jù)表中數(shù)據(jù)關(guān)系分析，從第一個營養(yǎng)級到第二個營養(yǎng)級的能量傳遞效率為__________%（保留一位小數(shù)）。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、A【解析】

對題圖進行分析可知，圖1~9所示細胞所處的時期依次是減數(shù)第一次分裂前期、減數(shù)第二次分裂后期、減數(shù)第一次分裂后期、減數(shù)第二次分裂末期、減數(shù)第一次分裂間期、減數(shù)第二次分裂前期、減數(shù)第一次分裂中期、減數(shù)第一次分裂末期、減數(shù)第二次分裂中期?！驹斀狻緼、圖3所示細胞處于減數(shù)第一次分裂后期，該時期發(fā)生了同源染色體分離，A正確；B、圖9所示細胞處于減數(shù)第二次分裂中期，著絲粒排列在赤道板上，B錯誤；C、圖6所示細胞處于減數(shù)第二次分裂前期，C錯誤；D、圖7、8所示細胞分別處于減數(shù)第一次分裂中期、減數(shù)第一次分裂末期，D錯誤。故選A?！军c睛】識記減數(shù)分裂各時期的主要特點，準確圖1~9所示細胞所處的時期是解答本題的關(guān)鍵。2、A【解析】

基因突變是指由于基因內(nèi)部核酸分子上的特定核苷酸序列發(fā)生改變的現(xiàn)象或過程。DNA分子上堿基對的缺失、增加或替換都可以引起核苷酸序列的變化，因而引起基因結(jié)構(gòu)的改變?！驹斀狻緼、由于密碼子的簡并性、隱性突變等原因，發(fā)生基因突變的生物，其性狀不一定發(fā)生改變，A錯誤；B、基因突變是新基因產(chǎn)生的途徑，B正確；C、基因突變具有可逆性，即顯性基因可以突變?yōu)殡[性基因，而隱性基因也可突變?yōu)轱@性基因，C正確；D、以RNA為遺傳物質(zhì)的病毒其遺傳信息儲存在RNA中，故基因突變可以發(fā)生在以RNA為遺傳物質(zhì)的病毒中，D正確。故選A?！军c睛】本題考查基因突變的相關(guān)知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力，識記基因突變的原因及特點是解題關(guān)鍵。3、C【解析】

將目的基因插入到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以使目的基因進入植物細胞，并將其插入到植物細胞中染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。它是將目的基因?qū)胫参锛毎捎米疃嗟姆椒ā７派湫詷擞浀腡-DNA片段做探針的目的是檢測受體細胞的DNA中有無目的基因。均顯示一條雜交帶，說明在這一突變體中，T-DNA插入位置是唯一的?！驹斀狻緼、圖示結(jié)果突變體中出現(xiàn)放射性，說明使用了放射性標記的T-DNA片段做探針對目的基因進行檢測，A正確；B、該突變體產(chǎn)生的根本原因是T-DNA攜帶目的基因插入到水稻的DNA中，B正確；C、不同酶切雜交帶位置不同，說明不同酶切后帶有T-DNA的片段長度不同（即：不同的酶切位點距離T-DNA的遠近不同），C錯誤；D、由圖所示放射性檢測結(jié)果可知，野生型無放射性雜交條帶，若野生型也出現(xiàn)雜交帶，則實驗樣本可能被污染，檢測結(jié)果不準確，D正確。故選C?！军c睛】本題通過放射性同位素標記方法檢測目的基因的方法，考查對基礎(chǔ)知識的運用，以及對實驗結(jié)果的分析和判斷能力。4、A【解析】

從致畸角度出發(fā)，可以把胎兒的生長發(fā)育分為3個階段：受精至著床前后17天；早孕期（孕18天至55天）；孕56天至分娩。畸形常在第二階段形成，如在此時期孕婦照例吃藥、受放射性照射等，致畸的潛在危險較大。【詳解】A、單基因遺傳病由染色體上單個基因的異常引起的，A正確；B、羊膜腔穿刺用于確診胎兒是否患染色體異常、神經(jīng)管缺陷以及某些能在羊水中反映出來的遺傳性代謝疾病，不能治療胎兒出現(xiàn)的神經(jīng)管缺陷，B錯誤；C、畸形胎通常在早孕期形成，C錯誤；D、個體的發(fā)育和性狀表現(xiàn)偏離正常也有可能是染色體異常導致的，D錯誤。故選A。5、D【解析】所有的細胞都有mRNA和tRNA，與細胞分化無關(guān)，A項錯誤；所有細胞都有DNA，DNA復制時需要DNA聚合酶，與細胞分化無關(guān)，B項錯誤；只有紅細胞中含有血紅蛋白，能體現(xiàn)細胞分化，但磷脂是構(gòu)成生物膜的重要成分，所有細胞都有生物膜，與細胞分化無關(guān)，C項錯誤；只有胰島B細胞能合成并分泌胰島素，只有漿細胞能合成并分泌抗體，能體現(xiàn)細胞分化，能體現(xiàn)細胞分化，D項正確。【點睛】本題考查細胞分化的相關(guān)知識。解題的突破口是細胞分化的實質(zhì)，即基因的選擇性表達，也就是在不同功能的細胞內(nèi)表達的基因不同，合成的蛋白質(zhì)不同。據(jù)此答題。6、C【解析】

