2024高考生物一輪復(fù)習(xí)第11單元生物技術(shù)實踐第40講微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用學(xué)案

PAGE16-第40講微生物的培育與應(yīng)用[考綱明細(xì)]1.微生物的分別和培育2.某種微生物數(shù)量的測定3.培育基對微生物的選擇作用4.利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用學(xué)問自主梳理一微生物的試驗室培育1．培育基(1)概念：人們依據(jù)微生物對eq\x(\s\up1(01))養(yǎng)分物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的eq\x(\s\up1(02))養(yǎng)分基質(zhì)。(2)養(yǎng)分成分：水、eq\x(\s\up1(03))碳源、eq\x(\s\up1(04))氮源、無機(jī)鹽四類養(yǎng)分物質(zhì)，另外還須要滿意微生物生長對eq\x(\s\up1(05))pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)以及eq\x(\s\up1(06))氧氣的要求。(3)培育基的分類①按物理狀態(tài)分類培育基種類特點用途eq\x(\s\up1(07))液體培育基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培育基加凝固劑(如瓊脂)視察微生物的eq\x(\s\up1(08))運動、分類鑒定eq\x(\s\up1(09))固體培育基加凝固劑(如瓊脂)微生物分別、eq\x(\s\up1(10))鑒定，活菌計數(shù)，菌種保藏②按化學(xué)成分分類培育基種類特點用途自然培育基含化學(xué)成分eq\x(\s\up1(11))不明確的自然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培育基培育基成分eq\x(\s\up1(12))明確(用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成)微生物的分類、鑒定③按功能分類種類制備方法原理用途舉例選擇培育基培育基中加入某些化學(xué)物質(zhì)依據(jù)某些微生物對某些物質(zhì)的特別需求或抗性而設(shè)計從眾多微生物中eq\x(\s\up1(13))分別所需的微生物加入eq\x(\s\up1(14))青霉素分別得到酵母菌和霉菌鑒別培育基培育基中加入某種eq\x(\s\up1(15))指示劑或化學(xué)藥品產(chǎn)生特定的顏色或其他變更鑒別不同種類的微生物用eq\x(\s\up1(16))伊紅美藍(lán)培育基鑒別大腸桿菌為什么選擇培育能夠“濃縮”所需的微生物？提示在選擇培育的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這種養(yǎng)分條件的微生物得到快速繁殖，而那些不適應(yīng)這種養(yǎng)分條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮”的作用。2．無菌技術(shù)(1)含義：指在培育微生物的操作中，全部防止eq\x(\s\up1(17))雜菌污染的方法。(2)關(guān)鍵：防止eq\x(\s\up1(18))外來雜菌的入侵。(3)不同對象的無菌操作方法(連線)答案①、②、⑥—b—Ⅰ、Ⅱ③、④、⑤—a—Ⅲ、Ⅳ3．大腸桿菌的純化培育(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培育基①操作步驟eq\x(計算)→eq\x(\x(\s\up1(19))稱量)→eq\x(溶化)→eq\x(\x(\s\up1(20))滅菌)→eq\x(\x(\s\up1(21))倒平板)②倒平板的方法及留意事項a．請用文字和箭頭寫出正確的倒平板操作流程：eq\x(\s\up1(22))丙→乙→甲→丁。b．乙中的滅菌方法是eq\x(\s\up1(23))灼燒滅菌。c．丁中的操作須要等待eq\x(\s\up1(24))平板冷卻凝固才能進(jìn)行。1．倒平板操作為什么須要使錐形瓶的瓶口通過火焰？提示通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培育基。2．平板冷凝后，為什么要將平板倒置？提示平板冷凝后，皿蓋上會凝聚水珠，凝固后的培育基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培育基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培育基，造成污染。(2)純化大腸桿菌的兩種方法1)平板劃線法①概念：是通過eq\x(\s\up1(25))接種環(huán)在瓊脂固體培育基表面eq\x(\s\up1(26))連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培育基的表面。②留意事項：a．灼燒接種環(huán)第一次劃線每次劃線之前劃線結(jié)束目的殺死接種環(huán)上原有的微生物殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種干脆來源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)目削減殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避開污染環(huán)境和感染操作者b．灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。c．其次次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端起先，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而漸漸削減，最終得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。d．劃線時最終一區(qū)不要與第一區(qū)相連。e．劃線用力大小要適當(dāng)，防止用力過大將培育基劃破。2)eq\x(\s\up1(27))稀釋涂布平板法①概念：是將菌液進(jìn)行一系列的eq\x(\s\up1(28))梯度稀釋，然后將eq\x(\s\up1(29))不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培育基的表面，進(jìn)行培育。②操作過程(3)菌種的保存方法①對于頻繁運用的菌種，可以采納eq\x(\s\up1(30))臨時保藏的方法。②對于須要長期保存的菌種，可以采納eq\x(\s\up1(31))甘油管藏的方法。二土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計數(shù)1．篩選菌株(1)自然界中目的菌株篩選的依據(jù)：依據(jù)它對eq\x(\s\up1(01))生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去找尋。(2)試驗室中微生物篩選的原理：人為供應(yīng)有利于eq\x(\s\up1(02))目的菌株生長的條件(包括養(yǎng)分、溫度、pH等)，同時eq\x(\s\up1(03))抑制或阻擋其他微生物生長。(3)選擇培育基：允許特定種類的微生物生長，同時eq\x(\s\up1(04))抑制或eq\x(\s\up1(05))阻擋其他種類微生物生長的培育基。2．統(tǒng)計菌落數(shù)目(1)常用方法：eq\x(\s\up1(06))稀釋涂布平板法。(2)統(tǒng)計依據(jù)當(dāng)樣品的eq\x(\s\up1(07))稀釋度足夠高時，培育基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個eq\x(\s\up1(08))活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推想出樣品中大約含有多少活菌。(3)活菌計算方法：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M[其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)]。(4)其他方法：還可利用eq\x(\s\up1(09))顯微鏡干脆計數(shù)。3．設(shè)置比照設(shè)置比照的主要目的是解除試驗組中eq\x(\s\up1(10))非測試因素對試驗結(jié)果的影響，提高試驗結(jié)果的eq\x(\s\up1(11))可信度，例如為了解除培育基被雜菌污染的可能性，需以eq\x(\s\up1(12))未接種細(xì)菌的培育基培育作為空白比照。除設(shè)置比照組外，設(shè)置重復(fù)組的作用是什么？應(yīng)如何設(shè)置重復(fù)組？提示設(shè)置重復(fù)組的作用是為解除偶然因素對試驗結(jié)果的干擾；在每一稀釋度下宜設(shè)置3個平板作重復(fù)組，選擇菌落數(shù)均在30～300且數(shù)目相差不大的三個平板，用“平均值”代入計數(shù)公式予以計算菌落數(shù)。4．試驗設(shè)計項目內(nèi)容試驗原理①能合成eq\x(\s\up1(13))脲酶的細(xì)菌才能分解尿素②配制以eq\x(\s\up1(14))尿素為唯一氮源的培育基，能夠生長的細(xì)菌就是能分解尿素的細(xì)菌試驗流程土壤取樣(富含eq\x(\s\up1(15))有機(jī)質(zhì))→配制土壤溶液和制備培育基→eq\x(\s\up1(16))樣品梯度稀釋→涂布平板與培育→菌落eq\x(\s\up1(17))視察鑒定①方法：在以尿素為唯一氮源的培育基中加入eq\x(\s\up1(18))酚紅指示劑培育分解尿素的細(xì)菌②原理：細(xì)菌分解尿素的反應(yīng)中，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成了eq\x(\s\up1(19))氨，其會使培育基的eq\x(\s\up1(20))堿性增加，pH上升5．結(jié)果分析與評價內(nèi)容結(jié)論分析是否有雜菌污染空白比照組培育基上無菌落生長→未被雜菌污染選擇培育基是否具有篩選作用牛肉膏蛋白胨培育基上的菌落數(shù)目明顯多于選擇培育基上的菌落數(shù)目→選擇培育基具有eq\x(\s\up1(21))篩選作用樣品的稀釋操作假如得到了2個或2個以上菌落數(shù)在30～300的平板→操作勝利重復(fù)組的結(jié)果若選取的是同一種土樣，統(tǒng)計的結(jié)果應(yīng)當(dāng)接近三分解纖維素的微生物的分別1．纖維素酶(1)纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括eq\x(\s\up1(01))C1酶、eq\x(\s\up1(02))CX酶和eq\x(\s\up1(03))葡萄糖苷酶三種組分。