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文檔簡介
2025屆舟山市重點中學高三(最后沖刺)生物試卷注意事項1.考生要認真填寫考場號和座位序號。2.試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上,在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答;第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3.考試結束后,考生須將試卷和答題卡放在桌面上,待監(jiān)考員收回。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.在一個果蠅種群中偶然發(fā)現一只突變型的雌果蠅,用該雌果蠅與一只野生型雄果蠅交配,F1中野生型與突變型之比為2∶1,雌雄個體之比也為2∶1。從遺傳學角度分析,下列解釋合理的是()A.該突變基因為常染色體顯性基因 B.該突變基因為X染色體隱性基因C.該突變基因使得雄性個體致死 D.該突變基因使得雌配子致死2.如圖所示為將小白鼠細胞和人體細胞融合的過程,圖中的小球和小三角表示各自膜表面的蛋白質,下列有關敘述不正確的是()A.圖中膜表面的蛋白質構成了細胞膜的基本支架,此外,細胞膜的主要成分還包括磷脂雙分子層B.細胞膜的元素組成包括C、H、O、N、PC.該實驗證明了細胞膜具有一定的流動性D.適當提高溫度有利于圖示細胞融合3.如圖曲線①、②表示完全相同的兩個植物細胞分別放置在A、B溶液中,細胞失水量的變化情況。相關敘述正確的是()A.兩曲線均表示隨著時間推移植物細胞失水增多,且A溶液中的植物細胞失水更快B.若B溶液的濃度稍增大,則曲線中b點左移C.兩條曲線的差異主要是由于A、B溶液濃度不同造成的D.5min時取出兩個細胞用顯微鏡觀察,僅根據細胞狀態(tài)無法判斷細胞是失水還是吸水4.下列有關細胞的敘述,錯誤的是()A.藍藻細胞的DNA分子為環(huán)狀,復制時以一條鏈為模板B.吞噬細胞的溶酶體中含多種水解酶,有非特異性免疫作用C.洋蔥鱗片葉表皮細胞的細胞液滲透壓低于外界溶液時,會滲透失水D.人體成骨細胞每分裂一次,染色體的端粒DNA序列會縮短一截5.跳蝻腹節(jié)綠條紋對黃條紋為顯性,由基因A、a控制。生物興趣小組的同學調查了某沙化草原不同區(qū)域的跳蝻腹節(jié)表現型,并計算了A基因頻率,結果如下表。下列分析正確的是()沙化草地M區(qū)綠草地L區(qū)沙化草地N區(qū)綠條紋頻率1.361.911.46A基因頻率1.21.71.4A.跳蝻A基因頻率低是導致M區(qū)草地比N區(qū)草地沙化嚴重的原因B.草地沙化及天敵捕食等環(huán)境因素是跳蝻腹節(jié)顏色進化的外因C.M區(qū)與N區(qū)存在的地理隔離將導致兩個地區(qū)的跳蝻進化為不同的物種D.三個調查區(qū)的雜合綠條紋跳蝻所占比例的大小關系是L>N>M6.研究人員在家蠶中發(fā)現一種新的體態(tài)類型——短體蠶,用這種家蠶與正常體形家蠶進行雜交實驗,結果如下表所示。下列敘述正確的是雜交組合F1短體蠶正常蠶實驗一:短體蠶×正常蠶788810實驗二:短體蠶×短體蠶1530790A.可以通過連續(xù)自交多代的方式獲得純種短體蠶B.短體蠶自交后代出現正常蠶是基因突變的結果C.實驗一中F1個體隨機交配,F2中短體蠶:正常蠶=2:3D.