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文檔簡介
2025年河北省唐山市五校高三調(diào)研考試(生物試題)試卷請考生注意:1.請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上,請用0.5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2.答題前,認真閱讀答題紙上的《注意事項》,按規(guī)定答題。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.下列有關(guān)生物育性的敘述正確的是()A.兩種綠色開花植物雜交所得到的后代植株一定可育B.綠色開花植物的任一細胞離體培養(yǎng)得到的植株一定可育C.同一綠色開花植物的兩個細胞進行植物細胞雜交得到的植株一定可育D.某一植物經(jīng)一定濃度秋水仙素處理后得到染色體加倍的植株一定可育2.用平板劃線法或稀涂布平板法都可以純化大腸桿菌,二者的共同點是A.都可以用固體培養(yǎng)基或液體培養(yǎng)基B.都需要使用接種環(huán)進行接種C.接種時都需要在酒精燈的火焰旁進行D.都可以用來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)3.科研人員測定某噬菌體單鏈DNA的序列,得到其編碼蛋白質(zhì)的一些信息(圖中字母表示相應(yīng)氨基酸代號)如圖所示。下列分析錯誤的是()A.一段核苷酸序列被D基因和E基因重復(fù)使用B.D、E基因的重疊部分編碼的氨基酸序列不同C.D、E基因?qū)?yīng)的終止密碼子分別為TAA、TGAD.重疊基因利用堿基的重疊可編碼更多的遺傳信息4.HIV感染某個T細胞后,會強迫T細胞表面的細胞膜形成小囊膜,作為自己的藏身之所,囊膜會經(jīng)歷一個被稱為“出芽繁殖”的過程,從這個T細胞斷開感染其他T細胞,該過程涉及一種名叫Gag的HIV復(fù)合蛋白。下列敘述錯誤的是A.HIV感染其他T細胞的過程與細胞識別以及細胞膜的流動性有關(guān)B.若能阻止Gag蛋白在體內(nèi)的積累可能會抑制HIV的傳播繁殖C.HIV的增殖依賴于T細胞內(nèi)的能量及物質(zhì)D.HIV感染初期機體免疫能力下降,T細胞數(shù)量持續(xù)減少5.花樣滑冰運動員在冰面上進行比賽的過程中,身體正在發(fā)生的反應(yīng)有A.神經(jīng)與肌肉協(xié)調(diào)配合完成高難度動作 B.寒冷直接刺激下丘腦產(chǎn)生興奮C.垂體合成并分泌抗利尿激素 D.血液中腎上腺素濃度持續(xù)降低6.下列細胞中的結(jié)構(gòu)所對應(yīng)的成分,不正確的是()A.核糖體:蛋白質(zhì)和核酸 B.中心體:蛋白質(zhì)和脂質(zhì)C.線粒體內(nèi)膜:蛋白質(zhì)和脂質(zhì) D.染色體:蛋白質(zhì)和核酸二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)某雌雄同株異花多年生植物,其葉有寬葉(D)和窄葉(d):莖有紫莖(E)和綠莖(e),現(xiàn)用兩純臺品種雜交,所得Fi再進行自交,得到實驗結(jié)果如下:實驗①:P:寬葉綠莖×窄葉紫莖→F1:全為寬葉紫莖→F2:寬葉紫莖:窄葉紫莖:寬葉綠莖:窄葉綠莖=303:184:181:59實驗②:P:寬葉綠莖×窄葉紫莖→F1:全為寬葉紫莖→F2:寬葉紫莖:窄葉紫莖:寬葉綠莖:窄葉綠莖=305:181:182:61請回答下列問題:(1)控制這兩對相對性狀的基因遵循基因的自由組合定律,說明這兩對基因是位于____的非等位基因。(2)根據(jù)F2中出現(xiàn)四種表現(xiàn)型及其比例,研究小組經(jīng)分析提出了以下兩種假設(shè):假設(shè)一:F1產(chǎn)生的某種基因型的花粉不育。假設(shè)二:F1產(chǎn)生的某種基因型的卵細胞不育。如果上述假設(shè)成立,則F1產(chǎn)生的配子中不育花粉或不育卵細胞的基因型為____,在F2的寬葉紫莖植株中,基因型為DdEe的個體所占的比例為____。