(2)作用：纖維素eq\o(→,\s\up17(C1酶),\s\do15(CX酶))eq\x(\s\up1(04))纖維二糖eq\o(→,\s\up17(葡萄糖苷酶))eq\x(\s\up1(05))葡萄糖。2．纖維素分解菌的篩選(1)方法：eq\x(\s\up1(06))剛果紅染色法。(3)培育基：以eq\x(\s\up1(09))纖維素為唯一碳源的選擇培育基。(4)試驗流程土壤取樣：富含eq\x(\s\up1(10))纖維素的環(huán)境↓選擇培育：用eq\x(\s\up1(11))選擇培育基培育，以增加纖維素分解菌的濃度↓eq\x(\s\up1(12))梯度稀釋：制備系列稀釋液↓涂布平板：將樣品涂布到eq\x(\s\up1(13))鑒別纖維素分解菌的培育基上↓選擇產(chǎn)生eq\x(\s\up1(14))透亮圈的菌落(5)分別纖維素分解菌所用的兩種培育基比較分別纖維素分解菌的試驗中先用eq\x(\s\up1(15))選擇培育基，再用eq\x(\s\up1(16))鑒別培育基。①選擇培育基為eq\x(\s\up1(17))液體培育基，以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長，而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長。②鑒別培育基含瓊脂，為eq\x(\s\up1(18))固體培育基，細(xì)菌可在培育基上形成肉眼可見的菌落。剛果紅染色法應(yīng)用的就是鑒別培育基?？键c題型突破考點1微生物的純化培育技術(shù)題型一無菌技術(shù)1．(2024·上海高三模擬)微生物培育過程中消毒和滅菌環(huán)節(jié)特別重要，以下滅菌或消毒方法不正確的是()ABCD儀器或試劑固體培育基接種環(huán)(針)菌種稀釋液滴管消毒或滅菌方法高溫高壓火焰灼燒紫外光照耀酒精消毒答案C解析固體培育基應(yīng)當(dāng)用高壓蒸汽滅菌，A正確；接種環(huán)應(yīng)當(dāng)采納灼燒滅菌，B正確；菌種稀釋液不須要滅菌或消毒操作，C錯誤；滴管應(yīng)當(dāng)用酒精消毒，D正確。2．(2024·全國卷Ⅱ)在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，常常通過消毒和滅菌來避開雜菌的污染。回答下列問題：(1)在試驗室中，玻璃和金屬材質(zhì)的試驗器具_(dá)_______(填“可以”或“不行以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采納巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是________________________________。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采納紫外線照耀消毒，其緣由是紫外線能__________________，在照耀前，適量噴灑__________________，可強(qiáng)化消毒效果。(4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學(xué)在運用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的緣由是____________________。答案(1)可以(2)在達(dá)到消毒目的的同時，養(yǎng)分物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡解析(1)能耐高溫的、須要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培育皿)和金屬用具等可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)煮沸消毒法即在100℃煮沸5～6min可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢；巴氏消毒法即在70～75℃煮30min或在80℃煮15min，可以殺死微生物，并且保證養(yǎng)分物質(zhì)不被破壞。因此，與煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采納的巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法的優(yōu)點是在達(dá)到消毒目的的同時，養(yǎng)分物質(zhì)損失較少。(3)因紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu)，所以密閉空間內(nèi)的空氣可采納紫外線照耀消毒。在照耀前，適量噴灑消毒液，可強(qiáng)化消毒效果。(4)通常乙醇消毒有氣味，影響水質(zhì)，不相宜消毒自來水；高錳酸鉀本身有顏色，消毒后溶液呈紫紅色，無法運用；因此水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的。(5)采納高壓蒸汽滅菌時，鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底解除后才能將鍋密閉。假如未將鍋內(nèi)冷空氣排盡，則會出現(xiàn)壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度的現(xiàn)象。