實驗二中F1個體隨機交配,F2中正常蠶占4/9二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯是一種對靶向基因進行特定DNA修飾的技術,其原理是由一個向導RNA(sgRNA)分子引導Cas9蛋白到一個特定的基因位點進行切割。受此機制啟發(fā),科學家們通過設計sgRNA中堿基的識別序列,即可人為選擇DNA上的任一目標位點進行切割(見下圖)。(1)從CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖看,能夠行使特異性識別DNA序列并切割特定位點功能的分子是___________,其類似于基因工程中__________的作用。(2)CCR5基因是人體的正?;颍渚幋a的細胞膜通道蛋白CCR5是HIV入侵T淋巴細胞的主要輔助受體之一??蒲腥藛T依據_____________的部分序列設計sgRNA序列,導入骨髓_________細胞中,構建sgRNA-Cas9復合體,以實現對CCR5基因的定向切割,變異的CCR5蛋白無法裝配到細胞膜上,即可有效阻止HIV侵染新分化生成的T淋巴細胞。試分析與上述過程最接近的現代生物科技是________________。(3)CRISRP/Cas9基因編輯技術有時存在編輯對象出錯而造成脫靶,實驗發(fā)現sgRNA的序列越短脫靶率越高。試分析脫靶最可能的原因是____________________________。(4)通過上述介紹,CRISPR/Cas9系統(tǒng)的基因編輯技術在______________等方面有廣闊的應用前景。(至少答出兩點)8.(10分)利用基因編輯技術將病毒外殼蛋白基因導入豬細胞中,然后通過核移植技術培育基因編輯豬,可用于生產基因工程疫苗。下圖為基因編輯豬培育流程,請回答下列問題:(1)對1號豬使用_________處理,使其超數排卵,收集并選取處在__________時期的卵母細胞用于核移植。(2)采集2號豬的組織塊,用__________處理獲得分散的成纖維細胞,放置于37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),其中CO2的作用是________。(3)為獲得更多基因編輯豬,可在胚胎移植前對胚胎進行__________。產出的基因編輯豬的性染色體來自于_________號豬。(4)為檢測病毒外殼蛋白基因是否被導入4號豬并正常表達,可采用的方法有__________(填序號)。①DNA測序②染色體倍性分析③體細胞結構分析④抗原—抗體雜交9.(10分)航天員是探索宇宙奧秘的英雄,進駐太空后機體會產生多種失重效應:(1)航天器和航天服中的生命保障系統(tǒng),為航天員提供了類似于地面的環(huán)境,有利于航天員維持機體內環(huán)境的穩(wěn)定。內環(huán)境穩(wěn)態(tài)的實質是_____________和理化性質保持相對穩(wěn)定。(2)失重環(huán)境中航天員頭部體液增多,抗利尿激素的合成和分泌受到_______(填“促進”或“抑制”),出現體液轉移反射性多尿現象。(3)經專業(yè)訓練的航天員可通過位于________的神經中樞調節(jié),增強身體的平衡能力,減輕體位翻轉癥狀。(4)當航天員血糖含量降低時,胰高血糖素分泌量增加,促進血糖升高,此時血糖的來源為_____________________和_______________________。(5)失重會引起T淋巴細胞減少,導致由它增殖分化產生的_______________________減少;同時,由于淋巴因子的產生減少,導致漿細胞分泌的____________也減少,人體免疫力下降。