(3)利用F2所得植株設(shè)計雜交實驗,要證明上述兩種假設(shè),請完成以下實驗設(shè)計(要求每一個雜交實驗都能對兩種假設(shè)作出判斷)。實驗思路:用F2中的____進行正交和反交實驗。預(yù)期結(jié)果及結(jié)論:①____。②____。8.(10分)β-葡萄糖苷酶是一種存在于微生物中的可水解纖維素的酶,可用于生產(chǎn)燃料乙醇,也可作為洗滌劑的有效成分。某科研小組進行了β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株的分離、鑒定、提純產(chǎn)物等研究。已知七葉靈能在β-葡萄糖苷酶的作用下水解,其水解產(chǎn)物七葉苷原能和Fe3+作用呈現(xiàn)棕黑色。請回答:(1)為篩選出β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株,應(yīng)到_____________環(huán)境中取樣,取樣后要在液體培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng),其目的是_________________。(2)選擇培養(yǎng)后要初步分離鑒定出目的菌株,請寫出實驗思路:___________________。(3)用接種針挑取棕黑色的菌落用_____________法進一步純化,進而篩選出高產(chǎn)菌株。(4)將高產(chǎn)菌株擴大培養(yǎng),獲得發(fā)酵液,用___________法去除發(fā)酵液中分子量小的雜質(zhì),再用_________法進一步純化,最終獲得純度較高的β-葡萄糖苷酶。(5)生產(chǎn)中為降低成本,β-葡萄糖苷酶最好采用________法固定,以便重復(fù)使用。9.(10分)霧霾天氣影響人們的生活質(zhì)量,空氣中的病原體、過敏原和有毒顆粒物可以使人患病。如圖所示為人體感染病原體后,機體通過調(diào)節(jié)清除體內(nèi)病原體的過程(A、B、C表示激素,D、E表示不同的免疫活性物質(zhì))?;卮鹣铝袉栴}:(1)患者中很多是兒童,這是因為兒童呼吸道黏膜的過濾能力有限,導致病原體突破了人體的第_________道防線。(2)患者多表現(xiàn)發(fā)熱癥狀,原因之一是:T細胞分泌的物質(zhì)D_________刺激了下丘腦中的體溫調(diào)節(jié)中樞,使有關(guān)的內(nèi)分泌腺分泌的C_________增加,產(chǎn)熱增加所致。(3)感冒發(fā)熱飲水較多后,血漿滲透壓降低,會刺激下丘腦中的_________進而使垂體釋放抗利尿激素的量_________(填,“增加”或“減少”),導致尿量增加,有利于將毒素排出體外。(4)據(jù)圖分析可知,當人出現(xiàn)焦慮、緊張情緒時,在霧霾天更易患病,其原因是_________。10.(10分)草甘膦是一種除草劑,科研人員利用基因工程技術(shù)獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻。操作過程如下圖所示。請回答下列問題:注:GUS基因表達產(chǎn)物經(jīng)染色能從無色變成藍色(1)構(gòu)建基因表達載體首先需用能產(chǎn)生不同________的限制性核酸內(nèi)切酶分別處理草甘膦抗性基因和Ti質(zhì)粒,這種處理的目的是________________________,再用________________處理。Ti質(zhì)粒的功能是________________________________________。(2)用含潮霉素的培養(yǎng)基進行圖中篩選1的目的是________________________,篩選2的目的是_________________________。(3)取某品種水稻的幼胚,先進行________處理,然后接種到含________的培養(yǎng)基中,誘導形成愈傷組織,用于獲得目的植株。(4)將大腸桿菌用Ca2+溶液處理,是否完成了轉(zhuǎn)化?________(填“是”或“否”),理由是________________________________________________________。11.