全面比較消毒和滅菌手段結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫柔的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高溫的液體化學(xué)藥劑消毒法用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源紫外線消毒法接種室、接種箱或超凈工作臺滅菌劇烈的理化因素殺死物體內(nèi)外全部的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌法接種工具干熱滅菌法玻璃器皿、金屬用具高壓蒸汽滅菌法培育基及容器題型二微生物的純化技術(shù)3．用牛肉膏蛋白胨固體培育基進(jìn)行大腸桿菌的純化培育，相關(guān)敘述正確的是()A．牛肉膏和蛋白胨主要為微生物供應(yīng)糖和維生素兩種養(yǎng)分物質(zhì)B．牛肉膏蛋白胨培育基需經(jīng)高壓蒸汽滅菌后調(diào)整pHC．倒平板操作的最終將平板倒置，可以使培育基表面的水分更好地?fù)]發(fā)D．可以在低溫條件下采納斜面保藏法長期保存大腸桿菌菌種答案C解析牛肉膏和蛋白胨可為大腸桿菌生長供應(yīng)碳源、氮源和維生素等養(yǎng)分物質(zhì)，A錯誤；牛肉膏蛋白胨培育基應(yīng)先調(diào)pH再經(jīng)高壓蒸汽滅菌，B錯誤；倒平板操作中，待平板冷卻凝固后將平板倒過來放置，一方面可防止水蒸氣倒流污染培育基，另一方面可以使培育基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，C正確；長期保存大腸桿菌菌種，須要用甘油管藏法在－20℃的冷凍箱中保存，D錯誤。4．(2024·四川高三月考)下列依據(jù)相應(yīng)試驗現(xiàn)象分析得出的結(jié)論，錯誤的是()A．牛肉膏蛋白胨空白比照培育基上沒有菌落生長，說明培育基沒有被雜菌污染B．牛肉膏蛋白胨培育基的菌落數(shù)大于選擇培育基，說明選擇培育基有選擇作用C．稀釋涂布平板法獲得的培育基上菌落數(shù)小于30，說明可能是稀釋的倍數(shù)太大D．在接種大腸桿菌的培育基上視察到菌落有大有小，說明培育基已被雜菌污染答案D解析牛肉膏蛋白胨培育基不具有選擇性，假如牛肉膏蛋白胨培育基的菌落數(shù)大于選擇培育基，說明選擇培育基有選擇作用，B正確；在接種大腸桿菌的培育基上視察到菌落有大有小，培育基不肯定被雜菌污染，可能是大腸桿菌菌落形成的時間不一，不能僅通過菌落的大小判別不同種類的微生物，D錯誤。5．(2024·江蘇高考)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中，對環(huán)境有嚴(yán)峻危害。小明同學(xué)打算依據(jù)下圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分別篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題：(1)酚降解菌富集培育基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有________。(2)將采集到的樣品接種培育，苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而漸漸________，以達(dá)到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集，應(yīng)進(jìn)一步________，以便于菌落計數(shù)與分別。制備平板培育基時除了須要水、養(yǎng)分物質(zhì)外，還必需添加________。(3)如圖為連續(xù)劃線法示意圖，在圖中________(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。(4)采納比色測定法(運用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進(jìn)行顯色反應(yīng)，下表中1～5號比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為____________________。管號123456苯酚濃度(mg/L)1假如廢水為50mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，則需將殘留液稀釋___________________________(填序號：①5②10③20)倍后，再進(jìn)行比色。答案(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀釋涂布凝固劑(3)③(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8③解析(1)分析富集培育基的成分可知，培育基中蛋白胨、苯酚中含C，可作為碳源。(2)在接種培育時，隨轉(zhuǎn)接次數(shù)的增加，應(yīng)漸漸增加培育基中苯酚(碳源)的含量，以達(dá)到富集酚降解菌的目的。若接種培育后平板中菌落過于密集，應(yīng)接著稀釋涂布，以降低平板上菌落密度，便于菌落計數(shù)與分別。稀釋涂布時所用的培育基為固體培育基，制備平板培育基時除了須要水、養(yǎng)分物質(zhì)外，還必需添加瓊脂等物質(zhì)作為凝固劑。(3)利用連續(xù)劃線法接種時，越在最終劃線區(qū)域，菌落的密度越小，越簡潔獲得單菌落，所以，圖中③區(qū)域更易獲得單菌落。