10.(10分)納豆和腐乳都是豆類發(fā)酵品,用納豆桿菌發(fā)酵大豆制作納豆的流程原理與腐乳的制作相似。納豆桿菌能分泌納豆激酶等?;卮鹣铝袉栴}(1)納豆制作的原理是___________________________。(2)納豆激酶能夠水解血栓中水不溶性的纖維蛋白,所以具有溶解血栓的作用。納豆桿菌的篩選和分離常用到由磷酸鹽緩沖液、纖維蛋白和瓊脂配制而成的乳白色的纖維蛋白培養(yǎng)基。從培養(yǎng)基營養(yǎng)組成的角度來看,其中的纖維蛋白的作用是__________________________。若培養(yǎng)基上出現_________________________,說明含有納豆桿菌。(3)提純納豆激酶可用于制備藥物。為提取純化納豆激酶,可進行下列實驗:①接種具有高纖溶活性的菌落到液體發(fā)酵培養(yǎng)基。37℃,搖床振蕩,發(fā)酵3天。②收集發(fā)酵液,離心,分層,取_____________作為提取納豆激酶的材料。③透析法分離:將上述離心所得樣品裝人透析袋,置于25mmo/L磷酸鹽緩沖液中透析,以便達到__________________________的目的。④凝膠色譜純化:將透析液進行柱層析,用____________進行洗脫,試管連續(xù)收集。⑤為了確認試管收集液中是否含有納豆激酶,還要__________________________。11.(15分)水稻是我國最重要的糧食作物。水稻育種一方面要利用基因組育種技術和基因編輯技術,加快水稻功能基因組研究成果向育種應用的轉化,另一方面要重視發(fā)掘新的重要基因,為設計育種提供“元件”。我國水稻遺傳育種經歷的3次大飛躍,離不開矮稈基因、核不育基因、抗蟲基因等許多重要基因資源的發(fā)掘和利用。請回答下列問題:(1)科研人員在自交系A水稻田中發(fā)現一株矮化的突變體,通過自交保種發(fā)現,后代均表現為矮稈,說明此矮稈突變體為_____。將此矮稈突變體分別在我國多個地區(qū)進行種植,發(fā)現株高、產量表現穩(wěn)定。根據矮稈突變體的性狀表現,科研人員認為矮稈突變體具有較高的應用價值,理由是_____(至少寫出兩點)。(2)為研究水稻核基因B的功能,科研人員將T-DNA插入B基因中,致使該基因失活,失活后的基因記為b。以野生植株和突變植株作為親本進行雜交實驗,統(tǒng)計母本植株的結實率,結果如下表所示。雜交編號親本組合結實數/授粉的小花數結實率①♀BB×♂bb16/16110%②♀bb×♂BB78/15650%③♀BB×♂BB70/14150%表中數據表明,B基因失活使_____配子育性降低。若用雜交①的F1(作父本)給雜交②的F1(作母本)授粉,預期母本植株的結實率為_____,所獲得的F2植株的基因型及比例為_____(3)科研人員將蘇云金芽胞桿菌的Bt毒蛋白基因導入水稻細胞獲得抗蟲水稻,并篩選出細胞核中含有兩個抗蟲基因的個體。請用篩選出的轉基因水稻設計一個雜交實驗,進一步確定細胞核中兩個抗蟲基因的相對位置___________。(簡要寫出實驗方法,并預測實驗結果及結論)
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、C【解析】