(15分)某農(nóng)場生態(tài)系統(tǒng)主要包括甲~戊5個生物種群(不含分解者),每個種群的生物都只占有一個營養(yǎng)級,且這5個種群共有4個營養(yǎng)級,其能量值如下表所示,請回答下列問題:種群甲乙丙丁戊能量(×103kJ·m-2)4050023512(1)根據(jù)以上信息,繪出該農(nóng)場生態(tài)系統(tǒng)中由這5個種群生物構(gòu)成的食物鏈(食物網(wǎng))________。(2)該生態(tài)系統(tǒng)中,能量在第二和第三營養(yǎng)級之間的傳遞效率是________。若人類大量捕殺丙,則甲種群的數(shù)量變化趨勢是________。(3)流經(jīng)該農(nóng)場生態(tài)系統(tǒng)的能量部分來自生產(chǎn)者固定的________,無機環(huán)境中的碳主要以________形式進入生物群落。該農(nóng)場生態(tài)系統(tǒng)容易遭遇病蟲害,原因是________________。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、D【解析】
1、染色體數(shù)目變異可以分為兩類:一類是細胞內(nèi)個別染色體的增加或減少,另一類是細胞內(nèi)染色體數(shù)目以染色體組的形式成倍地增加或減少。2、植物組織培養(yǎng)過程是:離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織,然后再分化生成根、芽,最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。3、植物的體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術(shù)形成雜種細胞,進而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細胞雜交依據(jù)的原理是細胞膜的流動性和植物細胞的全能性。【詳解】A、兩種綠色開花植物之間具有生殖隔離,不能雜交或者雜交所得到的后代植株不育,A錯誤;B、二倍體綠色開花植物的花粉細胞離體培養(yǎng)得到的單倍體植株不可育,B錯誤;C、同一綠色開花植物的兩個細胞,如根細胞和花粉細胞進行植物細胞雜交得到的植株含有三個染色體組,由于減數(shù)分裂時聯(lián)會紊亂不可育,C錯誤;D、某一植物經(jīng)一定濃度秋水仙素處理后得到染色體加倍的植株一定可育,D正確。故選D。本題考查有關(guān)生物育性的知識,要求考生識記植物組織培養(yǎng),理解植物體細胞雜交,理解染色體數(shù)目變異,能結(jié)合所學的知識準確判斷各敘說。2、C【解析】試題分析:平板劃線法或稀釋涂布平板法都是在固體培養(yǎng)基上進行的,A錯誤;平板劃線法接種用接種針,稀釋涂布平板法接種要用涂布器,B錯誤;不論是平板劃線法還是稀釋涂布平板法都需要進行無菌操作,在酒精燈火焰旁進行,C正確;平板劃線法不能用于計數(shù)活菌,只能用于分離菌種;稀釋涂布平板法可以用來計數(shù)活菌,D錯誤。點睛:熟記微生物常見的接種的方法:①平板劃線法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板,接種,劃線,在恒溫箱里培養(yǎng).在線的開始部分,微生物往往連在一起生長,隨著線的延伸,菌數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個菌落;②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后,均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。3、C【解析】
據(jù)圖分析可知,D基因中包含著E基因,E基因的第一個密碼子從D基因中央的一個密碼子的基因序列TAT的中間開始,【詳解】A、與分析可知,E基因的一段核苷酸序列被D基因和E基因重復(fù)使用,A正確;B、兩個部分重疊的基因所編碼的氨基酸序列不同,B正確;C、終止密碼子位于mRNA上,因此密碼子中不可能含有堿基T,C錯誤;D、重疊基因利用堿基的重疊來編碼更多的遺傳信息,D正確。故選C。本題考查基因的概念、基因表達的相關(guān)知識,旨在考查考生的理解能力、獲取信息的能力和綜合運用能力。4、D【解析】