(4)依據(jù)表中6號比色管中苯酚濃度為1mg/L可以推知，1～5號比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為0mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L。依據(jù)題意，廢水為50mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，即苯酚殘留液濃度為10.5mg/L，要使稀釋后的苯酚殘留液濃度介于0～1mg/L之間，需將殘留液稀釋20倍左右，再進(jìn)行比色。兩種純化細(xì)菌的方法的比較比較項目平板劃線法稀釋涂布平板法圖示關(guān)鍵操作接種環(huán)在固體培育基表面連續(xù)劃線①一系列的梯度稀釋②涂布平板法操作留意事項每次劃線前后均需灼燒接種環(huán)稀釋度要足夠高，為確保試驗勝利可以增加稀釋度的范圍菌體獲得在具有所需顯著菌落特征的區(qū)域菌落中挑取菌體從相宜的稀釋度的平板上的菌落中挑取菌體優(yōu)點可以依據(jù)菌落的特點獲得某種微生物的單細(xì)胞菌落既可以獲得單細(xì)胞菌落，又能對微生物計數(shù)缺點不能對微生物計數(shù)操作困難，須要涂布多個平板考點,2)微生物的篩選與計數(shù)題型一培育基的成分及配制1．(2024·上海高三模擬)下表為某培育基配方，下列敘述正確的是()牛肉膏蛋白胨乳糖蔗糖瓊脂5g10g5g5g2gK2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水pH2g0.4g0.065g10007.2A．供應(yīng)碳源的只有蔗糖B．該培育基中需加入生長因子C．牛肉膏、蛋白胨均可供應(yīng)氮源D．該培育基可特定培育自生固氮菌答案C解析牛肉膏、蛋白胨均可用于供應(yīng)碳源和氮源，A錯誤，C正確；該培育基中含有的牛肉膏、蛋白胨中含有生長因子，因此培育基不需加入生長因子，B錯誤；該培育基含有含氮有機(jī)物，不能特定培育自生固氮菌，D錯誤。2．(2024·甘肅武威十八中高三月考)關(guān)于培育基的配制說法不正確的是()A．在配制培育乳酸桿菌的培育基時，需加入維生素B．微生物的適應(yīng)性強(qiáng)，配制培育基時可以不考慮pHC．雖然各種培育基的詳細(xì)配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽D．配制培育基時要留意各種養(yǎng)分的濃度和比例答案B解析培育基除須要滿意碳源、氮源、水和無機(jī)鹽幾種養(yǎng)分物質(zhì)外，還須要滿意微生物生長對pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)以及氧氣的要求，如培育乳酸桿菌時須要在培育基中添加維生素，A正確，B錯誤；雖然各種培育基的詳細(xì)配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽，C正確；不同微生物的生長對各種養(yǎng)分物質(zhì)的需求不同，配制培育基時要留意各種養(yǎng)分的濃度和比例，D正確。3．(2024·甘肅武威十八中高三月考)鑒別培育基是依據(jù)微生物的代謝特點在培育基中加入一些物質(zhì)配制而成的，這些物質(zhì)是()A．指示劑或化學(xué)藥品 B．青霉素或瓊脂C．高濃度食鹽 D．維生素或指示劑答案A解析鑒別培育基的原理是：在培育基中加入某種試劑或化學(xué)藥品，依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培育基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征，從而鑒別不同種類的微生物，A正確。4．選擇培育基是依據(jù)某一種或某一類微生物的特別養(yǎng)分要求或一些物理、化學(xué)抗性而設(shè)計的培育基。利用這種培育基可以將所須要的微生物從混雜的微生物中分別出來。為選擇酵母菌和硝化細(xì)菌，應(yīng)選用的培育基分別為()A．伊紅美藍(lán)培育基、含青霉素的培育基B．含青霉素的培育基、含氨的無機(jī)培育基C．含氨的無機(jī)培育基、含青霉素的培育基D．含青霉素的培育基、伊紅美藍(lán)培育基答案B解析酵母菌是真菌，通?？梢杂煤嗝顾氐呐嘤M(jìn)行選擇培育，因為青霉素能抑制細(xì)菌生長，但不能抑制真菌生長；硝化細(xì)菌為自養(yǎng)型生物，能夠利用氨轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯跛崴尫诺哪芰?，把無機(jī)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)物以維持自身生命活動，利用含氨的無機(jī)培育基可進(jìn)行選擇培育。1.選擇培育基的作用原理(1)在培育基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，如加入青霉素可以分別出酵母菌和霉菌；加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的加入是在滿意基本所需培育成分的基礎(chǔ)上加入。(2)變更培育基中的養(yǎng)分成分，如缺乏氮源時可以分別出固氮微生物；以石油作為唯一碳源時，可以分別出能消退石油污染的微生物。(3)變更微生物的培育條件，如將培育基放在高溫環(huán)境中可以得到耐高溫的微生物。2．培育基的配制原則(1)目的要明確：配制時應(yīng)依據(jù)微生物的種類、培育目的等確定配制的培育基種類。(2)養(yǎng)分要協(xié)調(diào)：留意各種養(yǎng)分物質(zhì)的濃度和比例。