分析題意可知,后代雌雄個體之比為2:1,說明雄性有一半死亡,與性別相關聯(lián),所以突變基因在X染色體上,并且可能含有該突變基因的雄性個體致死。因此此處只需再判斷是顯性突變還是隱性突變即可。【詳解】A、根據上述分析可知,該突變基因在X染色體上,A錯誤;B、若該突變基因為X染色體隱性基因,則突變雌蠅的基因型為XaXa,野生型雄性的基因型為XAY,子一代基因型為XAXa、XaY,即F1中野生型與突變型之比應為1∶1,雌雄個體之比也為1∶1,與題意不符,B錯誤;C、若該突變基因為顯性基因,且該突變基因純合子致死,則突變雌蠅的基因型為XAXa,野生型雄性的基因型為XaY,子一代基因型為XAXa、XaXa、XAY(致死)、XaY,即F1中野生型與突變型之比應為2∶1,雌雄個體之比也為2∶1,符合題意,C正確;D、由于雌配子與雄配子結合形成雄性和雌性的概率相同,若該突變基因使得雌配子致死,則后代性別比例不受影響,D錯誤。故選C。2、A【解析】
細胞膜主要由脂質和蛋白質組成,其中的脂質以磷脂為主,磷脂雙分子層構成細胞膜的基本支架。細胞膜的結構特點是具有一定的流動性(膜的結構成分不是靜止的,而是動態(tài)的);細胞膜的功能特點是具有選擇透過性?!驹斀狻緼、細胞膜的基本支架是磷脂雙分子層,A錯誤;B、組成細胞膜的成分中有蛋白質和磷脂,它們的組成元素主要有C、H、O、N、P,B正確;C、兩種膜的融合證明了細胞膜具有一定的流動性,C正確;D、適當提高溫度就會加速磷脂和蛋白質分子的流動性,D正確。故選A。3、D【解析】
1.據圖分析,A細胞失水量增加,細胞發(fā)生質壁分離;B細胞先失水量增加后減少,說明細胞先發(fā)生質壁分離后自動復原。
2.質壁分離和復原實驗中,要選擇活的成熟的植物細胞,即含有大液泡的植物細胞;若外界溶液的濃度增大,導致濃度差變大,所以單位時間內,失水程度大,復原所需要的時間相對較長?!驹斀狻緼、②曲線顯示,在b點后B溶液中的植物細胞開始吸水,A錯誤;B、b點后B溶液中的植物細胞開始吸水,是因為其細胞液濃度大于B溶液濃度,若B溶液濃度增大,要使其中植物細胞的細胞液濃度大于B溶液濃度所需時間廷長,即b點右移,B錯誤;C、①顯示A溶液中的植物細胞失水10nin后達到相對穩(wěn)定狀態(tài),②顯示B溶液中的植物細胞失水l0min后反過來吸水,說明B溶液中的溶質分子進入了液泡,使細胞液濃度增大,所以,兩條曲線的差異主要是由于A、B溶液溶質分子不同造成的,C錯誤;D、5min時取岀兩個細胞用顯微鏡觀察,都處于質壁分離狀態(tài),該铏胞可能是處于大于細胞液濃度的外界溶液濃度中,繼續(xù)失水,也可能是處于小于細胞液濃度的外界溶液濃度中,細胞吸水,正在發(fā)生質壁分離復原,D正確。故選D?!军c睛】本題主要考查質壁分離和復原實驗,要選擇含有大液泡的植物細胞;在一定范圍內,外界溶液與細胞液的濃度差越大,失水程度越高,但能否發(fā)生質壁分離復原,則取決于質壁分離后的細胞的生活狀態(tài),即活細胞還是死細胞。4、A【解析】
細胞是生物體結構和功能的基本單位,真核細胞和原核細胞的主要區(qū)別是有無成形的細胞核,真核細胞和原核細胞共有的細胞器為核糖體,真核生物包括植物、動物和微生物。端粒是存在于真核細胞線狀染色體末端的一小段DNA-蛋白質復合體,它與端粒結合蛋白一起構成了特殊的“帽子”結構,作用是保持染色體的完整性和控制細胞分裂周期。端粒、著絲粒和復制原點是染色體保持完整和穩(wěn)定的三大要素。端粒其長度反映細胞復制史及復制潛能,被稱作細胞壽命的“有絲分裂鐘”。細胞分裂次數越多,其端粒磨損越多,細胞壽命越短。【詳解】A、藍藻細胞的DNA分子為環(huán)狀,復制時以兩條鏈為模板,A錯誤;B、吞噬細胞的溶酶體中含多種水解酶,可吞噬細菌和病毒,有非特異性免疫作用,B正確;C、洋蔥鱗片葉表皮細胞的細胞液滲透壓(濃度)低于外界溶液時,會滲透失水,C正確;D、人體成骨細胞每分裂一次,染色體的端粒DNA序列會縮短一截,D正確。故選A。5、B【解析】