體液免疫過程為：（1）感應(yīng)階段：除少數(shù)抗原可以直接刺激B細胞外，大多數(shù)抗原被吞噬細胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇；吞噬細胞將抗原呈遞給T細胞，再由T細胞呈遞給B細胞；（2）反應(yīng)階段：B細胞接受抗原刺激后，開始進行一系列的增殖、分化，形成記憶細胞和漿細胞；（3）效應(yīng)階段：漿細胞分泌抗體與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合，發(fā)揮免疫效應(yīng)。細胞免疫過程為：（1）感應(yīng)階段：吞噬細胞攝取和處理抗原，并暴露出其抗原決定簇，然后將抗原呈遞給T細胞；（2）反應(yīng)階段：T細胞接受抗原刺激后增殖、分化形成記憶細胞和效應(yīng)T細胞，同時T細胞能合成并分泌淋巴因子，增強免疫功能；（3）效應(yīng)階段：效應(yīng)T細胞發(fā)揮效應(yīng)?！驹斀狻緼、根據(jù)抗原和抗體特異性結(jié)合原理，用人工標記的抗體可對組織內(nèi)的抗原進行檢測，A正確；B、T細胞在特異性免疫中發(fā)揮重要作用，抑制T細胞增殖可降低異體器官移植的免疫排斥反應(yīng)，B正確；C、動物血清中含有相應(yīng)的抗體，因此注射動物血清是為了中和相應(yīng)的抗原，C錯誤；D、對青霉素過敏的人而言，青霉素是一種過敏原，進入人體后，引起人體產(chǎn)生過敏反應(yīng)，所以注射青霉素前一定要進行皮試，D正確。故選C。二、綜合題：本大題共4小題7、樣方法競爭茶樹和雜草減輕茶樹與雜草間的競爭無機鹽（或無機鹽、CO2）直接一年生草本植物與灌木在爭奪陽光和空間等的競爭中被淘汰【解析】

生態(tài)多樣性的價值分為：1、直接價值：生態(tài)系統(tǒng)中的物質(zhì)對人類食用、藥用和工業(yè)原料等有實用意義；對旅游觀賞、科學研究和文學藝術(shù)創(chuàng)作等有非實用意義的價值。2、間接價值：生態(tài)系統(tǒng)對自然環(huán)境起到重要調(diào)節(jié)作用的價值，如森林和草地對水土的保持作用、濕地蓄洪防旱、涵養(yǎng)水源、調(diào)節(jié)氣候、提供氧氣吸收二氧化碳、保護生物多樣性等等作用。3、潛在價值：人類所認識和利用的是生物的一小部分，大量的野生生物的價值目前還不清楚，它們具有巨大的潛在價值?！驹斀狻浚?）茶毛蟲幼蟲活動能力弱，活動范圍小，可用樣方法進行種群密度調(diào)查。茶毛蟲與茶小綠葉蟬都以茶樹為食，種間關(guān)系為競爭。（2）生產(chǎn)者是生態(tài)系統(tǒng)的基石，茶廠生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)者為茶樹和雜草。人工除草的目的是減輕茶樹與雜草間的競爭，使能量流向?qū)θ祟愑幸娴牟铇?。物質(zhì)循環(huán)的角度分析，草稈內(nèi)的有機物被分解者分解成無機物，回到無機環(huán)境被茶樹利用。（3）由分析可知，茶場及周邊優(yōu)美的生態(tài)環(huán)境吸引了游人前來觀光、休閑，體現(xiàn)了生物多樣性的直接價值。灌木比一年草本更高大，在爭奪陽光和空間中處于優(yōu)勢，一年生草本在競爭中逐漸被淘汰?！军c睛】本題通過茶廠生態(tài)系統(tǒng)考查了種群密度的調(diào)查方法、物質(zhì)的循環(huán)途徑和群落的演替等知識，要求能靈活掌握基礎(chǔ)知識，學會構(gòu)建知識網(wǎng)絡(luò)。8、D神經(jīng)遞質(zhì)（去甲腎上腺素）促甲狀腺激素釋放激素線粒體內(nèi)膜甲狀腺激素和cAMP熱能神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液脂肪氧化分解增加ATP合成減少【解析】