(3)pH要相宜：細(xì)菌為6.5～7.5，放線菌為7.5～8.5，真菌為5.0～6.0，培育不同微生物所需的pH不同。3．培育基中養(yǎng)分物質(zhì)的確定方法不同種類的微生物代謝特點不同，因此對培育基中養(yǎng)分物質(zhì)的需求也不同。如：(1)自養(yǎng)型微生物所需的主要養(yǎng)分物質(zhì)是無機(jī)鹽，碳源可來自大氣中的CO2，氮源可由含氮無機(jī)鹽供應(yīng)。(2)異養(yǎng)型微生物所需的養(yǎng)分物質(zhì)主要是有機(jī)物(即碳源)，必需由含碳有機(jī)物供應(yīng)，氮源也主要是由有機(jī)物供應(yīng)，部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無機(jī)氮源。題型二微生物的篩選與計數(shù)5．欲從土壤中分別出能分解尿素的細(xì)菌，下列試驗操作中不正確的是()A．將土壤用無菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋B．同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個平板C．可將未接種的培育基在相同條件下培育作為比照D．用加入剛果紅指示劑的培育基可篩選出分解尿素的細(xì)菌答案D解析為防止土壤浸出液濃度過高，不能獲得單菌落，要將土壤用無菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋，A正確；同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個平板，防止偶然因素對試驗結(jié)果的影響，B正確；可以將未接種的培育基在相同條件下培育作為比照，以推斷培育基滅菌是否徹底，C正確；可篩選出分解尿素的細(xì)菌的培育基是以尿素為唯一氮源的選擇培育基，加入剛果紅指示劑的培育基可篩選出分解纖維素的細(xì)菌，D錯誤。6．下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”試驗操作的敘述，其中錯誤的是()A．用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上C．將試驗組和比照組平板倒置，37℃恒溫培育24～48小時D．確定比照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的試驗組平板進(jìn)行計數(shù)答案D解析檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)，用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上，將試驗組和比照組平板倒置，37℃恒溫培育24～48小時，在確定比照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30～300的一組平板為代表進(jìn)行計數(shù)，D錯誤，A、B、C正確。7．(2024·全國卷Ⅰ)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸肯定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入肯定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培育基?；卮鹣铝袉栴}：(1)M培育基若用于真菌的篩選，則培育基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制________的生長，加入了鏈霉素的培育基屬于__________培育基。(2)M培育基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長供應(yīng)了多種養(yǎng)分物質(zhì)，養(yǎng)分物質(zhì)類型除氮源外還有________________(答出兩點即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后，可參加合成的生物大分子有________________(答出兩點即可)。(3)若在M培育基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培育，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是________，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是______________________________________。(4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133；乙同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其緣由是____________________________________________________。答案(1)細(xì)菌選擇(2)碳源、無機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的菌落四周淀粉被水解，形成透亮圈(4)乙同學(xué)的結(jié)果中，1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差解析(1)鏈霉素是一種抗生素，可以抑制細(xì)菌的生長，加入了鏈霉素的培育基能篩選出真菌，該培育基屬于選擇培育基。