HIV是一種病毒,它專一性寄生在T細胞內(nèi),利用T細胞內(nèi)的物質(zhì)和能量合成自身所需的蛋白質(zhì)和核酸,以繁殖其下一代。結(jié)合題干信息分析可知,HIV感染T細胞,需要T細胞的細胞膜形成一個囊泡將其包裹隱藏,再經(jīng)過一些系列的增殖過程,最后通過“出芽繁殖”的方式脫離T細胞,但這一過程需要一種叫Gag的蛋白協(xié)助。人體感染HIV初期,T細胞反而會大量增殖,機體免疫能力會增強,但一旦HIV隱藏后,需等到其大量繁殖并感染大量T細胞,機體的免疫力才會遭到嚴重破壞,此時感染者就會出現(xiàn)各種感染或腫瘤等并發(fā)癥,直至死亡?!驹斀狻緼、HIV感染T細胞的過程與細胞的識別有關(guān),囊泡的出現(xiàn)與細胞膜的流動性有關(guān),A正確;
B、HIV感染其他T細胞與Gag蛋白有關(guān),因此若能阻止Gag蛋白在體內(nèi)的積累就可能會抑制HIV的傳播繁殖,B正確;
C、HIV必須在宿主細胞內(nèi)進行增殖,該過程依賴于T細胞內(nèi)的能量及物質(zhì),C正確;
D、HIV感染初期,為抵抗病原體的感染,機體免疫力增強,T細胞數(shù)量增多,D錯誤。
故選D。
易錯選項D,不清楚機體從感染HIV開始到死亡期間內(nèi)機體內(nèi)HIV濃度的變化以及對應(yīng)的T細胞數(shù)量變化規(guī)律。HIV濃度的變化:急劇增大,再減少,之后逐漸增大。T細胞數(shù)量變化:先增多,后逐漸減少。5、A【解析】
1、體內(nèi)失水過多或食物過咸時:細胞外液滲透壓升高→下丘腦感受器受到刺激→垂體釋放抗利尿激素多→腎小管、集合管重吸收增加→尿量減少,同時大腦皮層產(chǎn)生渴覺(飲水)。2、腎上腺素的作用:能讓人呼吸加快,心跳與血液流動加速,瞳孔放大,為身體活動提供更多能量,使反應(yīng)更加快速。3、寒冷狀態(tài)下,冷覺感受器感受寒冷,通過傳入神經(jīng)傳到下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞,下丘腦通過傳出神經(jīng)一方面使得血管收縮,血流量減少,汗腺分泌減少或停止來減少散熱,另一方面使得骨骼肌戰(zhàn)栗,立毛肌收縮以及通過體液調(diào)節(jié)分泌甲狀腺激素,腎上腺素等讓代謝加強來增加產(chǎn)熱?!驹斀狻炕踊\動員在冰面上進行比賽的過程中,各個動作的協(xié)調(diào)進行離不開神經(jīng)與肌肉協(xié)調(diào)配合,才能完成高難度動作,A正確;寒冷直接刺激冷覺感受器,使其興奮,通過傳入神經(jīng)將興奮傳至下丘腦的體溫調(diào)節(jié)中樞,B錯誤;抗利尿激素是由下丘腦合成并分泌的,經(jīng)過垂體后葉釋放的,C錯誤;在花樣滑冰運動員在冰面上進行比賽的過程中,代謝加快,心跳加快,因此腎上腺素分泌增多,血液中腎上腺素的濃度會上升,D錯誤。6、B【解析】
1、細胞中的核糖體有的附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上,有的游離在細胞質(zhì)中,是“生產(chǎn)蛋白質(zhì)的機器”。2、中心體常見于動物和某些低等植物細胞,由一對互相垂直的中心粒及周圍物質(zhì)組成,與細胞的有絲分裂有關(guān)。3、線粒體是細胞內(nèi)進行有氧呼吸的主要場所,是細胞的“動力車間”?!驹斀狻緼、核糖體由蛋白質(zhì)和核酸(RNA)組成,A正確;B、中心體沒有膜結(jié)構(gòu),不含脂質(zhì),只有蛋白質(zhì),B錯誤;C、線粒體內(nèi)膜主要由蛋白質(zhì)和脂質(zhì)組成,C正確;D、染色體主要由蛋白質(zhì)和核酸(DNA)組成,D正確。故選B。二、綜合題:本大題共4小題7、非同源染色體上DE3/5寬葉紫莖植株與窄葉綠莖植株以寬葉紫莖植株為母本窄葉綠莖植株為父本時,如果后代有寬葉紫莖植株出現(xiàn),則假設(shè)一成立,如果后代無寬葉紫莖植株出現(xiàn),則假設(shè)二成立。以窄葉綠莖植株為母本寬葉紫莖植株為父本時,如果后代無寬葉紫莖植株出現(xiàn),則假設(shè)一成立,如果后代有寬葉紫莖植株出現(xiàn),則假設(shè)二成立。(注:假設(shè)1和假設(shè)2可以寫成題上的具體內(nèi)容)【解析】
