臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)六 金免疫測(cè)定技術(shù)

實(shí)驗(yàn)六金免疫測(cè)定技術(shù)

概述金免疫測(cè)定技術(shù)：以膠體金顆粒作為示蹤物，屬于固相膜免疫分析技術(shù)膠體金：金鹽（HAuCl4）被還原成金原子后形成的金顆粒懸液，因呈穩(wěn)定的膠體狀態(tài)。膠體金顆粒聚集后呈現(xiàn)紅色。免疫金：膠體金顆粒與蛋白質(zhì)通過(guò)靜電引力結(jié)合形成的復(fù)合物。方法類型：斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)

斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)本次實(shí)驗(yàn)以測(cè)定尿中人絨毛膜促性腺激素（HCG）為例，來(lái)驗(yàn)證斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)和斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)的基本原理，并通過(guò)實(shí)驗(yàn)熟悉其操作過(guò)程及臨床應(yīng)用實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊弧唿c(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理膠體金顆粒聚集后呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)材料試劑：滲濾裝置、免疫金、洗滌液器材：一次性滴管標(biāo)本：尿液實(shí)驗(yàn)步驟（1）將滲濾裝置平放于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，于加樣孔內(nèi)滴加尿液5滴，待完全滲入。（2）于加樣孔內(nèi)滴加免疫金試劑3滴，待完全滲入。（3）于加樣孔內(nèi)滴加洗滌液2～3滴，待完全滲入。（4）15min內(nèi)觀察結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果在微孔膜中央出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)者判為陽(yáng)性反應(yīng)，說(shuō)明標(biāo)本HCG陽(yáng)性；反之則為陰性反應(yīng)，說(shuō)明標(biāo)本HCG陰性。斑點(diǎn)呈色的深淺相應(yīng)地提示陽(yáng)性強(qiáng)度。注意事項(xiàng)注意試劑的保存及使用溫度注意加入的尿量和免疫金量盡量采集晨尿進(jìn)行檢測(cè)二、斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)陰性陽(yáng)性實(shí)驗(yàn)原理層析條實(shí)驗(yàn)材料試劑：層析條標(biāo)本：尿液實(shí)驗(yàn)步驟（1）將層析條的加樣端浸入尿液中2~5秒，并平放于桌面上。（2）15min內(nèi)觀察結(jié)果。

陽(yáng)性陰性無(wú)效實(shí)驗(yàn)結(jié)果TC注意事項(xiàng)打開層析條包裝后應(yīng)在1h內(nèi)應(yīng)用將層析條插入樣品中，樣品的液面不能超過(guò)試劑條的標(biāo)記線盡量采集晨尿進(jìn)行檢測(cè)注意在規(guī)定時(shí)間內(nèi)觀察反應(yīng)結(jié)果臨床應(yīng)用金免疫測(cè)定技術(shù)屬于固相膜免疫測(cè)定技術(shù)，具有操作簡(jiǎn)便、快速以及操作人員不需技術(shù)培訓(xùn)，無(wú)需特殊儀器設(shè)備，試劑穩(wěn)定、便于保存等特點(diǎn)，因此特別符合POCT項(xiàng)目的要求。只能作為定性試驗(yàn)，主要用于正常體液中不存在的物質(zhì)（如傳染病抗原和抗體等）和正常含量極低而在特殊情況下異常升高的物質(zhì)（如HCG