遺傳平衡定律:在數量足夠多的隨機交配的群體中,沒有基因突變、沒有遷入和遷出、沒有自然選擇的前提下,種群是基因頻率逐代不變,則基因型頻率將保持平衡:p2表示AA的基因型的頻率,2pq表示Aa基因型的頻率q2表示aa基因型的頻率。其中p是A基因的頻率;q是a基因的頻率?;蛐皖l率之和應等于1,即p2+2pq+q2=1【詳解】A、跳蝻A基因頻率低是N區(qū)和M區(qū)草地沙化對A基因控制的性狀進行選擇的結果,A錯誤;B、草地沙化及天敵捕食等環(huán)境因素對跳蝻的黃條紋性狀進行了定向選擇,是跳蝻腹節(jié)顏色進化的外因,B正確;C、M區(qū)與N區(qū)是某沙化草原不同地區(qū),兩地區(qū)的地理隔離不會導致兩個地區(qū)的跳蝻進化為不同的物種,C錯誤;D、根據遺傳平衡定律計算,三個調查區(qū)的雜合綠條紋跳蝻所占比例依次為1.32、1.42、1.48,因此三地區(qū)的大小關系是N>L>M,D錯誤。故選B?!军c睛】熟知現代生物進化理論的基本內容并能用進化理論解答有關物種形成的問題是解答本題的關鍵!6、C【解析】
A.由雜交組合二數據分析可知,體形為短體的是顯性性狀,且顯性純合致死,正常體形為隱性性狀,A錯誤;B.短體蠶自交后代出現正常蠶是等位基因分離所致,B錯誤;C.實驗一中F1的短體蠶基因型為Aa,正常蠶基因型為aa,故F1產生的配子中1/4A、3/4a,F1個體隨機交配,由于顯性純合致死,后代中短體蠶:正常蠶=2:3,C正確;D.實驗二中F1短體蠶基因型全為Aa,正常體形蠶基因型為aa,故F1產生的配子中1/3A、2/3a,F1個體隨機交配,由于顯性純合致死,后代中短體蠶Aa:正常蠶aa=1:1,D錯誤;故選C。二、綜合題:本大題共4小題7、向導RNA(sgRNA)分子和Cas9蛋白限制酶CCR5基因造血干蛋白質工程其他DNA序列也含有與向導RNA(sgRNA)互補配對的序列,造成向導RNA(sgRNA)錯誤結合而脫靶基因治療、動植物育種(基因水平)、研究基因功能【解析】
根據題意分析可知,CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術是利用該基因表達系統(tǒng)中的引導RNA能識別并結合特定的DNA序列,從而引導Cas9蛋白結合到相應位置并剪切DNA,最終實現對靶基因序列的編輯。由于其他DNA序列也含有與引導RNA互補配對的序列,造成引導RNA錯誤結合而出現脫靶現象?!驹斀狻浚?)由題干信息“向導RNA能識別并結合特定的DNA序列,從而引導Cas9蛋白結合到相應位置并剪切DNA”,說明能夠行使特異性識別DNA序列并切割特定位點功能的分子是向導RNA(sgRNA)分子和Cas9蛋白,功能類似于基因工程中限制酶的作用。(2)根據題意,可利用Cas9酶對CCR5基因進行編輯,因此sgRNA序列需要與CCR5基因上部分堿基互補配對,從而精準定位到CCR5基因進行編輯,故設計SgRNA序列時需要根據CCR5基因的核苷酸序列,導入骨髓造血干細胞中,構建sgRNA-Cas9復合體,以實現對CCR5基因的定向切割。CRISPR/Cas9基因編輯技術是一種精準改變目標DNA序列的技術,與其比較接近的是蛋白質工程。(3)CRISRP/Cas9基因編輯技術有時存在編輯對象出錯而造成“脫靶”,其原因是其它DNA序列也含有與向導RNA互補的序列,造成向導RNA錯誤結合而出現脫靶現象。(4)通過上述介紹,基于CRISPR/Cas9系統(tǒng)的基因編輯技術在基因治療、基因水平進行動植物的育種、研究基因的功能等等方面有廣闊的應用前景。【點睛】本題考查了基因工程的有關知識,要求考生能夠掌握基因工程的操作步驟,識記基因工程的操作工具,能夠結合圖示以及所學知識準確答題。8、促性腺激素減數第二次分裂中期胰蛋白酶(膠原蛋白酶)維持培養(yǎng)液的pH分割2①④【解析】