由題意知,實驗①和實驗②,子二代的表現(xiàn)型比例大約是5:3:3:1,是9:3:3:1的變式,因此2對等位基因遵循自由組合定律,子一代基因型是DdEe;5:3:3:1與9:3:3:1相比,雙顯性減少4份,結(jié)合題干信息某種基因型的精子或卵細胞不育,推測基因型為DE的精子或卵細胞不育?!驹斀狻浚?)控制葉形和莖色的兩對等位基因遵循自由組合定律,則這兩對等位基因位于非同源染色體上。(2)據(jù)分析可知,F(xiàn)1產(chǎn)生的配子中不育花粉或不育卵細胞的基因型為DE,在F2的寬葉紫莖植株中基因型及比例為1DDEe:1DdEE:3DdEe,因此基因型為DdEe的個體所占的比例為3/5。(3)要證明F1產(chǎn)生的配子DE是花粉不育還是卵細胞不育,可將F2中的寬葉紫莖植株與窄葉綠莖植株進行正反交實驗,以寬葉紫莖植株為母本窄葉綠莖植株為父本時,如果后代有寬葉紫莖植株出現(xiàn),則DE的花粉不育,如果后代無寬葉紫莖植株出現(xiàn),則DE的卵細胞不育。以窄葉綠莖植株為母本寬葉紫莖植株為父本時,如果后代無寬葉紫莖植株出現(xiàn),則DE的花粉不育,如果后代有寬葉紫莖植株出現(xiàn),則DE的卵細胞不育。本題要求考生理解基因自由組合定律的實質(zhì),學會根據(jù)子代的表現(xiàn)型比例與9:3:3:1的比較判斷性狀偏離比出現(xiàn)的原因及親本基因型,并應(yīng)用演繹推理的方法設(shè)計遺傳實驗,驗證所得的推理并預(yù)期實驗結(jié)果;理解對顯隱性關(guān)系判斷的實驗思路,評價實驗方案。8、富含纖維素增加產(chǎn)β-葡萄糖苷酶菌株的濃度配制含基本成分的培養(yǎng)基,加入七葉靈、Fe3+,用稀釋涂布平板法接種并在適宜條件下培養(yǎng),粽黑色圈大的菌落即為目標菌落平板劃線透析法凝膠色譜法化學結(jié)合或物理吸附【解析】
1.尋找目的菌株的原理是需要根據(jù)它對生存環(huán)境的要求,到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。2.固定化酶和固定化細胞技術(shù)是指利用物理或化學方法,將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù),包括包埋法、化學結(jié)合法和物理吸附法。3.凝膠色譜法也稱為分配色譜法,是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。當相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時,相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長,移動的速度較慢,而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì),無法進入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動,路程較短,移動的速度較快,相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子得以分離。【詳解】(1)實驗?zāi)康氖且Y選出β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株,而β-葡萄糖苷酶是一種存在于微生物中的可水解纖維素的酶,據(jù)此可知要找到目的菌需要到富含纖維素的環(huán)境中取樣,取樣后,為了增加產(chǎn)β-葡萄糖苷酶菌株的濃度,要將樣品菌在液體培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)。(2)題意顯示七葉靈能在β-葡萄糖苷酶的作用下水解,其水解產(chǎn)物七葉苷原能和Fe3+作用呈現(xiàn)棕黑色,若要初步分離鑒定出目的菌株,需要在鑒定培養(yǎng)基中加入七葉靈(能在β-葡萄糖苷酶作用下分解)、Fe3+(與七葉靈的水解產(chǎn)物發(fā)生顏色反應(yīng)),為得到單菌落需用稀釋涂布平板法接種,然后置于適宜條件下培養(yǎng),在該培養(yǎng)基中呈現(xiàn)棕黑色的菌落即為目的菌。