(2)微生物生長須要多種養(yǎng)分物質(zhì)，除氮源外，還須要碳源、無機(jī)鹽、水以及特別養(yǎng)分物質(zhì)等。氮元素是蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的組成元素，因此氮源進(jìn)入細(xì)胞后，可參加合成的生物大分子有蛋白質(zhì)和核酸。(3)淀粉遇碘液會變成藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的菌落四周淀粉被水解，形成透亮圈，可依據(jù)透亮圈來篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物。(4)乙同學(xué)結(jié)果不合理，因為1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差，不能簡潔的用其平均數(shù)計算得到最終結(jié)果。微生物的篩選與鑒別方法(1)微生物的篩選方法單菌落挑取法利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體培育基表面，干脆依據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物選擇培育法利用選擇培育基對微生物進(jìn)行選擇培育，干脆獲得目的微生物鑒定培育法利用鑒別培育基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物(2)微生物的鑒別方法菌落特征鑒別法依據(jù)微生物在固體培育基表面形成的菌落的形態(tài)、大小、隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別指示劑鑒別法如培育基中加入酚紅指示劑，培育某種微生物后，培育基變紅說明該種微生物能夠分解尿素染色鑒別法如利用剛果紅染色法，依據(jù)培育基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透亮圈來鑒別分解纖維素的微生物方向真題體驗1.(2024·全國卷Ⅲ)回答下列與細(xì)菌培育相關(guān)的問題。(1)在細(xì)菌培育時，培育基中能同時供應(yīng)碳源、氮源的成分是________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”______________________________________。(2)用平板培育細(xì)菌時一般須要將平板________(填“倒置”或“正置”)。(3)單個細(xì)菌在平板上會形成菌落，探討人員通?？梢罁?jù)菌落的形態(tài)、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，緣由是__________________________。(4)有些運用后的培育基在丟棄前須要經(jīng)過________處理，這種處理可以殺死丟棄物中全部的微生物。答案(1)蛋白胨不同細(xì)菌生長繁殖所需的最適pH不同能夠硝化細(xì)菌可以利用空氣中的CO2作為碳源(2)倒置(3)在肯定的培育條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征(4)滅菌解析(1)蛋白胨中含有碳元素和氮元素，可為細(xì)菌生長供應(yīng)碳源和氮源，葡萄糖只能供應(yīng)碳源，NaNO3只能供應(yīng)氮源。不同細(xì)菌生長繁殖所須要的最適pH不同，制備培育基時要依據(jù)所培育細(xì)菌種類的不同來調(diào)整pH。硝化細(xì)菌是自養(yǎng)生物，可通過化能合成作用利用空氣中的CO2合成有機(jī)物，所以在沒有碳源的培育基上也能生長。(2)用平板培育細(xì)菌時，一般將平板倒置，防止水滴倒流到培育基中造成污染。(3)在肯定的培育條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，因此探討人員可依據(jù)菌落的這些特征初步區(qū)分微生物的種類。(4)消毒僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物，滅菌可殺死物體內(nèi)外全部的微生物，包括芽孢和孢子。運用后的培育基丟棄前要進(jìn)行滅菌處理，防止其中的微生物感染操作者或污染環(huán)境。2．(2024·全國卷Ⅲ)回答下列與酵母菌有關(guān)的問題：(1)分別培育酵母菌通常運用______________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培育基，該培育基應(yīng)采納________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培育一段時間后會視察到菌落，菌落的含義是____________________________。(2)酵母菌液體培育時，若通入氧氣，可促進(jìn)______________(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)；若進(jìn)行厭氧培育，可促進(jìn)________________(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。(3)制作面包時，為使面包松軟通常要在面粉中添加肯定量的酵母菌，酵母