據圖分析,圖示基因編輯豬培育過程涉及的技術手段有轉基因技術、核移植技術、早期胚胎培養(yǎng)技術和胚胎移植技術等,利用轉基因技術將病毒外殼蛋白基因(目的基因)導入2號豬的體細胞核中,然后將2號豬的體細胞核移植到1號豬的去核卵母細胞中,再將重組細胞培養(yǎng)到囊胚并移植到3號豬的子宮中去,最后分娩產生了4號轉基因克隆豬?!驹斀狻浚?)據圖分析可知,1號豬提供的是卵母細胞,對其注射促性腺激素可使其超數排卵,獲得的卵母細胞需要培養(yǎng)到減數第二次分裂中期才能進行核移植。(2)將2號豬的組織塊分散成單個的成纖維細胞需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,該細胞的培養(yǎng)應在37℃含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行,其中CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。(3)利用胚胎分割技術對圖示早期胚胎進行分割,可以獲得更多的基因編輯豬;據圖分析可知,核移植的細胞核來自于2號豬,因此產出的基因編輯豬的性染色體來自于2號豬。(4)檢測病毒外殼蛋白基因(目的基因)是否導入4號豬,可以采用DNA分子雜交法檢測目的基因的序列;目的基因表達的最終產物是蛋白質(病毒外殼蛋白),可以利用抗原-抗體雜交法進行檢測,故選①④?!军c睛】解答本題的關鍵是掌握轉基因技術、動物細胞培養(yǎng)、胚胎移植等過程,能夠弄清楚題圖中不同的豬提供的結構和作用,明確核移植時的卵母細胞需要培養(yǎng)到減數第二次分裂中期,并能夠選擇正確的方法檢測目的基因是否表達。9、組成(化學)成分抑制小腦肝糖原分解非糖物質轉化效應T細胞和記憶細胞抗體【解析】
內環(huán)境穩(wěn)態(tài)是指內環(huán)境的成分和理化性質保持相對穩(wěn)定狀態(tài),是機體進行正常生命活動的必要條件;下丘腦是水平衡調節(jié)中樞,滲透壓下降會抑制下丘腦合成、垂體分泌抗利尿激素;小腦的主要功能是維持身體平衡;當血糖含量升高時,胰島B細胞可分泌胰島素促進細胞對血糖的攝取、氧化分解、合成和轉化,抑制肝糖原分解和非糖物質轉化,當血糖含量降低時,胰島A細胞可分泌胰高血糖素,作用于肝臟,主要促進肝糖原分解和非糖物質轉化,從而使血糖升高?!驹斀狻浚?)內環(huán)境穩(wěn)態(tài)的實質是內環(huán)境的組成成分和理化性質保持相對穩(wěn)定。(2)失重環(huán)境中航天員頭部體液增多,使機體的內環(huán)境滲透壓下降,抗利尿激素的合成和分泌受到抑制。(3)小腦具有維持平衡、協(xié)調運動的功能,因此航天員可通過位于小腦的神經中樞調節(jié),增強身體的平衡能力,減輕體位翻轉癥狀。(4)當血糖含量降低時,胰島A細胞可分泌胰高血糖素,作用于肝臟細胞,促進肝糖原分解以及非糖物質轉化。(5)T淋巴細胞會增殖分化產生的效應T細胞和記憶細胞;抗體由漿細胞產生。