(3)用接種針挑取棕黑色的菌落,然后用平板劃線法接種,置于適宜條件下進一步純化培養(yǎng),進而篩選出高產(chǎn)菌株。(4)將高產(chǎn)菌株擴大培養(yǎng),獲得發(fā)酵液,因為透析袋允許小分子自由出入,而不能讓大分子透過,故用透析法處理之后,發(fā)酵液中分子量小的雜質(zhì)就能夠被除去,再用凝膠色譜法進一步純化,最終獲得純度較高的β-葡萄糖苷酶。(5)生產(chǎn)中為降低成本,β-葡萄糖苷酶最好采用化學結(jié)合或物理吸附法固定,以便重復(fù)使用,同時也能與產(chǎn)物有效的分離。熟知相關(guān)的基礎(chǔ)知識是解答本題的關(guān)鍵!能夠從題目中找到關(guān)鍵信息解答本題中篩選目的菌的原理是解答本題的另一關(guān)鍵!9、一淋巴因子甲狀腺激素細胞外液滲透壓感受器減少T細胞的活性降低,免疫功能下降【解析】
由圖中可得,A為促甲狀腺激素釋放激素,B為促甲狀腺激素,C為甲狀腺激素,D為淋巴因子,E為抗體?!驹斀狻浚?)皮膚、粘膜等抵抗外界病原體屬于人體第一道防線,因此呼吸粘膜的過濾能力有限是導致病原體突破了人體第一道防線;(2)免疫系統(tǒng)中的T細胞分泌淋巴因子,能刺激下丘腦的體溫中樞,甲狀腺分泌的甲狀腺激素能夠參與體溫調(diào)節(jié),因此D為淋巴因子,C為甲狀腺激素;(3)下丘腦中存在滲透壓感受器,用于調(diào)節(jié)釋放抗利尿激素,因此當血液滲透壓下降時,下丘腦中的滲透壓感受器受到刺激進而刺激垂體,抗利尿激素會使尿量減少,因此為了促進排尿,垂體釋放的抗利尿激素會減少從而使尿量增加;(4)由圖得,當人出現(xiàn)焦慮、緊張情緒時,T細胞的活性會降低,從而影響人的免疫功能使其下降,導致人在霧霾天更容易患病。人體有三道防線,抵御病原體的攻擊。是由皮膚和黏膜及其分泌物構(gòu)成第一道防線,體液中的殺菌物質(zhì)(如溶菌酶)和吞噬細胞構(gòu)成第二道防線,主要由免疫器官和免疫細胞構(gòu)成第三道防線。第一道防線與第二道防線通常容易混淆要注意區(qū)分。10、黏性末端防止經(jīng)同一種限制酶切割后,具有相同黏性末端的目的基因和目的基因相連接、Ti質(zhì)粒和Ti質(zhì)粒相連接DNA連接酶Ti質(zhì)粒有T-DNA片段,將目的基因整合到受體細胞染色體DNA獲得含基因表達載體的農(nóng)桿菌篩選目的基因表達的愈傷組織消毒植物激素否大腸桿菌用Ca2+
溶液處理,只成為了感受態(tài)細胞,無目的基因進入受體細胞、維持穩(wěn)定和進行表達的過程【解析】
1、基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成.(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等.(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法.(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù).個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等.2、目的基因進入受體細胞內(nèi),并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程,稱為轉(zhuǎn)化?!驹斀狻浚?)在構(gòu)建基因表達載體時,為了避免因用同一種限制酶切割后,具有相同黏性末端的目的基因和目的基因相連接、Ti質(zhì)粒和Ti質(zhì)粒相連接的情況出現(xiàn),所以用能產(chǎn)生不同黏性末端的限制性核酸內(nèi)切酶分別處理草甘膦抗性基因和Ti質(zhì)粒,再用DNA連接酶處理以便獲得目的基因和質(zhì)粒正確連接的基因表達載體,Ti質(zhì)粒有T-DNA片段,能將目的基因整合到受體細胞染色
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