據(jù)圖分析，甲狀腺激素的調(diào)節(jié)過程：下丘腦釋放①促甲狀腺激素釋放激素，作用于垂體，垂體分泌②促甲狀腺激素作用于甲狀腺，甲狀腺分泌甲狀腺激素；從圖中可看出，cAMP的直接作用兩方面，促進脂肪的分解和促進UCP-1基因的表達；因此布氏田鼠通過神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)褐色脂肪組織細胞（BAT細胞）產(chǎn)熱過程?！驹斀狻浚?）根據(jù)圖示信息可知，在持續(xù)寒冷刺激的條件下，BAT細胞中的脂肪酸主要去路是在線粒體基質(zhì)中參與有氧呼吸第2階段，D正確。（2）根據(jù)圖示信息可知，寒冷刺激一方面使下丘腦部分傳出神經(jīng)未梢釋放神經(jīng)遞質(zhì)-去甲腎上腺素，直接調(diào)節(jié)脂肪細胞代謝，促進脂肪分解。另一方面寒冷刺激還能使下丘腦合成并釋放促甲狀腺激素釋放激素的量增加，最終導致體內(nèi)甲狀腺激素的量增加。（3）有氧呼吸過程中大量ATP是在有氧呼吸第三階段形成的，該過程發(fā)生于線粒體內(nèi)膜。據(jù)圖可知，在BAT細胞中，甲狀腺激素和cAMP能促進UCP-1基因表達，而UCP-1蛋白能增大該結(jié)構(gòu)對H+的通透性，消除H+梯度，無法合成ATP，導致有氧呼吸最后階段釋放出來的能量全部轉(zhuǎn)化為熱能。（4）據(jù)圖可知，在持續(xù)寒冷的環(huán)境中，布氏田鼠通過神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)，最終引起B(yǎng)AT細胞中脂肪氧化分解增加和ATP合成減少，實現(xiàn)產(chǎn)熱增加，維持體溫的穩(wěn)定?！军c睛】本題考查神經(jīng)調(diào)節(jié)、體液調(diào)節(jié)，考查學生對神經(jīng)調(diào)節(jié)、體液調(diào)節(jié)機理的理解，解答本題的關(guān)鍵是能正確分析圖示信息，理解BAT細胞產(chǎn)熱的調(diào)節(jié)過程。9、30~300無菌瓊脂高壓蒸汽滅菌上次劃線的末端倒置甘油管藏-20℃【解析】

微生物的實驗室培養(yǎng)常用到培養(yǎng)基，培養(yǎng)基按物理狀態(tài)分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基通常需要加入瓊脂凝固。培養(yǎng)基需要滅菌后才能用來培養(yǎng)細菌。單菌落分離法包含劃線分離法和涂布分離法，常用于分離獲得單菌落。微生物的研究通常包含微生物的獲得、分離純化、培養(yǎng)以及保存等?！驹斀狻浚?）通過統(tǒng)計菌落數(shù)來計算細菌的數(shù)量，在接種時以保證獲得菌落數(shù)在30~300之間的平板，才不會出現(xiàn)細菌數(shù)太少或生長時疊加的情況。稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁操作，目的是確保無菌。（2）固體培養(yǎng)基配制時應(yīng)加入瓊脂，并用高壓蒸汽滅菌后備用。（3）劃線分離應(yīng)從上次劃線的末端開始劃，由于劃線過程中接種環(huán)上的菌液逐漸減少，最后可能得到單菌落。培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)可以防止水滴掉入沖散單菌落。（4）甘油具有吸濕、保水的性質(zhì)，常用來長期保存菌種，通常菌種可以放在-20℃的冰箱中保存?！军c睛】微生物的培養(yǎng)與分離是微生物研究中重要的內(nèi)容，微生物的無菌操作是常見的考點，在學習時應(yīng)注意操作的細節(jié)并理解相應(yīng)的原理。10、人工合成DNA（雙鏈）復制限制DNA連接標記基因T-DNA顯微注射技術(shù)【解析】

1、基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運載體：常用的運載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒2、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）熒光素酶基因?qū)儆谀康幕?。目的基因可以從基因文庫中獲取，也可以通過人工合成方法得到，再利用PCR技術(shù)擴增即可。利用PCR技術(shù)擴增目的基因的原理是DNA雙鏈復制。（2）構(gòu)建基因表達載體時，需要用限制酶分別切割目的基因和載體，然后用DNA連接酶進行連接，基因表達載體要有標記基因，以便篩選出含有目的基因的受體細胞。（3）將目的基因?qū)胫参锛毎?，目前常用的目的基因載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒，目的基因需插入到該基因載體的T-DNA上，然后再轉(zhuǎn)移至受體細胞中。將目的基因?qū)雱游锛毎募夹g(shù)中，應(yīng)用最多的是顯微注射技術(shù)?！军c睛】本題結(jié)合基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識記基因工程的原理、操作工具、操作步驟及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合