【點睛】本題以航天員失重及專業(yè)訓練為背景,考查人體免疫系統(tǒng)在維持穩(wěn)態(tài)中的作用、水平衡調節(jié)、神經調節(jié)的相關內容,需要學生把握知識的內在聯(lián)系并應用相關知識,結合題干信息對生物學問題進行解釋。10、納豆桿菌等微生物分泌的蛋白酶能將豆類中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸充當碳源和氮源,提供能源物質(較大)溶解圈上清液去除/置換樣品中分子量較小的雜質(25mmol/L)磷酸(鹽)緩沖液添加適量收集液到纖維蛋白培養(yǎng)基上(或添加適量收集液到含有血栓的溶液里)【解析】
1、腐乳的制作原理:以豆腐為原料利用毛霉等微生物分泌出各種酶,促使豆腐坯中的蛋白質分解成營養(yǎng)價值高的氨基酸和一些風味物質。有些氨基酸本身就有一定的鮮味,腐乳在發(fā)酵過程中也促使豆腐坯中的淀粉轉化成酒精和有機酸,同時還有輔料中的酒及香料也參與作用,共同生成了帶有香味的酯類及其他一些風味成分,從而構成了腐乳所特有的風味。腐乳在制作過程中發(fā)酵,蛋白酶和附著在菌皮上的細菌慢慢地滲入到豆腐坯的內部,逐漸將蛋白質分解,大約經過三個月至半年的時間,松酥細膩的腐乳就做好了,滋味也變得質地細膩、鮮美適口。2、培養(yǎng)基的成分包括:碳源、氮源、無機鹽和水,有的需要生長因子等。碳源分為無機碳源和有機碳源,無機碳源如二氧化碳,有機碳源如葡萄糖,碳源是構成生物體細胞的物質和一些代謝產物,有些是異養(yǎng)生物的能源物質;氮源分為無機氮源(銨鹽、硝酸鹽等)和有機氮源(尿素、牛肉膏等),合成蛋白質、核酸以及含氮的代謝產物。3、血紅蛋白的提取和分離:(1)樣品處理:洗滌,用生理鹽水洗滌,低速離心,直至上清液中沒有黃色;(2)血紅蛋白釋放:加入蒸餾水和甲苯,細胞破碎釋放血紅蛋白;(3)分離:低速離心,分成4層,第三層紅色透明液體為血紅蛋白水溶液層,分出該層;(4)透析:放入透析袋,出去分子量較小的雜質;(5)過凝膠色譜柱收集純蛋白。【詳解】(1)根據題意可知,用納豆桿菌發(fā)酵大豆制作納豆的流程原理與腐乳的制作相似,因此納豆制作的原理是:利用納豆桿菌等微生物分泌的蛋白酶能將豆類中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。(2)根據培養(yǎng)基的成分可知,纖維蛋白既含有碳元素也含有氮元素,因此可以作為碳源和氮源使用,提供能源物質,由于納豆桿菌能分泌納豆激酶,納豆激酶能夠水解水不溶性的纖維蛋白,在乳白色的固體培養(yǎng)基上如果存在納豆桿菌,則可以在培養(yǎng)基上形成較大的溶解圈。(3)納豆激酶的化學本質屬于蛋白質,因此提純納豆激酶的方法即提純蛋白質的方法。實驗步驟:①接種具有高纖溶活性的菌落到液體發(fā)酵培養(yǎng)基。37℃,搖床振蕩,發(fā)酵3天。②收集發(fā)酵液,離心,分層,取上清液作為提取納豆激酶的材料。③透析法分離:將上述離心所得樣品裝人透析袋,置于25mmo/L磷酸鹽緩沖液中透析,透析的目的是去除/置換樣品中分子量較小的雜質。④凝膠色譜純化:將透析液進行柱層析,用25mmo/L磷酸鹽緩沖液進行洗脫,試管連續(xù)收集。⑤為了確認試管收集液中是否含有納豆激酶,還要添加適量收集液到纖維蛋白培養(yǎng)基上,觀察是否出現溶解圈。【點睛】本題考查微生物的培養(yǎng)和發(fā)酵以及蛋白質的提純的知識點,要求學生掌握培養(yǎng)基的成分及功能,理解分離微生物的原則
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